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1.
对一株牛源大肠杆菌JS株的菌体抗原及菌毛特性进行了研究。大肠杆菌JS株在Minca培养基上37℃培养18～24h,能够同时良好地表达菌毛抗原K99和F41。采用保温法和裂解法进行了菌毛提纯,取得了较好的效果。应用玻片凝集试验﹑抗D-甘露糖微量血凝试验(MRHA)进行菌毛特异性和粘附性研究。结果表明,K99、F41两种菌毛抗原不存在交叉凝集反应,其血凝谱能凝集牛﹑鸡的红细胞。 相似文献
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《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2017,(1)
采用杂交瘤单克隆抗体制备技术,获得4株能稳定分泌产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)F4菌毛特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为8EH2、8EH3、9E10、11D4。免疫印迹和凝集反应结果表明:这4株单抗均能与纯化的F4菌毛蛋白发生特异性反应,且与F4大肠埃希菌不同血清型变异株F4ab、F4ac和F4ad发生特异性肉眼可见的凝集反应;而与F18、F6(987P)、F5(K99)产肠毒素大肠埃希菌参考株、分离株以及肠炎沙门氏菌参考株50336、分离株等多种肠杆菌科细菌无任何交叉反应。对单抗亚类的特性检测结果显示,这4株单抗均属于IgG1抗体,且主要识别F4ac的抗原表位,其中,8EH2、8EH3、9E10也能够较好地识别F4ab的抗原表位。结果说明F4菌毛凝集性单克隆抗体为ETEC F4感染的快速特异诊断提供技术基础。 相似文献
3.
广东省清远地区3群肉鸡临床表现不同程度的肿眼、流鼻水等症状,临床治疗处理效果不理想。在3群病鸡中各取病鸡鼻窦腔分泌液进行细菌分离培养、革兰氏和瑞氏染色,并对分离菌株进行了玻片凝集和生化试验。结果表明,革兰氏染色呈阴性,瑞氏染色呈蓝色,油镜下可见细菌呈短杆菌或球杆菌,两极着色,3群分离株均与副鸡嗜血杆菌A型血清完全凝集反应,与B和C型血清无凝集反应,确定肿眼肉鸡病原为A型副鸡嗜血杆菌。同时选用多种药物研究了该病原菌的药敏性,结果显示,A型副鸡嗜血杆菌对头孢噻呋、氟苯尼考和青霉素3种药物均表现极敏。 相似文献
4.
本试验主要选择了引起猪黄白痢的常见致病菌株E.coli,K88,通过对其在专用培养基上增菌培养,制成油佐剂灭活苗免疫产蛋母鸡,运用微量凝集试验测母鸡抗体水平,待抗体水平达8 log2以上时,收取鸡蛋制成高免卵黄。选择6窝56头刚出生的未吮乳仔猪(母猪未免疫),第1,2窝16头用E.coli K88标准菌株500亿／头口服人工感染,第3,4窝18头口服E.coli K88标准菌株250亿／头,第5窝10头作为抗生素治疗对照组,第6窝12头为空白对照组,观察记录发病情况,待明显发病后,对第1~4窝仔猪用自制抗E.coli K88高免卵黄口服治疗。试验结果表明,口服抗E.coli K88菌株高免卵黄抗体对人工感染仔猪黄痢与白痢的治愈率分别为93.75％和88.89％,而应用抗生素庆大霉素的治愈率仅为50％。 相似文献
5.
