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用组织分离法制作食用菌母种,在分离操作过程中,常因杂菌(特别是细菌)污染而导致斜面试管报废。我们作了如下两个方面的改进,可使斜面培养基的利用率和分离成功率有所提高。 相似文献
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食用菌生产母种通常都用试管作容器,它体积小易保存,管口小可防杂菌污染,重量轻方便邮寄,但每只试管斜面培养基只有5～10ml,斜面面积小,菌种量较少,只能转接原种3～5瓶,一个菌种厂需各大量的 相似文献
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为保持食用菌菌种的优良种性和防止杂菌污染,较长期保藏斜面菌种,我们试用蜡封管口法,效果良好。采用此法无需专门设备、特殊药物,材料易得,操作简便。具体做法如下: 1.培养基的制备。取大型试管(口径为20～25毫米),适当加大培养基中琼脂的比例(占3％),增加注入试管中培养基的数量(占容积的1/4),棉塞要做紧。培养基的配方应根据该菌种生长发育对营养的需求,选择最佳方案,一般多采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)。 2.接种培养。在已选定的菌株中,挑取茁壮的菌丝为接种体,接种体不要过大(3×3毫米)。在该菌生长最适的温度下进行培养,长满斜面后须继续培养2～3天。 3.剪塞浸蜡。将已培养好的斜面,齐管 相似文献
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历来试管斜面培养基都是用棉塞封口,但棉塞易吸潮,夏季气温高时培养菌种容易污染杂菌,特别是培养好的菌种放入冰箱内保藏时,时间一长,棉塞上便滋生杂菌。为此,我们试将棉塞封口改成聚丙烯塑料布包扎封口。结果,这种方法,很成功。一,塑料不吸潮;二,塑料无营养,不生杂菌;三,塑料保温性能好,培养基水分不易散失,从而提高了试管菌种生产成活率,并延长了保存时间。 相似文献
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1.细菌污染提纯法: (1)材料:含量为4万单位/1毫升的庆大霉素一支;经高压灭菌的PDA斜面培养基10支(试管规格18×180毫米);高压灭菌的1毫升注射器一支;6号针头一个。 (2)方法:在无菌箱(室)内,把4万单位/1毫升的庆大霉素液用砂轮割开,用无菌注射器分别注入10支冷却至45℃左右的斜面试管培养基中,摇动培养基使之充分混匀,立即摆成斜面。然后把被细菌污染的菌种以无菌操作移入该斜面培养基中,置25℃下培养。2次即可把细菌甩掉,效果甚佳,对食用菌菌丝无抑制作用。 2.霉菌污染提纯法: (1)试管棉塞受潮污染了霉菌,大都出现在斜面前端,可在酒精灯火焰上连同培养基一块灼 相似文献
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一般试管培养基灭菌后需要在室内取出摆成斜面,笔者认为,此法有两个缺点。一是棉塞未干,在空气中易沾上杂菌孢子而染杂;二是培养基从高压锅内取 相似文献
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木屑培养基的隐性污染 总被引：2，自引：0，他引：2
在食用菌菌种生产过程中 ,除了液体菌种和斜面培养基外 ,其他的二、三级种大部分都是用木屑、棉籽壳、稻草或小麦培养基。液体和斜面培养基一旦感染杂菌一般可用肉眼直接观察发现 ,而木屑等培养基感染木霉、毛霉、青霉、黄曲霉、链孢霉等能用肉眼发现 ,一旦感染细菌、酵母菌等则不能用肉眼直接观察发现 ,而只能通过显微镜或移接斜面培养基培养后才能检出 ,故称之为隐性污染。虽然发生此类污染比较少 ,但是由于其具有很大的隐蔽性 ,发现了也为时已晚。菌种批量生产时若不及时找出原因 ,对症下药 ,损失也是很大的。 1999年初 ,笔者曾为此事困… 相似文献
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制作斜面是制备菌种不可缺少的一步,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。我们在实践中摸索出一种简捷快速制斜面培养基的方法,现介绍如下: 1 将胶合板截成长18cm(与试管长度相等或略短),宽9cm(比排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。 2 在并排5支试管上面平置截好的胶合板,再在胶合板上面并放5支试管,然后将试管的上、下端分别用牛皮纸包好,用线扎紧,使胶合板两侧的试管保持平行,置高压锅中灭菌。 3 高压灭菌后,经自然冷却,待气压降至零时,将高压 相似文献
