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烟草黑胫病菌分子检测 总被引：9，自引：0，他引：9
随着聚合酶链式反应 (ＰＣＲ)技术的发展 ,用特异引物进行真菌种间核糖体ＤＮＡ片段进行ＰＣＲ扩增以达到鉴定生物种的目的已成为一种简便、快捷的技术和方法。本试验根据从ＧｅｎｅＢａｎｋｄａｔａｂａｓｅ获得的疫霉属真菌 (Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｓｐｐ .)ｒＤＮＡＩＴＳ区段序列 ,合成了 1对 1 7ｂｐ特异寡聚核苷酸引物进行了不同病原菌、病组织及土壤中寄生疫霉菌 (Ｐａｒａｓｉｔｉｃａｖａｒ.ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ)的特异扩增试验 ,提供并完善了一套快速检测该菌的技术和方法。1 材料与方法1 1 供试菌株 烟草疫霉菌菌株 ,交… 相似文献
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绿针假单胞菌PL9菌株对烟草疫霉的拮抗作用研究 总被引：15，自引：0，他引：15
利用离体拮抗试验和烟草幼苗生物测定法研究了棉花根圈细菌绿针假单胞菌（Pseudomonas choloraphis)PL9菌株对烟草黑胫病原菌烟草疫霉（Phytophthora parasitica var.nicotianae)的拮抗作用，该菌株对烟草疫霉菌丝体有很强的抑制作用，并且可以完全抑制烟草疫霉游动孢子对烟草幼苗的侵染，其液体培养物浓缩过滤液也有相同的报制作用，拮抗作用机理研究结果表明，其拮抗作用可能与PL9菌株分泌的抗生素类物质有关。为了解PL9菌株在烟草根圈的定殖情况，采用全套发光酶基因（luxCDABE)标记的菌株PL9L进行跟 踪，结果表明该菌株可以在烟草根圈成功定殖。 相似文献
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来自中国云南、辽宁、山东3省的烟草寄生疫霉（Phytophthora parasitica var.nicotianae)菌株的致病性已被划分为3种致病类型组，即强致病性组、中致病性组和弱致性组。上述省是中国的烟草主产区，选自云南省的15个烟草寄生疫霉菌株、山东省的13个烟草寄生霉菌株和辽宁省的20个烟草寄生疫霉菌株，选择3个烟草栽培品种在温室内进行接种试验测定不同菌株的致病性分化。提取受试菌株的DNA，利用PCR技术对受试苗菌株的模板DNA进行随机多态性扩增分析，对扩增DNA片段谱带借助于UPGMA分析法构建遗传树，结果表明，受试菌株被划分为4个遗传聚类组，每个遗传聚类组内包括不同的烟草寄生疫霉致病性菌株，而且来自于不同烟区相同的致病性菌株和每种致病性的不同菌株皆不属于同一个遗传聚类组内。结果表明RAPD－PCR的遗传标记分析结果与不同致病性组的划分未有明显的区别。因此，随机多态性DNA图谱的相同与不同不能当作区分来自不同烟区的烟草寄生疫霉的致病性分化的分子检测的工具。 相似文献
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云南省烟草黑胫病菌致病力分化的研究 总被引：12，自引：0，他引：12
将分离自云南省不同地区的２１株黑胫病菌（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｎｉｃｏｔｉａｎａｅＢｒｅｄａｄｅＨａａｎ）接种烟草品种Ｋ３２６、Ｇ２８和红大，测定其对不同烟草品种的致病力。经统计分析，发现其对烟草的致病力有差异。采用菌丝块创伤和不创伤两种接种方法测定致病力的结果不同。对不同地区的黑胫病菌间的致病力以及由烟草和非烟草寄主上获得的烟草疫霉菌株的致病力进行了比较，结果表明，云南省黑胫病菌的致病力较强，由烟草上获得的烟草疫霉菌株对烟草的致病力强于非烟草菌株。实验结果还发现，供试的３个烟草品种，以Ｋ３２６对云南省烟草黑胫病菌的抗病性最强，红大品种较感病。 相似文献
