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为建立一种快速、高效的诊断家畜细粒棘球蚴病方法,提取羊细粒棘球蚴包囊的新鲜囊液,盐析囊液抗原,点样于硝酸纤维膜上,以胶体金-驴抗羊IgG和胶体金-兔抗鼠IgG为检测标记物,采用垂直流渗滤装置检测羊与人工感染细粒棘球蚴小鼠的血清和全血特异性抗体.患病羊阳性血清及全血检出率在90.91% ~94.4%,细粒棘球蚴感染小鼠的血清及全血检出率均为100%;细粒棘球蚴阴性羊血清和全血假阳性率为4.00%~4.59%;与脑多头蚴病血清交叉反应率为28.57%(2/7).研究结果表明,细粒棘球蚴全血金标渗滤法可应用于羊棘球蚴病的诊断与检疫. 相似文献
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在ELISA法作用之下应用高纯度细粒棘球绦虫六钩蚴抗原、以及囊液抗原,分别针对一次感染、以及二次感染细粒棘球绦虫六钩蚴小鼠血清进行测定,用ELISA法对所测定结果详细分析。对模型小鼠原发性感染细粒棘球绦虫后,特异性抗体的变化规律展开分析与研究。 相似文献
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【目的】探讨细粒棘球蚴CE18重组蛋白作为绦虫蚴病免疫诊断抗原的应用价值,为筛选绦虫蚴病血清学诊断抗原提供依据。【方法】应用棘球蚴CE18重组抗原建立间接ELISA方法,分别对18份脑多头蚴、15份细颈囊尾蚴、19份棘球蚴感染绵羊血清及194份棘球蚴病疫区绵羊血清和13份健康羊血清进行检测,通过显著性差异分析评价CE18蛋白作为诊断抗原的意义。同时,应用生物学软件对CE18抗原蛋白同源序列进行分析,进一步从分子水平上提示CE18蛋白作为绦虫蚴病诊断抗原的依据。【结果】序列分析表明棘球蚴CE18蛋白基因为多种绦虫如泡状带绦虫、多头带绦虫、猪带绦虫等的共有序列,其蛋白质氨基酸序列相似性很高,不同种属之间高达99%,从分子水平上表明CE18蛋白为带绦虫蚴共同抗原成分之一。重组抗原CE18-ELISA方法检测绵羊血清抗体水平显示:脑多头蚴病、细颈囊尾蚴病、棘球蚴病和棘球蚴病疫区血清的阳性率分别为38.89%、73.33%、100%和76.14%,而对照组血清为阴性反应。【结论】CE18重组蛋白可作为绵羊棘球蚴病和细颈囊尾蚴病血清学诊断抗原,用于畜群活体检疫初筛试验。 相似文献
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酶联免疫诊断绵羊棘球蚴病初报徐雪平,李兴江,尹君亮(新疆农垦科学院,石河子,832000)李永祥(石河子医学院)为了提高棘球蚴病的早期诊断水平,我们对酶联免疫试验(ELISA)诊断棘球蚴病(包虫病)的方法进行了探讨,初报如下。1材料与方法1.1抗原无... 相似文献
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<正> 利用间接血凝试验诊断人畜棘球蚴病,国内外已有不少报道。新疆是棘球蚴病高发区,为达到早期诊断主动预防的目的,我们于1991年10月至1992年2月进行了本试验。 一、材料和方法 1.抗原制备 在农八师一四三团无菌抽取绵羊肝、肺棘球蚴包囊液,3000r/min离心15min,取上清,用紫外分光法测定蛋白质含量,分装,-20℃保存备用。 2.血清 阳性血清系从免疫绵羊制备,阴性对照血清采自农八师一二一团初生羔羊,被验血清采自农八师一四三团及石河子市个体户屠宰绵羊和山羊。 相似文献
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利用 SOS-PAGE 对不同源棘球蚴囊液抗原的多肽组成进行了分析,旨在为棘球蚴病免疫诊断抗原的分离纯水奠定基础,为虫种内株的鉴定提供依据.结果表明,绵羊棘球蚴囊液抗原共有多肽带9条,其中66和59kD 多肽带为主带;40kD,34.5kD,33kD,24.5kD 和14kD 多肽带次之.牛囊液抗原共有多肽带13条,66和59kD 多肽带也为主带,24.5kD 多肽带次之.而人包囊液抗原共有多肽带14条,66kD,40kD, 相似文献
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对家畜棘球蚴病进行免疫诊断试验,结果阳性绵羊检出率微量间接血凝试验为84.59%,酶联免疫试验为83.91%,对流免疫电泳试验为78.75%。 相似文献
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[目的]研制基于Eg95重组蛋白为检测抗原的羊棘球蚴(包虫)间接ELISA抗体检测试剂盒。[方法]以细粒棘球蚴Eg95重组蛋白为检测抗原,筛选间接ELISA的最佳反应条件,确定ELISA的判定标准,检测敏感性和重复性,组成、包装试剂盒并初步应用。[结果]建立的ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,检测阳性血清和阴性血清的准确率均为100%。[结论]研制的羊棘球蚴(包虫)病ELISA抗体检测试剂盒可用于细粒棘球蚴Eg95亚单位疫苗抗体水平的检测。 相似文献
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应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化 总被引:5,自引:0,他引:5
应用ELISA间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体,具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗1周后,抗体滴度开始上升,4周后达到高峰。用巴氏杆菌C48-1攻击不同抗体滴度的鸭只,抗体滴度为1:400时,保护率为90%,抗体滴度下降时,攻毒保护率也随即降低。 相似文献
