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1.
为制备抗Cu~(2+)的高效价、敏感、特异的单克隆抗体,采用已合成的铜离子人工抗原Cu~(2+)-ITCBEBSA免疫Balb/C小鼠,通过间接ELISA和阻断ELISA筛选备用小鼠,用细胞融合技术制备抗Cu~(2+)的单克隆抗体。结果筛选到4株特异性强、灵敏度高的杂交瘤细胞,其中杂交瘤细胞株2B8培养上清中的抗体效价采用间接ELISA检测为1∶(1.28×10~3),用其制备的腹水中抗体效价为1∶(5.12×10~5),该单克隆抗体为IgG1/κ型,对Cu~(2+)-EDTA的半数抑制质量浓度(IC_(50))为29.78μg/L,与Zn~(2+)-EDTA的交叉反应率(CR)为26.0%,与其他金属螯合物没有交叉反应,表明获得特异性较好的抗Cu~(2+)的单克隆抗体,可用于铜离子的免疫学检测。 相似文献
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《江苏农业学报》2017,(2)
为制备特异性和灵敏度较高的抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体,并建立双抗夹心酶联免疫吸附检测法,用于检测生鲜食品中的福氏志贺氏菌2a。本研究利用自制的福氏志贺氏菌2a抗原免疫BALB/c小鼠,并用杂交瘤技术进行细胞融合,经筛选克隆后,获得3株分泌抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞,分别命名为5C12、1B5和6A11。3株杂交瘤细胞注射进小鼠腹腔后,诱导产生的腹水中抗体的效价为1∶2.048×10~5~1∶1.024×10~5,免疫球蛋白亚型均为IgG。3株抗体识别抗原表位的最佳配对为5C12和6A11,由此建立双抗夹心ELISA体系,测得其灵敏度为1 000 CFU/g,且具有良好的特异性。 相似文献
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抗牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的研制 总被引：1，自引：0，他引：1
将含有牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV1)囊膜糖蛋白E2编码基因的真核表达质粒pEC143免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组E2蛋白纯化产物为检测抗原,经间接ELISA法筛选和3次有限稀释法克隆,得到1株能稳定分泌抗BVDV1和BVDV2单克隆抗体的杂交瘤细胞株.该3D8株单抗能识别BVDV1标准毒株(NADL、OregonC24V)、BVDV2标准毒株(890、104)、2株BVDV1分离株和3株BVDV2分离株,而不能识别牛轮状病毒、牛疱疹病毒1型,显示出良好的特异性.阳性杂交瘤细胞的上清液、腹水ELISA抗体效价分别为2~9和10×2~7,为IgM亚类.其单克隆抗体杂交瘤细胞株的获得,为建立单抗介导的检测BVDV1和BVDV2抗原和抗体的血清学方法和实现标准化诊断奠定基础. 相似文献
4.
通过抗兔病毒性出血症病毒(RHDV)杂交瘤细胞株的筛选,其中一株连续克隆3次,在培养瓶中传代1个月,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定,分泌单克隆抗体(McAb)性能稳定。杂交瘤细胞株的小鼠腹水滴度为1:1600～1:3200。利用McAb腹水作一抗,经免疫荧光检测RHDV感染的细胞片,可发现细胞核内有特异性荧光颗粒,滴度为1:200。杂交瘤细胞株染色体的分析,染色体数在98±10,符合杂交瘤细胞株的特征。经琼脂扩散法对McAb亚类的分析测定结果与抗鼠IgG和IgG_3出现沉淀线。 相似文献
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6.
用杂交瘤技术所生产的单克隆抗体,为制备特异性抗体及钧端螺旋体(钩体)的分型研究提供新的试剂.我们应用国内标准株秋季型钧体建立了3个杂交瘤细胞株,定名为LA_(11),LA_(15),LA_(13).它们对秋季型钩体均有特异性反应.杂交瘤细胞注入同系小鼠腹腔,可诱生高效价单克隆抗体腹水.杂交瘤细胞培养上清液经鉴定分别属IgG_1,IgG_2,IgM. 应用多种钩体活抗原混合免疫接种BALB/C小鼠、取其脾细胞与FO骨髓瘤细胞融合,在一次融合中成功地建立了差异较大的不同亚类杂交瘤细胞株,这在动物方面国内尚未见报导. 相似文献
7.