【目的】制备鼠伤寒沙门菌高免血清并纯化抗体,构建免疫磁珠,进行吸附效果评价,为建立鼠伤寒沙门菌快速检测方法奠定基础。【方法】利用试验兔制备高免血清,检测效价后纯化提取IgG抗体,纯化后的抗体采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺方法与四氧化三铁磁性纳米颗粒偶联,制备出鼠伤寒沙门菌免疫磁珠。利用抗原抗体反应原理,通过免疫磁珠对样品中的鼠伤寒沙门菌进行富集分离,将鼠伤寒沙门菌捕获到磁珠表面,达到检测鼠伤寒沙门菌的目的。【结果】制备出的血清效价达1∶51 200,纯化后的抗体特异性强,仅与鼠伤寒沙门菌有凝集反应,与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌均无凝集反应;制备的免疫磁珠能够富集奶样样品、肉样样品与蛋黄样品中的鼠伤寒沙门菌,灵敏度为101CFU/mL。【结论】该研究制备的鼠伤寒沙门菌免疫磁珠,能够有效富集各种样品基质中的鼠伤寒沙门菌,有望用于鼠伤寒沙门菌快速检测方法的建立。 相似文献
6.
7.
应用奶牛乳房炎大肠杆菌分离株灭活菌苗免疫健康家兔,制备兔抗大肠杆菌高免血清。对该大肠杆菌菌体裂解产物进行SDS-PAGE并进行Westernblot分析,结果该菌株与稀释一定倍数的兔高免血清反应,产生3条特异性带,其中约33ku蛋白为主要免疫原性蛋白。对其进行电洗脱纯化,得到单一条带的目的蛋白。 相似文献
8.
猪瘟病毒糖基化E2蛋白和E0蛋白的协同免疫保护作用 总被引：2，自引：0，他引：2
为了研究杆状病毒表达的糖基化亚单位疫苗的协同免疫保护作用,将重组杆状病毒感染Sf9细胞制备猪瘟E2、E0重组蛋白,Western blot检测蛋白表达和糖基化情况。用重组蛋白单独或联合免疫家兔,检测血清中抗体水平变化。在首免后4周用猪瘟兔化弱毒疫苗C株攻毒家兔,监测其体温变化,并运用RT-PCR检测家兔脾脏中病毒RNA。结果表明,E2、E2+E0免疫组兔均可诱导产生高水平的抗体和中和抗体,但两组间差异不显著。攻毒后E2免疫组2/5兔出现轻热症状,1/5兔脾脏病毒阳性;E2+E0组兔均未出现发热症状,也未检测到C株病毒RNA。E0组不能诱导兔产生中和抗体,但也能提供部分保护(2/5)。可见,基于E2、E0的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,且两者联合使用具有协同作用,有望成为新型亚单位疫苗的候选抗原。 相似文献
9.
为了解吉林省猪源E·coli致病性菌株K_(88)~+抗原株的分离率,作者用从国外引入的标准K_(88)~+抗原株自制了K_(88ac)因子血清,并用该因子血清和m·r·e血凝反应检测了由三个地区、十个猪场分离的81株病源性E·coli。两种检测方法的检出率均为7.4％(6株)。但用以上两种方法检测已知抗原式的5株E·coli时,m·r·e血凝反应的检出率为1/5;K_(88ac)因子血清凝集反应的检出率为3/5。用提取K∈LD型抗原的方法证明了该3株菌均有L抗原。这说明因子血清凝集反应较m·e·r血凝反应的敏感性高。 相似文献
10.