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对33科41属45种园林植物活体或离体组织采用菌丝块创伤和不创伤人工接种,研究了寄生疫霉烟草变种(Phytophthora parasitica var.nicotianae)对园林木本和草本植物的侵染性.结果发现,寄生疫霉烟草变种在创伤条件下可侵染28科34属36种园林植物,提示这些园林植物在适宜生态条件下受到人工、机械或昆虫创伤时,寄生疫霉烟草变种就可能对其造成侵染危害;在不创伤条件下可侵染11科12属12种园林植物,提示这些园林植物在生态条件适宜的情况下可能会受到其侵染危害. 相似文献
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木霉菌对烟草疫霉的拮抗作用 总被引：3，自引：0，他引：3
通过对峙培养试验测定木霉菌(Trichodermaspp.)对烟草疫霉菌(Phytophthora parasiticavar.nicotianae)的抑制作用,筛选出对烟草疫霉菌具有拮抗作用的绿色木霉(T.viride)菌株TG050609.平板对峙培养试验结果表明:该木霉菌对烟草疫霉菌菌落生长的抑制率为29.12%,且能寄生于烟草疫霉;其挥发性次生代谢产物和发酵滤液对烟草疫霉也有明显的抑制作用.盆栽防治试验结果表明,该木霉菌对烟草黑胫病的防治效果达到56.53%,优于58%甲霜灵锰锌WP. 相似文献
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为明确烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)等主要土传病原真菌与哈茨木霉(Trichoderma harzianum)等供试生防菌株对烯酰吗啉的敏感性,采用菌丝生长速率法测定了烯酰吗啉对烟草疫霉、瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、茄病镰刀菌(Fusarium solani)、哈茨木霉菌丝生长的抑制作用,采用孢子抑制法测定了烯酰吗啉对烟草疫霉孢子囊形成、哈茨木霉分生孢子分化的抑制作用,采用稀释涂布平板法分别测定了烯酰吗啉对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄垂直链霉菌(Streptomyces aureoverticillatus)的抑制作用。结果表明,烯酰吗啉对烟草疫霉菌丝生长及孢子囊形成有显著抑制作用,对烟草疫霉菌丝生长的EC_(50)为0.467 6μg/mL;对哈茨木霉菌丝生长及分生孢子分化抑制作用较低;对瓜果腐霉、立枯丝核菌、茄病镰刀菌和枯草芽孢杆菌、金黄垂直链霉菌无明显抑制作用。因此,烯酰吗啉可以与供试生防菌株混合施用防治烟草黑胫病。 相似文献
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湖南烟草青枯病菌生理小种测定 总被引：2，自引：1，他引：1
对来自湖南各烟区烟草青枯病43个分离菌株选择了10个致病性强的病株,接种到烟草青枯病菌生理小种鉴别寄主上,都能侵染烟草、番茄、茄子、马铃薯、花生,表明所测菌株属于1号生理小种,其中致病力强的菌株为Ps714,Ps711,Ps707．Ps729,Ps735．分别分布在桂阳、蓝山、宁远、桑植、芷江等地． 相似文献
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根据烟草疫霉与其他疫霉菌ITS序列的差异设计了1对寡聚核苷酸引物,用于烟草疫霉的PCR检测。结果表明,在优化的反应体系与扩增条件下,该对引物表现出强特异性,只在烟草疫霉为模板的扩增体系中具有1条660bp的条带。利用此特异性引物可稳定地从含有烟草疫霉的土壤及其发病组织中检测出病原菌。本实验提供并完善了一套快速检测烟草疫霉的方法和技术,特别对土传病害的准确诊断与快速检测在实践和理论上具有重要意义。 相似文献
