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<正>近日,国家知识产权局公开一件由山东农业大学和山东烟草研究院有限公司共同申请的发明专利:芜菁花叶病毒的逆转录环介导等温扩增快速检测方法。该发明根据芜菁花叶病毒核酸序列,设计了一套特异引物(F3、B3、FIP、BIP,如SEQIDNO.1~4所示)样品提取总RNA后,进行LAMP反应,反应产物经电泳或者荧光染料的方法实现芜菁花叶病毒的检测。据称,该发明的方法,对 相似文献
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病毒病是造成甜瓜(Cucumis milo L.)严重产量损失的主要病害。侵害南瓜作物的病毒有50多种，其中黄瓜花叶病毒(CMV)、两瓜花叶病毒(WMV)、小西葫芦黄色花叶病毒(ZYMV)和番木瓜环斑病毒-W(PRSV—W)是甜瓜作物中最流行的病毒。培育抗性品种是防治病毒的最佳方法。1998年Lecoq等人 相似文献
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水貂绿脓杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立 总被引：1，自引：1，他引：0
为了利用环介导等温扩增(LAMP)技术建立水貂绿脓杆菌核酸快速检测方法。根据绿脓杆菌外毒素A基因240 bp片段保守序列设计一套LAMP特异性引物,对水貂绿脓杆菌基因组DNA进行LAMP扩增,通过浑浊度、SYBR Green荧光染料显色及电泳观察结果,并进行特异性和敏感性检验。结果表明：完成反应仅需要60 min(65℃),特异性强,最低检测限为1 ng/μL。该方法简单快捷、特异性强、灵敏度高,适合于基层使用,具有广泛的临床应用前景。 相似文献
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LAMP检测无乳链球菌方法的建立及应用 总被引：4，自引：1，他引：3
以无乳链球菌纤连蛋白fbs基因为主要研究对象,采取环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对fbs基因的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在63℃保温1 h,通过荧光显色即可完成对无乳链球菌的检测工作.结果显示,LAMP方法能够特异性检测fbs基因,其检测灵敏度是常规PCR方法的100倍,并与实时荧光定量PCR方法相当.所建立的针对无乳链球菌fbs基因的LAMP检测方法具有高度的特异性及稳定性,结果可靠,非常适合无乳链球菌的快速检测. 相似文献
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山东葫芦科蔬菜上病毒病种类检测及黄瓜花叶病毒分离物的亚组鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
为了检测和鉴定山东地区葫芦科蔬菜上病毒病种类,从山东诸地11个蔬菜种植区采集了867个葫芦科蔬菜疑似感病样品。利用黄瓜花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、西瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、小西葫芦黄花叶病毒、南瓜花叶病毒、甜瓜黄斑病毒、瓜类褪绿黄化病毒、李属坏死环斑病毒及甜瓜坏死斑点病毒等特异性引物对疑似感病样品分别进行RT-PCR检测,各病毒检出率分别为34.8%,10.4%,20.0%,41.7%,27.0%,7.8%,2.6%,1.7%,0,0.9%。表明除PNRSV外,其他9种病毒在山东各地均有发生,且CMV和TMV发病率较高,2种或2种以上病毒复合侵染也很普遍。同时为明确山东地区CMV分离物的株系分化状况,选取11个地区有代表性的CMV阳性样品,测定其外壳蛋白(Coat protein,CP)和RNA3核苷酸序列并进行序列比对和进化分析,结果显示侵染山东地区葫芦科蔬菜的CMV分离物均属于IB亚组,与韩国分离物As(AF013291)相似性最高,未发现其他株系。 相似文献
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为建立一种能快速检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的方法,根据GenBank中IBV的基因保守序列,设计一套环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,建立了IBV RT-LAMP可视化检测方法;该法对IBV RNA最小检测限为10 fg,而常规RT-PCR为1 pg,灵敏度高于常规PCR法100倍;对其他常见鸡病原体检测结果均为阴性;可通过肉眼观察颜色直接判定结果;本研究建立的IBV RT-LAMP方法简便、快捷、特异、灵敏,且只需1个可控温的水浴锅在1 h内即可完成全部反应,更适合基层业务部门及养殖场的检测,为IBV感染的快速检测提供新方法。 相似文献
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温度及烟草CMV病株对烟蚜生长发育的影响 总被引：1，自引：1，他引：1
研究了19℃、22℃、25℃、28℃和31℃恒温条件下，CMV烟草病株和健康烟草与烟蚜Myzus persicae (Sulzer)生长发育和繁殖的关系。研究表明，随着温度的升高，在健康烟株（对照）和病株（处理）叶碟饲养条件下，烟蚜的成虫寿命和世代历期都显著缩短，繁殖力减弱。19℃时烟蚜的成虫寿命和世代历期最长，31℃时烟蚜最短。CMV烟草病株对烟蚜存活率和繁殖力有显著影响，与对照相比，烟草病株造成烟蚜成活率降低。烟蚜取食CMV烟草病株时，19℃烟蚜的繁殖力最强为36.9头，31℃最弱为2.17头。净增殖率R0在22℃时最大，在31℃时最小。周限增长率λ和内禀增长率rm在28℃和31℃时最大，在22℃时最小。世代平均周期T和种群加倍时间t在22℃时最大，在31℃时最小。研究结果说明，烟蚜的生长发育和繁殖与温度和感染CMV的烟草有关。 相似文献
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A melon (Cucumis melo L.) breeding line derived from PI 414723 is resistant to three potyviruses,watermelon mosaic virus (WMV), zucchini yellow
mosaic virus (ZYMV), papaya ringspot virus (PRSV), and to powdery mildew (PM). The inheritance and linkage relationships of
these four resistances were studied in a segregating F2 population and derived F3 families from a cross between cultivar Top
Mark and the resistant breeding line. Dominant monogenic inheritance of all four resistances was observed. We report that
line 414723-4S3, which was initially selected as a source of ZYMV and WMV resistance, is also a source of dominant monogenic
resistances to PRSV and PM race 1. We also report on genetic linkage (significant departure from independent segregation,
χ2 = 58.1, p≪ 0.0001) between resistance to WMV and ZYMV. The map distance between these loci was estimated to be 7.5 cm. The genes for
resistance to PM and PRSV segregated independently from each other, and from ZYMV and WMV resistance.
