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山羊精液冷冻过程中影响因素分析 总被引：4，自引：0，他引：4
本试验采用三种稀释液配方，三种甘油浓度、三种卵黄浓度及三种始冻温度，按既定的程序对山羊精液进行冷冻解冻，逐步检查精液的活力和活精子百分率（简称活率）。并在采精之后，冷冻前、解冻后对精子进行电镜扫描超激结构观察，所有数据进行单因子差异显著性分析得出：三种稀释液中，Ｃ液最差，Ａ、Ｂ液差异显著（Ｐ＜０．０５），Ａ较好。三种甘油浓度冻精活率差异显著（Ｐ＜０．０５），６％最好。精子顶体损伤率随甘油浓度增加而增加。不同的卵黄浓度和始冻温度差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。用含甘油６％的冻精对两只超排母羊输精，发情后第八天冲卵镜检，受精率达９７．０％，胚胎发育率达８７．３％。 相似文献
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-80℃超低温冰箱冷冻保存猪精液的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验从细管规格、基础稀释液成分(柠檬酸和甘氨酸)、甘油浓度和解冻方法对猪精液在-80℃超低温冰箱中冷冻保存冻后精子存活率的影响进行了研究。结果表明:(1)0.25 m L和0.5 m L细管之间没有明显差异(P0.05),其冻后存活率均达到0.57左右。(2)冷冻液中甘油浓度为3%时,冻后猪精子存活率最高,达0.50±0.035;基础液中柠檬酸的含量为1.3%时,精子的冻后存活率极显著高于1.7%时(P0.01);基础液中甘氨酸的含量为7.5 mg/m L时,则不能影响精子的冻后存活率(P0.05)。(3)解冻方法为61℃5 s时,精子冻后存活率最高,达0.61±0.055。 相似文献
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去甲肾上腺素和睾酮对低温保存犬精子的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验就去甲肾上腺素和睾酮对低温保存犬精子的影响液进行了研究。试验结果表明：①稀释液—Tris-葡萄糖稀释液（Tris3．04％,柠檬酸1．7％,葡萄糖1．25％,卵黄20％）中加入去甲肾上腺素后,犬精液低温保存的效果显著优于对照稀释液和加入睾酮的稀释液,在4℃保存4d后,加入去甲肾上腺素的稀释液中的精子活率高达0．6500-0．01378,精子活率〉0-3的存活时间达8．3333±2．5819d,而对照稀释液和加入睾酮的稀释液中的精子活率分别只有0．45±0．16和0．36±0．11,精子活率〉0．3的存活时间分别为5．67±1．75和4．67±1．03。②对去甲肾上腺素的不同的4种添加剂量研究后发现,100μL稀释液中加入15μL去甲肾上腺素时犬精子低温保存的效果最好。 相似文献
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不同冷保保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析 总被引：1，自引：0，他引：1
本实验采用一定浓度的甘油，乙二醇，二甲基亚砜（ＤＭＳＯ），二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的称释法液精稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小，以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ 相似文献
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试验比较了在冷冻稀释液中添加不同浓度海藻糖(0.025,0.05,0.1 mol/L)以及添加10 mg/L维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响.结果:(1)添加0.025 mol/L海藻糖组的精子冻后活率与复苏率分别跟对照组相比无显著差异(P>0.05),但添加浓度为0.05,0.1 mol/L的海藻糖组的精子活率和复苏率显著低于对照组(P<0.05).(2)在猪精液冷冻保存稀释液中,添加维生素C组的精子冻后活率和复苏率极显著高于对照组(P<0.01).表明在猪精液冷冻液中,添加0.025,0.05,0.1 mol/L 3种不同浓度的海藻糖对猪精液没有起到保护作用,其中后两者对之有降低的作用;而添加10 mg/L维生素C可取得较好的冷冻保存效果. 相似文献
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为了提高猪精液冷冻保存效果．试验采用在传统的ZO稀释液基础上分别添加1％、2％、4％、8％的水苏糖的方法．研究不同浓度水苏糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明,水苏糖相对于ZO稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果,其最佳添加浓度为4％,冷冻一解冻后猪精子活力、活率、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高,水苏糖可以明显抑制精子获能,获能处理前精子获能率仅为32．4％,而获能处理后降为28．6％。有利于抑制精子获能,精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为3％,说明水苏糖与甘油共同作用能在冷冻一解冻过程更加有效地保护精子。 相似文献