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采用单孢菌落直接配对法对来自安徽合肥、淮南、和县、潜山、岳西等县市的发病辣椒上分离鉴定获得22个辣椒疫霉菌株进行交配型测定,并采用离体叶片接种法测定了辣椒疫霉不同菌株的致病力。结果表明,安徽省辣椒疫霉菌存在A1和A2两种交配型,以A2占优势,均有分布,发生频率达81.8%。不同来源菌株对2个辣椒品种的致病力存在显著差异,各菌株对艳阳离体叶的平均病级范围为1.0～4.8,对合丰天瑞离体叶的平均病级范围为1.5～4.5。不同地区的菌株致病力有强弱之分,同一地区中不同菌株的致病力也存在一定的差异性。辣椒疫霉菌的致病力与品种之间存在互作关系,菌株的交配型与致病力无明显的相关性。 相似文献
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烟草黑胫病菌的寄主范围 总被引：2，自引：0，他引：2
【目的】探究烟草黑胫病菌（Phytophthora parasitica var. nicotianae）的寄主范围,为烟草黑胫病菌的相关研究提供理论依据,为烟草黑胫病菌所致病害的综合防治提供决策依据。【方法】人工模拟烟草黑胫病菌在田间的侵染途径,采用菌丝块创伤和不创伤接种61种农作物及杂草的活体或离体组织,结合柯赫氏法则鉴定,对烟草黑胫病菌的寄主范围进行较为系统的大样本研究。【结果】烟草黑胫病菌在人工创伤条件下可侵染21科41属51种植物,在不创伤条件下可侵染10科15属16种植物,首次发现烟草黑胫病菌在人工创伤接种条件下可以侵染21科40属47种植物,在人工不创伤接种条件下可以侵染10科12属12种植物。【结论】烟草黑胫病菌在人工模拟条件下的寄主范围较为广泛,其中包括一些常见农作物和烟田常见杂草,当这些植物在有利于病害发生的高温阴雨潮湿气候条件下,在田间农事活动中受到机械创伤或遭受虫伤甚至没有损伤时,烟草黑胫病菌可能会对这些植物造成侵染,生产中应注意避免烟草同潜在寄主作物间作或连作。及时防除烟田杂草对烟草黑胫病菌所致病害的有效治理具有积极意义。 相似文献
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采用离体叶片法测定了分离自湖南主产烟区的6个烟草黑胫病菌菌株的致病性,结果表明不同菌株间致病性存在明显差异,病情指数在6.6~89.0之间,其中以phy3菌株致病性最强。以phy3为接种菌株,在病圃进行3种接种方法筛选,结果以菌丝块创伤茎基部接种法发病率最高。综合以上试验结果,采用phy3为接种菌株,以菌丝块创伤茎基部方法接种,在病圃测定了52个烤烟品种资源对黑胫病的抗病性,结果表明不同烤烟品种资源抗性差异明显。其中,高抗品种资源占15.39%,中抗品种资源占15.39%,中感品种资源占30.77%,感病品种资源占38.46%,尤其以 PVH01抗性最强。 相似文献
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为研究哈茨木霉菌对NC89接种烟草疫霉菌前后抗病相关代谢途径的影响,以烟草品种NC89为试验材料,设置四个处理：接种清水（NC89CK）、接种烟草疫霉菌谷（NC89_P）、接种哈茨木霉菌（NC89_T）、接种哈茨木霉菌后接种烟草疫霉菌谷（NC89_T_P）,利用超高效液相色谱与质谱联用技术（liquid chromatography-mass spectrometer,LC/MS）比较各处理抗病相关代谢通路的变化差异。结果表明,哈茨木霉菌对烟草疫霉菌有着较好的生防作用。代谢组学分析表明,筛选到893个差异代谢产物及其富集的代谢通路,涉及抗病相关的代谢途径20条;各处理间脂肪酸及其衍生物、黄酮和类黄酮、萜类、苯丙氨酸及其次生代谢物和泛酸等物质的含量存在显著差异,为进一步探究哈茨木霉菌对烟草疫霉菌的抑制机理奠定了基础。 相似文献
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观察和测定了大豆疫霉(Phytophthora sojae)慢生长菌株HN-1及其单游动孢子后代的培养性状及致病力,并将其与正常生长的其他3个菌株进行对峙培养,研究其慢生长特性传染规律,测定受感染菌株的培养特性及致病力.结果表明,大豆疫霉慢生长菌株HN-1的培养特性与正常菌株相比生长显著缓慢,菌落形态有明显差异,卵孢子产生量低,对大豆幼苗的致病力显著较弱;该菌的慢生长特性可通过无性繁殖传递至子代,并可通过对峙培养传染至其他正常生长菌株,传染后产生的受染菌株表现慢生长特性且致病力减弱. 相似文献
