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甘蔗锌指蛋白ShSAP1可能参与了甘蔗成熟与逆境应答的过程。为了研究ShSAP1的功能,可通过亚细胞定位研究ShSAP1的定位特点。首先将ShSAP1基因的编码区序列连接到植物表达载体pCAMBIA1302中,构建ShSAP1与绿色荧光蛋白基因融合的植物表达载体pCAMBIA-ShSAP1,然后采用基因枪转化法转入洋葱表皮细胞,在荧光显微镜下观察ShSAP1与GFP融合表达产物在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位,结果表明ShSAP1-GFP融合蛋白定位在细胞膜、细胞质和细胞核中。 相似文献
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茶树荧光性绿斑病是一种茶树成叶生理性病害,病叶上的绿色病斑可见自发的黄绿色荧光。为了以黄、绿色自发荧光为探针了解病害的发生规律,同时为黄色、绿色荧光物质的分离鉴定提供光谱学依据,应用荧光显微技术、显微荧光光谱成像技术、激光扫描共聚焦显微技术、流式细胞术研究了茶树荧光性绿斑病叶中黄、绿色自发荧光的显微观察条件、发射光谱和发光部位。结果表明:在不同激发光照射下,茶树荧光性绿斑病叶能发射多种自发荧光,其中黄色、绿色荧光显微观察的最佳条件为:蓝光激发,彩色和绿色单色光模式记录图像;在绿光、黄光范围有三个荧光峰,其波长分别为515nm、535nm和585nm;最初发出绿色、黄色荧光的病变部位是维管束鞘细胞,随后出现在部分海绵细胞、栅栏细胞和表皮细胞中;黄色、绿色荧光在细胞中的发光位置定位于液泡。 相似文献
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对已获得的香蕉MuMADS2基因进行生物信息学和芯片分析表明,该基因编码的蛋白可能作为转录因子定位于细胞核中,是乙烯上游的调控因子,参与调控香蕉果实的成熟过程。为进一步研究该基因功能,构建香蕉MuMADS2基因与绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因融合的植物表达载体pCAMBIA1302-MuMADS2,再利用基因枪转化法将其转入洋葱表皮细胞进行亚细胞定位观察。结果表明:该基因表达产物定位于细胞核中,符合转录因子特性。 相似文献
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病毒蛋白的亚细胞定位可以反映病毒的某种功能，是研究病毒功能的重要依据。借助农杆菌的介导，将南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus， SRBSDV）可能编码的6种非结构蛋白分别在本氏烟细胞中表达，通过荧光共聚焦显微镜观察所表达的蛋白亚细胞定位情况。 结果表明：Pns52、Pns91定位相似，主要定位于细胞质，在细胞质中形成较大的颗粒状聚集体；Pns6、Pns71、Pns72和Pns92定位相似，分散于整个细胞，主要定位于细胞质中或膜上，均形成丝网状结构；WoLF PSORT对比分析显示它们可能都是膜内在蛋白（Integral membrane protein），此外，Pns6在细胞质中还可以形成颗粒状的聚集体。 相似文献
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水通道蛋白（aquaporin）是一类广泛存在生物体中高效转运水分子的膜内在蛋白，其在生物膜上以同源或异源四聚体的形式起作用。根据序列相似性及亚细胞定位，植物水通道蛋白可分为PIP （plasma membrane intrinsic protein）、TIP（tonoplast intrinsic protein）、NIP（NOD26-like intrinsic protein）、SIP（small basic intrinsic protein）和XIP（X intrinsic protein）等5大类，其中，PIP定位在细胞膜，是介导细胞间水分跨膜运输的主要通道。橡胶树最早起源于南美亚马逊河流域，是目前天然橡胶的主要商业来源。与其他植物相比，橡胶树除蒸腾耗水外，周期性的割胶活动也会造成水分的大量流失，因此，水分平衡对于橡胶树尤为重要。为揭示橡胶树水分平衡的分子机制，采用RT-PCR技术对1个PIP类水通道蛋白基因HbPIP1;1进行克隆，并在此基础上对其编码蛋白的亚细胞定位和多聚化特征进行分析。结果显示：该基因的编码区长864 bp，预测编码287 aa，其理论分子量为30.80 kDa、等电点8.59、不稳定系数49.27、脂肪族指数22.34、总平均疏水指数为0.639，属于不稳定的疏水型碱性蛋白；蛋白含有水通道蛋白家族特有的MIP（major intrinsic protein）结构域及6个典型的跨膜螺旋，每个螺旋的残基数介于20~23之间。研究构建了基因的亚细胞定位分析载体，并采用农杆菌介导法对烟草叶片进行了瞬时转化。荧光共聚焦显微镜观察显示，HbPIP1;1蛋白定位在细胞膜，与用生物信息学手段预测的结果一致。在烟草叶片中的双分子荧光互补实验显示，HbPIP1;1蛋白自身不能互作，这进一步得到了点对点的酵母双杂交实验的证实。以上结果表明HbPIP1;1蛋白可能通过异源互作的方式参与橡胶树水分的平衡。 相似文献
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大豆种子发育过程中差异表达蛋白的蛋白质组分析 总被引：1，自引：0，他引：1
采用蛋白质组学技术研究了大豆N2899种子发育过程中蛋白质的差异表达。运用PDQuest软件比较分析不同发育时期（15,20,30,40,50 DAF和成熟种子）大豆种子蛋白的双向电泳图谱,在考染的2-D胶上共检测到337个蛋白点。有些蛋白质在整个发育过程中都出现,而另外一些只出现在发育早期或成熟的种子中。利用基质辅助-激光解吸／电离-飞行时间-质谱（MALDI-TOF-MS）技术,分析了不同发育时期30个差异表达蛋白,并用Pro-found（http：／／www．prowl．rockefeller．edu）工具,对质谱产生的肽质量指纹（PMF）数据进行NCBInr数据库检索,结果鉴定了18个蛋白质。比较发现,这些蛋白主要参与种子的成熟（如伴豆球蛋白）、逆境胁迫反应（如抗坏血酸过氧化酶）、细胞分裂（如Skp1）和蛋白运输（如钙网蛋白）等。研究表明,种子发育过程十分复杂,所鉴定的蛋白质,可为从分子水平上研究大豆种子发育进程中蛋白的积累和调控奠定基础。 相似文献
