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rolB-pttGA20ox双价基因在毛白杨中的表达及转化植株的形态特征 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究对已整合外源rolB-pttGA20ox双价基因的毛白杨株系进行半定量RT-PCR检测,并对移栽后的转基因植株进行形态观测。结果表明:rolB和pttGA20ox基因的表达模式不同,rolB基因在不同器官中的表达强度为根>茎>叶,pttGA20ox基因的表达无组织特异性;rolB基因受外源生长素短时间诱导时表达丰度发生变化,pttGA20ox基因表达丰度不受外源生长素短时间诱导。对移栽温室后的转化植株的生长量分析结果表明,4个转化株系及对照的高生长增加量表现为RG-4>RG-1>RG-3>RG-2>CK。4个转化株系的株高和茎间长明显高于对照。转化株系与对照之间以及转化植株之间的形态特征出现了差异。 相似文献
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基于Cre/loxP重组系统的多基因载体构建及烟草转化研究 总被引：3，自引：1，他引：2
利用一套基于Cre/loxP重组系统的植物多基因表达载体系统将苏云杆菌毒蛋白基因(BtCryIAc)、甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、GA20氧化酶基因(pttGA20ox)和rolB基因构建于植物表达载体pYL1305上,命名为pYL1305BBGR。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,经PCR和Southern blot检测发现,多基因已成功转入烟草基因组中;经半定量RT-PCR检测证实,4个基因均能正常表达。 相似文献
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为了提高毛白杨的生根能力，把rolB基因转入毛白杨中，获得7个转化植株.在无激素培养基上，转化植株的生根率达到80%～100%，而未转化植株的生根率只有13%～20%.转化植株对生长素表现出高度的敏感性，当IBA浓度达 1.0 mg/L时，转化植株的生根受到抑制.移栽后，1个转化株系的高生长明显低于对照，2个转化株系的茎节数比对照增加，3个转化株系的节间长比对照降低，其他转化植株与对照无明显差异.硬枝扦插试验结果进一步证实了转化植株扦插生根能力显著提高，扦插生根率达到74.4%～92.3%,根的数量也明显增加. 相似文献
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Bt-BADH-GA20ox-rolB多基因在转化烟草中的表达分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为探讨Bt-BADH-GA20ox-rolB多基因转化烟草中外源基因的表达情况及对转化植株的影响,对转多基因烟草及对照植株进行了生理生化试验,包括内源激素含量测定、耐盐性试验、Bt毒蛋白测定、移栽后植株生长的观测。结果表明：转基因植株生根能力强,根、茎、叶各部位内源激素（IAA、GA3）与对照差异明显;在低浓度NaCl... 相似文献
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为探讨转rolB-pttGA20ox双价基因毛白杨生根生理变化,对转rolB-pttGA20ox双价基因毛白杨株系RG-4和对照株系PT-16组培苗生根过程中内源激素含量进行了测定分析。结果表明:RG-4株系在无激素培养基上8 d即可见根突出现,比对照提前3 d,生根率、平均根长及根数均高于对照;其内源IAA含量在不定根形成时增加,根形成后降低,且RG-4在起始和处于峰值时期的内源IAA含量显著高于对照;RG-4的GA3含量在生根前降低,生根后升高,与对照的变化趋势相反;ABA含量在生根过程中波动变化,但起始ABA含量RG-4低于PT-16;RG-4的IAA/ABA在根突形成前保持较高的水平,根突形成后降低。 相似文献
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[目的]构建双价抗虫基因表达载体并转化水稻,为选育广谱、高抗转基因抗虫水稻提供技术参考.[方法]构建半夏凝集素基因(pta)和苏云金杆芽孢菌基因(Bf)两个抗虫基因的双价表达载体pCAMBIA 1301-Bt-pta,利用大肠杆菌DH5α和根癌农杆菌LBA4404转化水稻恢复系辐恢838,同时对转化植株进行GUS染色及PCR鉴定.[结果]以构建的双价植物表达载体pCAMBIA 1301-Bt-pta为模板,PCR扩增到pta基因的部分片段,大小为807 bp,且该载体经Hind Ⅲ酶切后,能得到15854 bp的中间载体pCAMBIA 1301-Bt片段和2046 bp的pta基因片段.对转化植株进行GUS染色,得到3株转基因阳性植株,经PCR鉴定结果显示外源基因已成功导入水稻.[结论]通过构建双价抗虫基因表达载体并转化水稻,成功获得的转基因植株可用于水稻抗虫转基因恢复系及组合的研究,以提高其抗病虫害能力. 相似文献
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GA20ox1在植物的种子萌发和植株生长发育过程中起着重要的作用,而黄瓜CsGA20ox1基因在植株生长发育的作用尚不明确。本实验以黄瓜和拟南芥为材料,采用同源克隆和PCR技术分离克隆了黄瓜赤霉素20-氧化酶基因CsGA20ox1,对黄瓜CsGA20ox1基因在植株生长发育的作用进行了初步探究。系统进化树分析显示,CsGA20ox1与At GA20ox1亲缘关系最近;基因表达分析表明CsGA20ox1在黄瓜幼叶和开花当天的子房中表达量较高。亚细胞定位表明黄瓜CsGA20ox1同时在细胞核和细胞质中表达。通过农杆菌介导的遗传转化获得CsGA20ox1超量表达拟南芥转基因植株,拟南芥转基因植株的发芽速率得到显著提高,并且莲座叶面积、叶片面积和叶柄长度显著增大。DIC实验统计结果表明CsGA20ox1增大了表皮细胞面积。 相似文献