This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date. 相似文献
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马铃薯A病毒(potatovirusA,PVA)是一种侵染马铃薯的病毒,严重影响马铃薯的经济价值和产量,为有效防止该有害生物的传入和扩散,建立马铃薯A病毒RT-LAMP检测方法,根据PVA的外壳蛋白基因序列设计RT-LAMP反应的特异引物,通过实验成功建立了PVA的RT-LAMP特异性检测方法。该方法检测快速,36min即可检测到扩增曲线;特异性强,可有效区分同样侵染马铃薯的马铃薯A病毒(PVA)、马铃薯V病毒(PVV)、马铃薯Y病毒(PVY)以及同属的百合斑驳病毒(LMoV);灵敏度高,比普通RT-PCR灵敏度高10倍;并可通过肉眼观察浊度或颜色反应直接进行结果判断。该方法适用于现场PVA的快速检测。 相似文献
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棚栽嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒病发病动态及其田间扩展研究初报 总被引：1，自引：1，他引：0
为明确棚栽嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒病发生规律,对该病害的发病、蔓延和影响因素进行研究。毛竹搭建塑料大棚,无毒土壤上常规或低密度移栽健康嫁接西瓜苗,移栽后6、30天剪除部分瓜苗顶叶或倒2叶约半片后,将伤口浸渍在毒源中进行接种诱发,常规密度移栽苗自然生长,低密度移栽苗经整枝始终保持单株独立;健康植株用毒源污染剪刀、手指后整枝或毒源与健康藤蔓摩擦诱发。调查病田病株自然扩展以及拔除清除病健株后直播种子和套种瓜苗的控病效果。目测法定期调查显症病株,酶联免疫双抗体夹心检测法确定病株。接种后植株染病率高。低密度移栽苗：移栽后6天接种的瓜苗24天显症、34天突增、85天高峰,分别比移栽后30天接种的植株长4、4和30天;未接种的也在移栽后70天显症、95天高峰。常规密度移栽苗接种株也有类似趋势。显症病株率和带毒株率与日平均温度关系密切。病株中不同藤蔓上的叶片和相同藤蔓内的叶片既表现显症,也有隐症,甚至终生带毒隐症。病健藤蔓摩擦病株率100.0%,而染毒手指、剪刀整枝病株率则为91.7%和83.3%。病田内病情自然扩展先相邻连续,后点片;病地拔除清除病健株后,直播瓜苗和套种嫁接苗带毒株率分别为82.4%和77.0%,控病效果17.6%和23.0%。棚栽嫁接西瓜苗（植株）从感染黄瓜绿斑驳花叶病毒病到表现症状需要20天左右的潜伏期,继之产生显症病株突增和高峰,温度高,潜伏期短、进入突增和高峰快;隐症病株表现在株间、不同分枝藤蔓叶片间和相同藤蔓不同叶片间;移栽密度对发病无明显影响。田间扩展再侵染先相邻后点片,除了其他途径外,病健藤蔓接触摩擦传病作用大;病地当年连作重发的机率高。 相似文献
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应用纳米磁珠荧光PCR检测棉花曲叶病毒 总被引：1，自引：1，他引：0
为了提供快速灵敏检测棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl virus, CLCuV)的技术以防止其传播扩散,本研究根据CLCuV外壳蛋白基因（Coat protein, CP）保守序列设计了引物和TaqMan探针,并结合纳米磁珠(Magnetic nanoparticles, MNPs)建立了该病毒的MNP实时荧光PCR (Real-time PCR)检测方法。该方法检测阈值约为525 fg·μL-1 DNA。通过对CLCuV、非洲木薯花叶病毒、烟草线条病毒、黄瓜花叶病毒及番茄斑萎病毒的检测表明,该方法具有良好的特异性;同时该方法无需任何PCR后处理,交叉污染风险小。本方法可用于CLCuV的快速检测。 相似文献