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Cyanobacteria produce metabolites with diverse bioactivities, structures and pharmacological properties. The effects of microcystins (MCYs), a family of peptide type protein-phosphatase inhibitors and cylindrospermopsin (CYN), an alkaloid type of protein synthesis blocker will be discussed in this review. We are focusing mainly on cyanotoxin-induced changes of chromatin organization and their possible cellular mechanisms. The particularities of plant cells explain the importance of such studies. Preprophase bands (PPBs) are premitotic cytoskeletal structures important in the determination of plant cell division plane. Phragmoplasts are cytoskeletal structures involved in plant cytokinesis. Both cyanotoxins induce the formation of multipolar spindles and disrupted phragmoplasts, leading to abnormal sister chromatid segregation during mitosis. Thus, MCY and CYN are probably inducing alterations of chromosome number. MCY induces programmed cell death: chromatin condensation, nucleus fragmentation, necrosis, alterations of nuclease and protease enzyme activities and patterns. The above effects may be related to elevated reactive oxygen species (ROS) and/or disfunctioning of microtubule associated proteins. Specific effects: MCY-LR induces histone H3 hyperphosphorylation leading to incomplete chromatid segregation and the formation of micronuclei. CYN induces the formation of split or double PPB directly related to protein synthesis inhibition. Cyanotoxins are powerful tools in the study of plant cell organization. 相似文献
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野生大豆GsADF1基因的克隆与表达分析 总被引：1，自引：0，他引：1
ADF蛋白是一种在真核生物中广泛存在的低分子量的肌动蛋白结合蛋白,在细胞分裂、细胞运动、植物顶端生长如花粉管伸长,根毛的形成等重要的生命活动中发挥着重要的作用.以野生大豆(Glycine soja)的叶片cDNA为模板,通过RT-PCR方法扩增分离获得GsADF1基因.该基因全长为693 bp,包含417 bp的开放阅读框;其编码的ADF蛋白含139个氨基酸残基.运用生物信息学方法将GsADF1与其他物种ADF蛋白氨基酸序列进行多重比对并构建系统进化树,发现GsADF1与其它生物的ADF蛋白具有很高的同源性.这说明植物ADF基因高度保守.为进一步研究GsADF1在野生大豆不同组织,器官以及不同发育期大豆种子中的表达情况,对它进行了荧光定量分析(Real time RT-PCR).结果表明:GsADF1在野生材料的根、茎、叶、花和种子中都有表达,且以根和花中表达量最高.而对其在不同发育阶段的种子中的分析表明该基因在15DAF、20DAF、30DAF、40DAF和45DAF的种子中都有表达,且以15DAF表达量最低,随后呈上升趋势.其表达量的变化表明GsADFI通过调节肌动蛋白可能参与了种子从胚胎发生到贮藏物质积累的转变. 相似文献
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Wheat kernel development can be divided into three phases i.e. cell division, cell enlargement and dehydration. Accumulation of gluten proteins continues till the end of the cell enlargement phase. During the dehydration phase, post-translational polymerization of the glutenin subunits occurs to form very large glutenin polymers. Assembly of the glutenin polymers has been monitored by increase in the unextractable polymeric protein. Lines possessing HMW-GS related to dough strength (e.g. 5 + 10) started accumulating large polymers several days earlier than lines with HMW-GS related to dough weakness (e.g. 2 + 12) and maintained their higher amounts till maturity. This may be explained by faster polymerization resulting from a higher concentration of cysteine residues in the x-type HMW-GS. 相似文献
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玉米受精及子粒发育早期是决定穗粒数及粒重的重要时期,也是对环境变化相对较敏感的阶段。受精极核需要经历游离核、细胞化和细胞分化3个阶段形成胚乳,受精卵同样需要一系列的分裂分化形成最终的胚。玉米受精前极易遭受不良环境的影响,导致性器官发育不正常,影响花粉或花丝活力间接影响玉米受精过程。受精过程中的环境胁迫会通过阻碍花粉与花丝的识别、减缓花粉管在花丝中的延伸速率影响受精过程。子粒发育早期主要是受精极核分裂分化形成胚乳、受精卵分裂分化形成胚的过程,该阶段遭受环境胁迫下,胚乳细胞分裂受阻影响子粒库容。研究表明,逆境胁迫条件下,玉米的受精及子粒早期发育过程与碳水化合物的代谢以及激素的合成密切相关。 相似文献
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Bin Guo Wei He Daochang Wu Delu Che Penghui Fan Lingling Xu Yahui Wei 《Plant foods for human nutrition (Dordrecht, Netherlands)》2013,68(4):424-429