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发根农杆菌Ri质粒上T-DNA中含有的rolB基因可以通过转化侵染植株形成大量的发状根。由于通过发状根体系容易获得再生的转化植株,而且这些植株可表现出很多能稳定遗传的表型变异,因此该技术在植物科学领域中有着广阔的应用前景。对发根农杆菌的生物学特性、Ri质粒的结构和功能、rolB基因的位点与特征、发根农杆菌诱导发状根的转化机制和方法、诱导发状根发根的影响因素、发状根除菌后植株再生及鉴定等方面进行了归纳和分析,并对发根农杆菌诱导产生发状根在植物科学各领域的应用进行了简单的综述。 相似文献
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[目的]通过反义托品酮还原酶Ⅱ基因提高托品酮还原酶I（TRI）的表达水平,从而增加莨菪碱在三分三中的含量,为大规模开发生产托品烷生物碱提供理论基础。[方法]将携带反义托品酮还原酶Ⅱ基因的重组工程菌C58C1-p1304＋-antTRⅡ采用叶盘法对三分三进行遗传转化。潮霉素筛选转基因发根,PCR检测转基因发根基因组中是否同时含有rolB、rolC和Hygr抗性基因。PCR阳性转基因发根扩大培养后,提取生物碱,并采用高效液相色谱法进行生物碱含量测定。[结果]共有9个转基因发根的基因组同时检测到rolB、rolC和Hygr抗性基因,且这9个转基因发根中的莨菪碱含量较对照有不同程度的提高。[结论]反义托品酮还原酶II基因对托品烷生物碱代谢途径起到一定程度的正调控作用。 相似文献
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转rolC基因八棱海棠组培苗生物学特性的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】通过研究转rolC基因八棱海棠不同株系的转基因拷贝数，在转录水平上的表达丰度，以及转基因组培苗的生物学特性，为进一步深入阐明rolC基因在八棱海棠中的表达机制和培育优良的苹果砧木奠定理论基础。【方法】以通过gus染色和PCR检测的3个转rolC基因八棱海棠株系组培苗为试材。Southern杂交鉴定rolC基因整合拷贝数。Northern杂交鉴定rolC基因在转录水平上的表达丰度。调查转基因植株组培苗在含有不同种类和浓度的植物生长调节剂的培养基上茎段增殖、叶片再生、生根能力等生物学特性；将生根后的组培苗进行炼苗，移入温室4个月后，研究株高、节间数、节间长度、叶面积等生物学特性。【结果】Southern杂交结果表明，rolC基因分别整合进入3个八棱海棠株系基因组，其中株系20a和33a分别获得了1个rolC基因拷贝，株系20b获得了2个rolC基因拷贝。Northern杂交结果表明，3个转基因株系中的rolC基因均在转录水平上得到了表达，且该基因在单拷贝株系的表达丰度高于双拷贝株系。转基因组培苗生物学特性研究结果表明：（1）3个转rolC基因八棱海棠株系茎段增殖系数、叶片再生率、生根所需外源激素浓度均显著低于对照植株，单拷贝株系的以上指标亦显著低于双拷贝株系。（2）3个转基因八棱海棠株系组培苗平均生根数显著高于转基因株系，双拷贝株系显著低于单拷贝株系；根长情况正好相反；对照植株根粗和转基因株系根粗之间均无显著差异。（3）3个转基因八棱海棠株系的株高、节间长度、节间数、叶面积均显著小于对照植株。其中单拷贝株系显著小于双拷贝株系。【结论】rolC基因整合进入3个八棱海棠转基因株系基因组，并分别在转录水平上得到表达。外源rolC基因的表达导致转基因植株体内内源激素含量和植株形态学的改变，且rolC基因的整合拷贝数对它的表达有一定的影响。 相似文献
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The rol genes cloned from Agrobacterium rhizogenes were transferred to the cotton genome via Agrobacterium-mediated transformation. Molecular analyses and developmental identification of the putative transgenic plants were carried out by means of PCR, Southern blotting and field characterization. The results showed that the expression of rol genes greatly increased the rooting ability of the transgenic plants, and changed the plant development. Highly male-sterile plants with strong apical dominance and fertile plants with short internodes, stunted growth and improved economic characteristics were segregated from the T1 transgenic lines of wild rol B gene and the rol B gene driven by 35S promoter. The transgenic lines of rol ABC construct usually had normal boll setting and slow growth. Therefore we concluded that the rol genes, modified in suitable ways,could be used to create new cotton varieties with some highly valuable characteristics. 相似文献