应用淋巴细胞杂交瘤技术,融合经水稻细菌性条斑病病原菌(Xanthomonas campestris pv.oryzicola)免疫的BALB/C小鼠脾细胞和Sp2/O骨髓瘤细胞,经细条病菌典型菌株R17,R25和GX-1单独及三者混合包被进行ELISA检测筛选,建立了能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株18G 9,19D8,21F2,21G3,25E6和26F9细胞株。体外连续传代培养三个月,液氮冻存四个月后复苏培养,分泌抗体稳定。六株杂交瘤细胞的腹水单克隆抗体ELISA效价在1:2000左右。各株细胞的培养上清液ELISA效价为1:8左右。18G9,19D8和25E6细胞株所分泌的抗体为小鼠IgM类,21F2和21G3分泌的抗体为小鼠IgG_3亚类,26F9分泌的抗体为小鼠IgG_(2b)亚类。根据与植物病原细菌4个属6个种的20个不同菌株的特异性反应,将六株单克隆抗体分为A,B,C三组,20个菌株分为3个血清型和1个菌株群。 相似文献
8.
采用纯化的鸡IgG免疫环磷酰胺预处理BALB/c小鼠后，再用亲和层析纯化的鸡IgM进行免疫，运用淋巴细胞杂交瘤技术，以间接ELISA法筛选，获得了5株能稳定地分泌抗鸡IgMμ链特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经ELISA交叉反应性试验和羊抗鸡IgMμ链抗血清阻断试验，证明这5株单克隆抗体均是抗鸡IgMμ链特异性的。采用环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体，其杂交瘤细胞阳性率为8.696%,而用常规免疫法为4.032%,前者比后者杂交瘤细胞阳性率提高1倍以上。经两次有限稀释法克隆和比较后，免疫抑制法获得5株单克隆抗体，而常规免疫法只获得2株单克隆抗体，前者有3株单克隆抗体腹水ELISA效价达到10#+（-12）、10#+（-14）、10#+（-15）；后者单克隆抗体腹水ELISA效价为10#+（-5）和10#+（-6）。因此，与常规免疫法相比，环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体具有杂交瘤细胞阳性率高，分泌的单克隆抗体特异性强、滴度高等优点，值得推广。 相似文献
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以从黑龙江省腹泻犊牛粪便中分离的牛轮状病毒(bovine rotavirus)为抗原,免疫6～8周龄BALB/_c小鼠,取血清抗体阳性小鼠的脾细胞与SP_(2/0)骨髓瘤细胞融合。用ELISA间接法检测抗体,通过有限稀释法,克隆出一株分泌抗牛轮状病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经鉴定,此杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体为IgM,轻链为K链。通过连续传代证明,此杂交瘤细胞株具有稳定分泌单克隆抗体的性质。杂交瘤细胞诱生BALB/_c小鼠腹水的单克隆抗体滴度可达1:10000以上。 相似文献
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蜜蜂螺原体单克隆抗体的制备及其基本性状研究 总被引：1，自引：1，他引：1
用蜜蜂螺原体(CH-1)免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,获得3株稳定分泌 CH-1单克隆抗体(简称单抗,下同)的杂交瘤细胞株。腹水单抗效价介于12800~(-1)～6553600~(-1)之间。其免疫球蛋白种类为 IgG1和IgG3。腹水单抗与同源抗原的反应能被兔多克隆抗血清阻断。杂交瘤细胞染色体为96条。反复冻融、低温保存以及 pH 试验对单抗有一定影响。单抗与中国的蜜蜂螺原体分离物有反应,而与美国蜜蜂分离物无反应。 相似文献
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生姜蛋白酶和生姜汁对猪肉嫩化效果的比较 总被引：11，自引：0，他引：11
本文研究了生姜蛋白酶及生姜汁对猪肉的嫩化效果，对其用量、pH值、预处理温度进行了测试对比。结果表明：生姜蛋白酶及生姜汁对猪肉的嫩化效果十分显著(P≤O．01)，生姜蛋白酶最佳用量为O.01％，姜汁最佳用量5％，最佳pH都为7.O，最佳预处理温度生姜蛋白酶为300℃，生姜汁为40℃；并且生姜蛋白酶及生姜汁对猪肉的嫩化效果极为相似，可以证明，生姜汁对肉类的嫩化作用就是生姜汁中的生姜蛋白酶作用的结果。 相似文献
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农用土地综合评价的一种新方法 总被引：9，自引：0，他引：9