In a previous study, an HBsAg gene-bearing transgenic tomato line was made available and it exhibited notable physiological alterations compared with the non-transgenic tomato (control). In particular, leaves of the transgenic plants were fleshy and dark. We hypothesized that a change in leaf proteins of the transgenic plants account for the observed phenotypes. In this study, total protein content in leaves of the transgenic plants was analyzed by 2-dimensional difference gel electrophoresis. A total number of 700 protein spots were detected on silver-stained gels, of which 368 protein spots were matched between the control and sample gels. Among these matched proteins, the expression levels of 122 proteins in the transgenic plants were upregulated while those of the rest were downregulated. In addition, 25 abundant proteins (value ratio?>?2.0) on silver-stained gels were analyzed by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry. Sixteen differentially expressed proteins were identified, of which 13 were predicted to be involved in cell division, energy metabolism, protein synthesis and processing. The possible roles of these proteins in the transgenic tomato strain have been discussed. Taken together, our data indicate that significant alterations in protein expression occur in transgenic tomatoes bearing the HBsAg gene. Our findings will help broaden our knowledge of the mechanism by which exogenously expressed genes lead to phenotypic alterations in transgenic plants. 相似文献
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孕穗期水稻不同功能叶的发育蛋白质组学分析 总被引：3，自引：0，他引：3
从蛋白质组学角度对杂交水稻汕优63孕穗期4个叶位功能叶片蛋白质组变化进行了研究,以揭示水稻孕穗期叶片蛋白质组的表达差异。4个不同时期功能叶片蛋白质经双向电泳得到分离,应用Imagemaster 2D Elite 5.0软件对所得到的双向电泳图谱进行分析比较,共得到差异表达蛋白质点23个,差异表达蛋白质点经质谱分析,有14个得到鉴定。对鉴定出的蛋白功能进行研究,结果表明:差异表达的蛋白质大部分(9个)为参与光合作用和呼吸作用的蛋白质;其次为与蛋白结构及功能调控相关的蛋白质(3个),表达量表现为随叶位上升而上调;其余为参与氨基酸代谢的蛋白质(2个),表达量在较低叶位叶片中无显著规律,在剑叶中的表达量显著上调。蛋白质是细胞功能执行者,受细胞功能或细胞环境变化的影响,因此,上述蛋白质发生变化的原因应与水稻不同叶位叶片生长发育特性有关。 相似文献
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The starchy endosperm of the mature wheat grain comprises three major cell types, namely sub-aleurone cells, prismatic cells and central cells, which differ in their contents of functional components: gluten proteins, starch, cell wall polysaccharides (dietary fibre) and lipids. Gradients are established during grain development but may be modified during grain maturation and are affected by plant nutrition, particularly nitrogen application, and environmental factors. Although the molecular controls of their formation are unknown, the high content of protein and low content of starch of sub-aleurone cells, compared to the other starchy endosperm cells types, may result from differences in developmental programming related to the cells having a separate origin (from anticlinal division of the aleurone cells). The gradients within the grain may be reflected in differences in the compositions of mill streams, particularly those streams enriched in the central and outer cells of the starchy endosperm, respectively, allowing the production of specialist flours for specific end uses. 相似文献