昆明小鼠早期胚胎体外发育阻滞原因分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

叶荣  陈学进  杨利国  郭宪  邢凤英 《中国兽医学报》2004,24(4):402-404

为了分析小鼠早期胚胎在体外发育阻滞的原因 ,建立早期胚胎体外培养系统 ,应用几种不同的培养系统对昆明小鼠单细胞胚胎在体外培养了 96～ 12 0 h。结果表明 ,小鼠单细胞胚胎在 M1 6 和 BWW培养液中卵裂均受到阻滞 ,且两者之间差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;CZB和 HTF培养液能有效地克服小鼠胚胎的 2 -细胞发育阻滞 ,与 M1 6 和 BWW相比 ,2 -细胞卵裂率和囊胚率均存在显著性差异 (P<0 .0 1) ;在 M1 6 培养液中添加牛磺酸对早期胚胎发育有促进作用 (P<0 .0 1) ;小鼠早期胚胎在 CZB和牛输卵管上皮细胞 (COEC)共培养体系中的卵裂率较对照组明显提高 (P<0 .0 5 )  相似文献   

转sMTPGH基因小鼠胚胎的体外培养   总被引：1，自引：0，他引：1  

孙燕  孙新明  侯蓉  张家骅 《中国兽医学报》2002,22(4)

采用纯化的羊金属硫蛋白 (s MT)启动子指导的猪生长激素 (PGH )基因 (s MTPGH)为显微注射片段 ,将其导入小鼠受精卵原核 ,比较了几种不同培养液对导入外源基因的小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明 ,改进的 M16培养液(用 m M16表示 )能有效克服 2 -细胞阻断现象 ,并使转基因胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段。在 m M16培养液的基础上 ,再加入表皮生长因子 (EGF) ,可使 1-细胞胚胎发育到囊胚的比率进一步提高。在 3种培养液 (M16、m M16、m M16 EGF)中 ,转基因胚胎突破 2 -细胞阻断期的比率分别为 12 %、6 8%、90 % ,发育到囊胚期的比率分别是 0 %、2 0 %、4 3%。采用 PCR方法检测 5 7枚经体外培养发育至囊胚的显微注射胚胎 ,4枚扩增出阳性条带 ,外源基因在囊胚期胚胎的滞留率为 7%。  相似文献   

活性氧(ROS)对小鼠早期胚胎染色体相对长度的影响     

李钟淑  高见红  方南洙  金庆国  柳海星 《黑龙江畜牧兽医》2006,(12):7-10

通过对小鼠体内发育的囊胚、扩张囊胚和从1-细胞期取出在CZB培养液中培养的囊胚、扩张囊胚的染色体相对长度进行统计分析,在各号染色体相对长度出现显著性差异的同时,发现体外培养的比体内发育的染色体相对长度短;体外CZB培养的不同时期添加外源性过氧化氢,发育至囊胚、扩张囊胚阶段,制作胚胎标本,观察胚胎的染色体相对长度。结果表明:不同时期添加外源性过氧化氢组比对照组的染色体相对长度短。说明经过氧化氢处理之后存活下来的胚胎染色体相对长度发生了变化。  相似文献   

猪胚胎的体外培养     

M.L.Reed  郭年藩 《中国畜牧兽医》1992,(4)

猪胚胎4—细胞期之前培养的难度较大。这期间的体外发育障碍可以采用一些方法加以克服,而使其从1—细胞期发育至囊胚期。试验证实,小鼠输卵管可用以培养猪胚胎;猪胚胎和输卵管细胞一起培养或者培养液里补充猪输卵管液可以提高培养成功率。简化改进培养液后观察到:谷氨酰胺(glutamine)可以作为猪胚胎从结合子发育至囊胚过程中的能重来源;葡萄糖对猪胚胎体外发育没有抑制作用;培养液里补充牛磺酸(taurine)和亚牛磺酸(hypotaurine)可提高猪胚胎的发育程度。迄今已极道的猪胚胎培养液有多种,但是对猪胚胎体外发育障碍的原因还未见报道,现有的培养方法还有待改进。  相似文献   

转sMTPPGH基因小鼠胚胎的体外培养     

孙燕  侯蓉 《中国兽医学报》2002,22(4):387-389

采用纯化的羊金属硫蛋白（sMT)启动子指导的猪生长激素（PGH)基因(sMTPGH)为显微注射片段，将其导入小鼠受精卵原核，比较了几种不同培养液对导入外源基因的小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明，改进的M16培养液（用mM16表示）能有效克服2－细胞阻断现象，并使转基因胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段。在mM16培养液的基础上，再加入表皮生长因子（EGF），可使1－细胞胚胎发育到囊胚的比率进一步提高。在3和培养液（M16,mM16,mM16 EGF)中，转基因胚胎突破2－细胞阻断期的比率分别为12％，68％，90％，发育到囊胚期的比率分别是0％，20％，43％。采用PCR方法检测57枚经体外培养发育至囊胚的显微注射胚胎，4枚扩增出阳性条带，外源基因在囊胚期胚胎的滞留率为7％。  相似文献   

小鼠卵母细胞孤雌激活及孤雌胚体外培养研究     

李永强  武建中  王建华  李跃民  陈凯 《畜牧兽医科技信息》2008,(12)