利用遥感（ＲＳ）与地理信息系统（ＧＩＳ）和一门新兴的系统科学－－－物元分析法,以武汉市狮子山地区为样区对农用土地综合评价进行了研究。研究结果表明,狮子山地区的土地质量中等偏上,符合当地的实际情况。该研究对于解决以往土地评价中存在的一些问题,如权重的不确定、人为因素影响过多等提供了一些新的思路与方法。 相似文献
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谷氨酰胺转胺酶对酸奶质地影响分析 总被引：1，自引：0，他引：1
质构剖面分析法(TPA)是食品质构分析的重要方法。本文通过质构剖面分析法和感观评价方法对添加谷氨酰胺转胺酶(TGase)对酸奶质构的影响进行了研究。从TPA分析可以看出,添加TGase对酸奶的硬度、粘性和胶粘性影响较大,随着TGase用量增多,这些质构参数也逐渐增大。这表明TGase改变了酸奶的凝胶特性。但对内聚性没有影响。从感观评价结果看,添加TGase的发酵酸奶异物感明显,口感粗糙。尚需要进一步研究TGase如何改善酸奶的品质。 相似文献
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为了解沙棘压榨汁内漂浮物中脂溶性有色物质的成分,以黄龙沙棘鲜果为试样,用提取色素法;经溶剂提取和薄层色谱分离,得到8种有色物质,其中有一种对光比较稳定的黄色油状液体,经IR及H—NMR鉴定,谱图与有机物物理常数和光谱谱图册中油精的数据一致。又用UV测试,200～400nm无吸收峰;400～500nm有两处最大吸收峰。测定结果与相应谱图表明,经提纯的这种黄色油状液体是油精。 相似文献
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成都白鸡数量性状遗传参数的初步估测 总被引：1，自引：0，他引：1
用半同胞测定法,估测了成都白鸡主要数量性状的遗传参数。估递结果: 1.蛋重的遗传力和重复力分别0.504和0.770。 2.开产日龄月龄、300 产蛋量和500日龄产蛋量的遗传力分别为0.63,0.33和0.10。 3.300日龄产蛋量和500日龄产蛋量间的遗传相关是0.83。 4.2月龄体重和6月龄体重的遗传力,母鸡分别为0.686和0.660,公鸡分别为0.600和0.040。 5.2月龄体重和6月龄体重之间的遗传相关,公鸡和母鸡分别为0.83和0.89。根据上述结果,我们可以办出这样的结论:仔母鸡300日龄的产蛋量,可以办未来产蛋量的选择指数。2月龄体重可用办为肉类济的选择指标。 相似文献
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弱光条件下黄瓜的生长解析 总被引：23，自引：0，他引：23
郭凤鸣 《吉林农业大学学报》1990,12(1):32-35
为了阐明弱光对黄瓜生长、发育的影响,育苗期进行3周遮光处理(自然光的53％),探讨弱光对RGR、NAR等的影响,其结果:(1)弱光促使茎部伸长,地上、地下部重显著减少,但叶片数差别不大,不同黄瓜品种对弱光的反应也不同;(2)处理期间遮光区的RGR低,处理结束后,随长势的恢复而提高;(3)弱先条件下的NAR显著下降,处理结束后,遮光区与对照区的差缩小了,品种间的NRA仍有差别;(4)弱光区的LAR比对照区高,出现了弱光反应。 相似文献
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包膜控释钾肥对烤烟钾营养状况的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
以常规钾肥和不施钾作对照，研究包膜控释钾肥对烤烟钾营养状况的影响。结果表明：控释钾肥可以显著提高烟叶的含钾量，施用控释钾肥75kg K2O／hm^2，150kg K2O／hm^2，225 kg K2O／hm^2的烟叶采烤后含钾量分别为2．58％，2．96％，3．01％，均达到了优质烟的标准。控释钾肥可使成熟期烟田近根区土壤速效钾出现富集，使烟叶含钾量出现升高的趋势，是能够提高烟叶含钾量的主要原因。 相似文献
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用不同的植物生长调节剂(CA、BR、8O2)及其不同的组配方式(GA+8O2、GA+BR)处理苧麻Boehmerianivea结果表明,所用生长调节剂均能提高苧麻光合速率,有利于功能叶(14)~C同化产物向纤维中运输,调节苧麻叶片及茎杆中糖和淀粉含量,加速苧麻的纤维积累进程.GA与BR和802配合使用对纤维积累有一定的加成效应. 相似文献
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取患病典型的死猪小肠或肠系膜淋巴结．经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心而获得纯化的ＴＧＥＶ条带．通过电镜观察．病毒是圆形或椭圆形，并呈现冠状结构，经透析、浓缩和Ｆｏｌｉｎ酚试剂测定，病毒蛋白含量为２５０μｇ／ｍｌ． 相似文献