F18大肠杆菌黏附素受体结合域鉴定新方法 总被引：1，自引：1，他引：0
运用DNA重组技术将F18ab和F18ac大肠杆菌黏附素fedF亚单位内的第60～109位氨基酸残基区段(fedF1)和fedF全基因克隆入V型分泌系统MisL的载客结构域上,经DNA测序确证其正确阅读框后,含重组菌质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1经厌氧诱导后,与断奶仔猪小肠上皮细胞进行体外黏附试验。结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述重组菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附。上述重组菌均能与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子高免血清发生玻板凝集反应。而FedF突变体FedF(M)的重组质粒菌则失去上述凝集和黏附特性。证明F18大肠杆菌黏附素fedF基因及其基因片段fedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,F18ab和F18ac黏附素FedF直接介导F18大肠杆菌与易感仔猪小肠上皮细胞表面大分子受体黏附结合,fedF1为黏附素FedF的受体主要结合域,其His88、His99是FedF黏附素受体结合域的重要氨基酸残基。 相似文献
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从浙江省规模化猪场采集仔猪断奶腹泻病料,经细菌分离纯化、G染色、生化试验和小鼠致病性试验等,鉴定得到56株病原性大肠杆菌。通过11种主要致病性大肠埃希氏菌O抗原的血清型鉴定,56株致病性大肠杆菌中定型了33株,共覆盖了11种血清型,其中O149、O139、O8为优势血清型,共17株,占定型菌株的51.52%。通过棉籽糖发酵试验、甘露糖血凝抵抗试验(MRHA)和血凝抑制试验(MRHI),确定37株为K88,占66.07%(其中K88ab有8株,占K88菌株的21.62%),其余的未能定型。这些血清型与已报道的常见血清型间存在一定差异。 相似文献
12.
为了摸清鸡源大肠埃希氏菌的菌毛与致病性的关系而进行了本课题的研究。我们从内蒙古自治区7个盟市9个具有代表性的养鸡场死胚和死雏鸡中分离到的203株大肠埃希氏菌中选择了13株有致病性和2株无致病性的菌株进行电子显微镜观察。通过观察发现,我们所分离到的鸡致病性大肠埃希氏菌菌株在适宜的条件下培养均能形成菌毛,而无致病性大肠埃希氏菌未能形成菌毛。 相似文献
13.
Detection of an antigen associated with acute leukemia 总被引：10，自引：0，他引：10
Antiserums to a purified cell membrane component from a Burkitt's lymphoma tissue culture cell line were produced in rabbits. These antiserums were cytotoxic to peripheral white blood cells from 8 of 15 patients with acute leukemia and 5 of 41 relatives, but not to peripheral white blood cells from leukemia patients in clinical remission or from normal individuals. These antiserums appear to be detecting an acute leukemia associated antigen or antigens. 相似文献
14.
将菌毛化的鸡大肠杆菌国内分离株GL7(O78)灭活后作为免疫原,经淋巴细胞杂交瘤技术,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,获得3E1、3H1、4A9和5G4共4株能稳定分泌1型菌毛抗体的杂交瘤细胞,它们均为IgG。免疫印迹试验结果表明:4株单抗均能同鸡大肠杆菌1型菌毛反应,识别分子质量为17~17.5 ku的菌毛蛋白。同时对鸡大肠杆菌表达1型菌毛的分离株进行检测,结果表明同一血清型或不同血清型间的鸡病原性大肠杆菌1型菌毛之间存在差异,O血清型不能完全体现菌株间的遗传相关性。 相似文献
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Antiserums to macroglobulins were prepared by a convenient and time-saving procedure in which acrylamide gel was used as adjuvant. After electrophoresis in acrylamide gel, the macroglobulin zone from the gel pattern was homogenized and injected directly into rabbits without intermediate isolation of the purified antigen. The resulting antiserums exhibited high titers of antiserum to macroglobulin and showed only weak cross-reactions with other gamma globulins in serologic tests. 相似文献