本研究比较了几种化学激活剂对小鼠卵母细胞孤雌激活的影响以及激活后在不同培养培养液中的发育情况,并探讨了一种有效地孤雌激活和体外培养方法。分析结果表明:乙醇 6-DMAP(2.5mmol/L,4h)和SrCl2 6-DMAP(2.5mmol/L,4h)组的卵裂率和囊胚率都显著高于其他各组,说明他们能够较好的激活小鼠卵母细胞,而且,乙醇组合优于SrCl2组合,单个化学激活剂不能完全激活小鼠卵母细胞;激活的昆白小鼠MⅡ卵母细胞在含15?S的CZB培养液中可较好地克服2-cell阻滞并形成桑囊胚,在培养48h添加1.1mg/mL葡萄糖对胚胎的继续发育有利。  相似文献   

昆明白杂种鼠胚胎体外培养的研究     

李云龙  曹梦芝 《黑龙江畜牧兽医》1992,(10):29-30

利用CMRL—1066和国产的其它药品对昆明白杂种小鼠2-细胞期的胚胎,进行了体外培养试验。已经成功地将2-细胞胚胎在体外培养条件下使之生长发育到卵圆筒阶段。从2-细胞期开始计算,囊胚形成率为70％、孵化率为30％、附植率为2％、卵圆筒胚胎的形成率是1％。实验中发现,把2-细胞期小鼠胚胎体外培养到卵圆筒期比体内发育到同阶段推迟1—2天。卵圆筒期胚胎的形成率与国外报道的形成率(24％)相比较,仍然很低。这可能与小鼠的品种、国产药物的纯度和二氧化碳条件有关。  相似文献   

影响小鼠早期胚胎发育的几个重要因素   总被引：2，自引：0，他引：2  

李光鹏  赖良学 《中国兽医学报》1998,18(2):196-198

以Ｗｈｉｔｅｎ氏液为基本培养液,研究了卵丘细胞、谷氨酰胺及不同浓度的葡萄糖对ＨＣＧ注射后１７～１８ｈ、２５～２７ｈ和３６～３８ｈ昆明小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明,不论葡萄糖或谷氨酰胺存在与否,卵丘细胞与受精卵的共同培养对胚胎克服体外发育阻断无明显效果。葡萄糖能抑制１－细胞胚胎发育,促进４－细胞以后的胚胎发育。谷氨酰胺是小鼠早期胚胎发育的良好能源物质,可使９６％（３０８／３２１）的体外发育到２－细胞的胚胎克服阻断而继续发育到４－细胞。谷氨酰胺与葡萄糖联合使用,则可使小鼠受精卵的囊胚发育率达５７．５％（２２９／３９８）。ＨＣＧ注射后３６～３８ｈ的小鼠胚胎能利用葡萄糖。  相似文献   

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在紫花苜蓿干旱耐受性中的响应     

熊丽丽  闫霜  李萍  杨国柱  尹卫  严晓霞  张韩 《草业学报》2018,27(2):48-56

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PDH,EC1.1.1.49)是磷酸戊糖途径的关键限速酶,参与NADPH和磷酸核糖的合成,在植物响应生物胁迫和非生物胁迫方面有重要作用。研究了葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)在紫花苜蓿中对干旱胁迫的响应。首先采用不同浓度的PEG模拟干旱胁迫处理紫花苜蓿幼苗,通过测定不同PEG浓度下紫花苜蓿幼苗的株高、根长、干重、过氧化氢(H₂O₂)、丙二醛(MDA)含量的变化筛选胁迫浓度来确定干旱胁迫的条件。其次,检测胁迫浓度下紫花苜蓿幼苗中G6PDH的活性变化。第三,通过添加G6PDH的抑制剂Na₃PO₄,观察干旱胁迫下紫花苜蓿幼苗的生长情况并测定MDA、H₂O₂含量以及G6PDH活性的变化。最后,综合分析G6PDH对干旱胁迫的响应。结果显示,不同浓度PEG处理下,紫花苜蓿幼苗的生长受到限制,例如株高、根长、鲜重、干重都随PEG浓度的增加而逐渐减小,MDA和H₂O₂的含量随PEG浓度的增加而增加,其中以15% PEG处理的影响最大;同时,也发现随PEG浓度的增加紫花苜蓿幼苗中G6PDH的活性也较对照增加,15%PEG处理时达最高值;故15%的PEG处理为干旱胁迫模拟最佳条件。通过添加G6PDH的抑制剂Na₃PO₄后发现,干旱胁迫下紫花苜蓿幼苗的生长明显地受到抑制,其叶片中MDA、H₂O₂含量分别较干旱胁迫下的增长28.4%、19.9%,G6PDH的活性也明显降低了49.4%。以上结果初步说明G6PDH可能参与调节了干旱胁迫引起的氧化胁迫。  相似文献   

小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球体外培养体系的研究     

胡辛怡  周光斌  杨中强  刘国世  朱士恩 《中国畜牧杂志》2006,42(11):12-15

以CZB为基础培养液,培养小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球,研究葡萄糖、牛磺酸和猪输卵管上皮细胞共培养在其体外发育中的作用。结果表明:牛磺酸添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为29%、30%和14%、14%,无显著性差异(P>0.05)。添加葡萄糖后,4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%和19%,有显著提高(P<0.05)。含有葡萄糖而牛磺酸的添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%、38%和19%、20%,无显著性差异(P>0.05)。各组内4、8-细胞胚胎单卵裂球形成的囊胚细胞数分别为(10.44±1.24～(12.43±1.18)和(7.57±0.97)～(8.48±1.16),均无显著性差异(P>0.05)。4、8-细胞胚胎单卵裂球与猪输卵管上皮细胞共培养,其囊胚发育率分别为47%和26%,囊胚细胞数分别为(17.57±1.13)和(11.43±0.92),均高于单一培养(P<0.05)。  相似文献