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本试验通过筛选抗原性较好的多杀性巴氏杆菌,经禽胚培养增殖细菌,灭活后加入免疫增强剂左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E,制成油乳剂强经苗,试验表明,每头份含抗原量100亿,左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E合用组免疫效果最佳。注射本苗后,鸡群第4天产生免疫应答,第7天即可产生坚强的免疫力,试管凝集抗体效价达到1:86,攻毒保护率达83.3%,第14天即可达100%,免疫期6个月。免疫期内攻毒保护率为97.6%,当试 相似文献
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为了明确猪在免疫旋毛虫抗原和感染旋毛虫肌幼虫后的抗体应答反应,应用 ELISA 法,肌幼虫凝胶层析纯化抗原、新生幼虫和成虫可溶性抗原,对用肌幼虫可溶性抗原、肌幼虫 ES 抗原、成虫可溶性抗原、成虫 ES 抗原、灭活新生幼虫抗原制备的免疫原免疫后猪血清抗体以及攻击感染后的猪血清抗体进行了检测。用肌幼虫纯化抗原检测时,感染猪在感染后7d 抗体即出现变化,第14~21d 时上升较快,第28d 达最高值,抗体可持续6个月以上;各免疫组在第1次免疫后抗体滴度有不同程度升高,第2次免疫后上升较快,其中肌幼虫可溶性抗原及其 ES 抗原免疫组抗体应答较其它几种抗原免疫组强。用成虫可溶性抗原检 相似文献
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新城疫热稳定性天然弱毒株B95免疫效果的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
分别用NDV疫苗株和不同稀释度的B95G毒株,经不同免疫途径进行雏鸡的免疫,当雏鸡NDV母液抗体下降到较低水平时,B95病毒液50倍稀释组在免疫后5d即可见抗体滴度上升,到达高峰时抗体效经免疫前上升4.6个滴度,在攻毒试验中,除B9510000倍稀释组外,其余B95各组在免疫后15d、30d攻毒保护率均为5/5,即全部保护。当在雏鸡母源抗体较高时免疫,B95病毒液50倍稀释组抗体达高峰时其效价比对照组高2.5个滴度,结果表明,该组与Clone30疫苗组免疫效果相当,能使机体产生良好的免疫。 相似文献
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【目的】探索细粒棘球绦虫成虫表膜糖抗原的免疫性。【方法】细粒棘球绦虫成虫虫体冻融产物,经蛋白酶K消化,离心上清作为粗提表膜糖抗原,SDS-PAGE鉴定糖抗原成分,硫酸-蒽酮法测定多糖浓度,ELISA、Western- blot 和IFA法分别检测免疫小鼠抗血清抗体效价和特异性以及确定抗原在虫体组织中的位置。【结果】SDS-PAGE图谱显示无蛋白条带出现,表明成虫膜蛋白被蛋白酶K完全降解;制备的糖抗原浓度为2.54mg•mL-1,初步确定为糖抗原。ELISA结果显示,随着免疫次数增加,抗血清中特异性抗体(IgG 、IgM 和IgA)效价也随之升高。与阴性血清相比,IgG 、IgM 和IgA的P/N值分别为4.9、3.2和6.4。未检测到特异性IgE。Wenstern-blot检测结果显示,抗血清与原头蚴粗提虫体蛋白、细粒棘球绦虫成虫表膜蛋白、表膜糖抗原有效识别。IFA显色结果显示糖抗原在细粒棘球绦虫虫体表膜中有表达。【结论】经蛋白酶K消化后提取的细粒棘球绦虫表膜糖抗原具有良好的的免疫原性和免疫反应性,有望用于包虫病的诊断和免疫。 相似文献
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禽大肠杆菌血清型O2,O78融合双价弱毒菌株免疫原性的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
罗贤忠 《华南农业大学学报》1998,19(2):50-54
试验鸡在10d龄用禽大肠杆菌O2、O78融合双价弱毒菌苗免疫,免疫后14d对O2、O78强毒株攻击的保护率分别为73%和80%,免疫后42d的保护率分别为667%和733%,与对照组比较差异极显著(P<001).采用ELISA检测免疫鸡血清抗O2、O78的IgM、IgG、IgA等类抗体的消长情况,结果显示,血清中各类抗体的ELISA总滴度与保护效果呈正相关.其中,IgM在免疫后2周内起主要保护作用,IgG在2周后起主要保护作用,IgA在血清中出现迟缓. 相似文献
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鸽新城疫油乳剂灭活苗的研制与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
利用从当地分离的鸽新城疫病毒,研制了鸽新城疫灭活油乳剂苗。此种疫苗使用后,接种鸽无任何不良反应;免疫14d后攻毒,保护率可达100%;免疫对比试验表明,鸽新城疫油乳剂苗对鸽新城疫病毒的攻毒保护率高于鸡新城疫油乳剂苗;免疫3周后抗体水平达到高峰;疫苗接种16周后仍具有较高的抗体水平;大量的田间试用,效果理想。 相似文献
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绵羊绦虫蚴病是羊群中常见的一种高发高危害性寄生虫病,该病包括棘球蚴病、细颈囊尾蚴病、脑多头蚴病,病原体分别是带科细粒棘球绦虫、泡状带绦虫、多头绦虫的中绦期幼虫.羊感染后不易发现,一经察觉畜群几乎全部受染,导致羊只生长发育迟缓,抗病力差,生产性能下降,饲料空耗,毛肉减产,出栏率屠宰率低下,也是春季羊乏弱死亡的主要原因. 相似文献
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笔者用制备卵黄抗体的方法制备新城疫(ND)卵白抗体,与卵黄体抗体比较,HI效价高1个滴度,保护试验保护率为100%,发生ND的85640只病鸡进行治疗试验,其保护率达93.6%。 相似文献