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大豆疫霉在江苏省适生性的初步研究 总被引：8，自引：0，他引：8
通过对苗期大豆下胚轴创伤接种，测定了大豆疫霉菌株S317（分离自中国东北）和Pmg-1,Pmg-2,Pmg-3（分离自进口美国2号大豆携带的土壤）对江苏省30个大豆品种的致病性。结果显示：30个大豆品种对菌株S317高度感病；27个大豆品种对菌株Pmg-1,Pmg-2，Pmg-3高度感病，另有3个品种表现为抗病。同时，测定了供试菌株的卵孢子在南京土壤中的存活能力。结果供试菌株的卵孢子在土壤中埋存9个月，仍有6．6％－13．3％具有萌发能力。上述结果表明，大豆疫霉在江苏省具有较强的适生性，一旦传入可能对江苏大豆生产构成威胁。 相似文献
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烟草黑胫病菌培养性状的研究 总被引：5，自引：2，他引：5
【目的】对烟草黑胫病菌的若干培养性状进行研究，进一步了解烟草黑胫病菌的培养特性的稳定性，为烟草黑胫病的相关研究和综合治理提供试验依据。【方法】从安徽10个主要生产烟草的市（县）多点采集发生烟草黑胫病的烟株，采用组织分离法进行病原菌分离，经纯化后获得69个烟草黑胫病菌（Phytophthora nicotianae Breda de Haan var. nicotianae Waterh.）菌株，对其进行游动孢子囊的诱导、配对培养、生长特性测定等进行研究。【结果】烟草黑胫病菌的主要培养性状为：异宗配合，与标准相对交配型菌株配对培养可以产生有性器官；卵孢子球形，满器或不满器，雄器围生，藏卵器小；孢子囊多近球形，乳突明显，有双乳突现象，孢子囊具脱落性，且孢子囊柄短，不对称孢子囊较常见，孢子囊外着生有长短不一的附属丝；菌丝最适生长温度为20～30℃，最高生长温度大于35℃，小于40℃，最低生长温度大于8℃，小于10℃。【结论】供试烟草黑胫病菌的培养性状与前人的研究结论基本一致，初步认为10多年来生态环境和农业措施的变化没有导致烟草黑胫病菌的生长性状发生较大的改变，表明烟草黑胫病菌的培养性状是较为稳定的。 相似文献
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烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)生理小种鉴定技术研究 总被引：1，自引：0，他引：1
在1980-1986年,对烟草黑胫病菌生理小种鉴定技术和方法进行了研究和探讨。结果表明,Nicotiana ncsophil(?),Burley21;Burley37;N.stocktonii是理想的鉴别寄主:整株接种方法优于其他的接种方法;接种物浓度以控制在相同的水平(10~3 ml)为宜。为减小生物测定的差异,所有菌系应一次完成测定。 相似文献
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烟草疫霉两个变种的划分及疫霉属几个生物学性状的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
本文基于对福建、浙江、江苏、上海等地9个种、51个疫霉菌株的分类研究结果,着重探讨疲霉属中烟草疫霉(phytophthora nicotianae)种内两个变种的划分,温度反应、脱落孢子囊孢囊柄长度等性状在种的鉴定中的作用,以及配对试验中交配菌株种的配对组合与藏卵器大小的关系。指出:单纯根据形态特征无法区分烟草疫霉的两个变种,因而不宜再使用P.nicotianae var.nicotianae和P.nicotianae var.parasitica这二个变种的名称;温度反应是一个不稳定性状,在种的鉴定中只能作为参考依据,菌丝最适、最低生长温度对种的鉴定作用不大;孢囊柄长度性状是稳定的,在种的鉴定中应受到重视。 相似文献