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试管组织分离常常由于细菌、酵母菌污染导致失败,既耽误了时间又浪费了培养基,实是遗憾。现将此法操作略作改进,可达到分离成功的目的。(一)试管组织分离培养法:子实体选取、消毒、培养基制作均同常规,只是在接种时,使试管培养基的斜面朝下,将组织块放于试管棉塞前的内壁上,塞好棉塞后竖立试管让组织块沿壁下滑达管的底部并接触培养基。注意组织块下滑时不能接触到培养基,这样即使组织块带菌也不至于污染整个培养基斜面。接种后将试管立放或斜放,斜放程度不得低于培养基在 相似文献
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食用菌斜面菌种在分离、培养过程中,有时会受到杂菌的污染。因此,要及时进行纯化培养。下面介绍几种简易的纯化方法。利用寄主组织或子实体进行组织分离,在分离培养基内加入链霉素(30单位/毫升)可抑制细菌生长;加入灰黄霉素(20单位/毫升)、制霉素(30单位/毫升)可抑制真菌生长。斜面受到细菌污染,可酌情采用下列方 相似文献
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在比较简陋的条件下制种,经常会遇到母种的管壁或培养基表面感染杂菌.笔者通过多次试验,用酒精棉球擦拭试管内壁,其接种成功率在90％以上。具体做法是:在接种针上缠一条用酒精浸过的棉花,通过酒精灯将燃烧着的棉花送入试管内自行熄灭后,反复擦拭管壁(但要注意不可接触培养基),擦遍管壁后抽出管外即可。接种按常规法进行。此法特别是在接二级种时效果更好。因为接二级苗种,种块需更大一些,这样很易使种块碰着试管壁而造成污染,采用此法后即使 相似文献
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黑木耳固体菌种的制备,特别是以塑料袋作容器,由于瓶或袋的长期封闭,加之培养料含水量较高,常常导致菌丝生长弱而缓慢,且抗病力差并易受杂菌感染等。为此,我们利用液体过氧化氢(H_2O_2)作为化学氧源进行培养基配制,经初步试验,效果很好。本文主要报道试管斜面培养基内的化学通氧的试验结果。 相似文献
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1 接种前的预处理 母种在长期保存过程中,棉塞易出现感染。试管壁上可能有大量的杂菌孢子或菌丝。处理方法:取试管时棉塞端向下轻拿轻放,以防棉塞上的杂菌孢子落到斜面菌苔上。先用酒精灯火焰烧棉塞,再把塞棉塞试管部分置 相似文献
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食(药)用真菌多采用固体培养(又称固体发酵),固体培养最大的敌人就是污染杂菌。其污染杂菌概括有两大原因:第一,消毒不彻底,培养基或棉花塞带有杂菌,这是次要的;第二,杂菌从瓶口进入,这个原因是主要的。为了便于寻找污染杂菌原因。现按菌种制作工序分述如下:(一)培养基的营养、水分和pH 不适合。培养 相似文献
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笔者保存的香菇菌株有60～70株。过去均用PDA培养基斜面试管冰箱保存,每年转管2～3次,这样做颇感费时花工。为减轻工作量,于1983年12月2日开始探索用木屑培养基试管保存。经观察初步表明,采用木屑试管种在冰箱中可保存两年。现将结果简报如下; 一、材料与方法 相似文献
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香菇菌袋污染原因剖析及预防对策 总被引：1，自引：0，他引：1
污染香菇菌袋的主要霉菌有绿霉、根霉、毛霉、青霉等种,其次是链孢霉和曲霉(包括黄曲霉和黑曲霉)。这些种类广泛分布于环境中,因而制袋期围绕杜绝和杀灭霉菌营养体、繁殖体和休眠体采取相应技术措施至关重要。1 菌袋污染原因剖析杂菌污染菌袋分为两种类型:先天性污染和后天性污染。先天性污染,即杂菌繁殖体、休眠体和营养体本身存活于培养料中而没有被杀死,萌发后造成培养基污染;后天性污染,即杂菌已在培养基中不存在,由于料袋搬运、接种、扎袋封口不严密造成杂菌乘隙而入导致的菌袋污染。11 袋头污染 为塑料袋两头扎封不牢固或是扎封过… 相似文献
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在利用 PDA培养基进行母种分离、母种扩大、活化过程中 ,杂菌的污染在所难免。对此 ,我们经多次实验 ,在 PDA培养基中加入 1.2 5 m g/ L四环素 ,起到良好的防杂效果。现将试验情况总结如下。1 培养基制作 在 PDA培养基分装前 ,把四环素磨成粉 ,每升加医用四环素 5片 ,然后搅拌均匀 ,分装试管。如常规灭菌即可。其颜色比 PDA深 ,呈黑褐色。2 母种分离结果 分离用平菇苏平一号 ,草菇 V96 6 ,茶树菇一号 (引自福建农科院 )。分别在平菇 2 0 0 0年 1月 ,9月 ,2 0 0 1年 3月进行。每种菇重复 3次 ,每重复 10支试管 ,分离后每天观察 ,凡… 相似文献