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3个血清型鸡源大肠杆菌1型菌毛蛋白抗原位点变异分析 总被引：1，自引：2，他引：1
采用Goldkey及DNA Star分析软件对发表的3个不同血清型的鸡大肠杆菌1型菌毛结构基因(pilA)进行同源性及抗原位点分析。结果显示,3种鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))l型菌毛pilA基因相似性为91.36％～98.38％,所编码的氨基酸同源性为93.50％～97.84％;3种血清型鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))1型菌毛蛋白二级结构在1～73位及150～185位氨基酸的二级结构基本相似,而111～150位氨基酸的α螺旋与β折叠的数量有所不同。菌毛蛋白亲水性、抗原性及抗原决定簇预测表明,来源于3种血清型大肠杆菌的1型菌毛蛋白在l～110位及150～184位氨基酸存在相似的二级结构及抗原位点,且不同血清型之间存在一定的共同抗原。 相似文献
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Radioimmunoassay for human procollagen 总被引：2，自引：0，他引：2
Rabbit antiserums were produced against the procollagen molecule secreted into the medium of cultured human skin fibroblasts. The isolated antigenic, amino terminal portion of the procollagen molecule was purified, labeled with iodine-125, and used in a radioimmunoassay which detected nanogram quantities of the same antigen. With the assay, immunologically identical molecules were detected in the culture mediumn of different strains of human fibroblasts and in normal human serums. Serumns from human cord blood contained a 12-fold higher concentration of the antigen than serums from adults, while serums other vertebrates gave reactions to incomplete cross-reactivity or non-reactivity. 相似文献
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利用淋巴细胞杂交瘤技术已获得10株能稳定分泌抗大肠埃希氏菌K99粘着素单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为EK409、EKA7—3、EKA7—5、EKC6、EKD4—12、EKD4—19、EKA2、EKDS—12、EKD3和EKB8。除EKD4—12单抗的亚类为IgG_3以及EKA_2为IgG_2a外,其余单抗均是IgG_1。上述前3株单抗均具有直接凝集(DA),免疫荧光(IF)和ELISA3种免疫学反应,而其余单抗都只有IF和ELISA两种反应特性。无DA反应性。在这3种反应中,反应强度和效价最高的是EK409和EKA7—3,二者小鼠腹水的DA滴度可达1:2048,IF和ELISA的效价均为10~(-6)。这两株单抗能与所试的各株K99+菌呈阳性反应,是型特异单抗。余下的8株单抗中,EKA7—5只对K12:K99+和含有O101抗原的K99+的两类菌株呈阳性反应,其余7株单抗仅对O抗原为101的K99+菌发生反应.所有的K99单抗对所试的K88+或987P+或F41+的大肠秆菌均以夏其他种肠道杆菌均无交叉反应。EK409和EKA7—3单抗还具有抑制MRHA反应的特性。 相似文献
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据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,由Oligo 6.0设计一对引物,以提取的鸭源致病性大肠杆菌基因组为模板,进行PCR扩增,获得了5株鸭源致病性大肠杆菌的pilA基因,序列测定和生物信息学分析表明:鸭源致病性大肠杆菌pilA基因核苷酸序列长度为549 bp,编码182aa,与人源、鸡源及猪源大肠杆菌pilA基因之间核苷酸同源性为87.3%~100.0%,氨基酸同源性为87.5%~100.0%。对不同宿主来源大肠杆菌pilA基因所编码蛋白的二级结构、亲水性、抗原性、抗原表位进行预测分析比较,结果显示Ⅰ型菌毛间具有一定的结构相似性,并存在一定的共同抗原位点;系统进化分析表明,各菌株之间的pilA基因遗传相关性与其宿主来源及血清型之间没有严格的相关性。 相似文献
20.
为了调查金华地区仔猪大肠杆菌的耐药性及流行血清型,从金华地区21个猪场采集96份仔猪大肠杆菌病病料进行病原菌的分离和生化鉴定, 结果分离到大肠杆菌79株,其中致病性大肠杆菌68 株,对68 株致病性大肠杆菌进行了8 种抗生素敏感性试验, 发现对丁胺卡那霉素、氟苯尼考、头孢噻呋最敏感, 庆大霉素、红霉素、环丙沙星等抗菌药虽然有一定效果,但大多是低敏感或中度敏感,而对氨苄青霉素 、诺氟沙星则基本耐药。对分离的68 株致病菌进行了血清型鉴定表明,共有O13,O48,O54,O98,O146,O149,O161等7 种血清型, 其中O13,O54,O98为优势血清型。 相似文献