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在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳. 相似文献
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家畜精液的冷冻保存，是人工授精的一项重大改革，在精液冷冻技术发展过程中，由于稀释液中加入甘油作为保护剂，而使精液保存技术取得重大突破，但不同畜种的精子对甘油的反应不同。牛冷冻精液稀释液中甘油浓度或高或低对精子活率及受胎率关系不大，对猪和羊来说，甘油浓度增加时，冷冻精液的精子活率虽高，但受胎率极不理想。现将采用最新研制的无甘油糖类保护剂， 相似文献
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本试验用5%二甲基甲酰胺(DMF)替代甘油作为冷冻保护剂,研究不同浓度(0、0.02、0.04、0.06、0.08 mg/mL)L-肉碱对猪精液冻后常规指标(精子活率、线粒体活性、顶体完整性、质膜完整性)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化酶(T-AOC)活性以及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:添加0.04和0.06 mg/mL的L-肉碱可有效改善猪精液冷冻后效果。0.04 mg/mL组可显著提高精子冻后活率和线粒体活性(P<0.05);0.06 mg/mL组可显著提高顶体完整性和质膜完整性(P<0.05)。添加0.06 mg/mL L-肉碱可显著提高冷冻后精子内T-AOC酶活性并且抑制MDA的产生(P<0.05),但CAT活性与0.04 mg/mL组差异不显著。在冷冻稀释液中添加0.06 mg/mL L-肉碱可以提高猪精液冷冻保存效果。 相似文献
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《畜牧与兽医》2021,(9)
为探究枸杞多糖(LBP)对猪精子获能过程中抗氧化功能的影响,用不同浓度LBP(2、4、8和16 mg/mL)处理获能过程中的猪精子,测定精子活率、线粒体活性、顶体完整率和质膜完整性,筛选出最适LBP浓度,进一步测定最适浓度下的抗氧化指标。另外,以氧化激动剂氯化镉孵育猪精子后,用RT-qPCR方法分析SOD-1和Caspase-8处理前后的相对表达量。结果表明:LBP浓度分别为2 mg/mL和8 mg/mL时,鲜精和冻精质量较空白组显著提高(P0.05)。鲜精和冻精获能试验组总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性较获能空白组显著增加(P0.05),丙二醛含量差异不显著(P0.05)。加氯化镉诱导氧化应激后,新鲜精子和冻后精子获能试验组较获能空白组SOD-1 mRNA表达量均显著上调(P0.05),Caspase-8 mRNA表达量显著下调(P0.05)。结论:添加LBP能够在一定程度上提高获能新鲜和冻后猪精子抗氧化能力。 相似文献
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海藻糖对猪精液冷冻保存效果的影响 总被引：8，自引：0，他引：8
在传统的Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液基础上，分别添加25％、50％、75％、100％的海藻糖，研究不同浓度海藻糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明，海藻糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果，其最佳添加浓度为25％，冷冻-解冻后猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高（P〈0．05），分别达到41．38％、46．34％、44．56％、43．51％和64．09％。海藻糖可以明显抑制精子获能，获能处理前精子获能率仅为3．68％，而获能处理后达到41．82％，有利于促进精子获能。精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为2％，海藻糖只有与甘油共同作用，才能在冷冻-解冻过程更加有效地保护精子。猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整率、顶体完整率等之间存在极显著的正相关关系（P〈0．01），而与获能处理前精子的获能率存在显著的负相关关系（P〈0．05）。 相似文献
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二甲基甲酰胺对猪精液冷冻保存效果的影响 总被引：3，自引：2，他引：1
用二甲基甲酰胺(DMF)完全替代甘油,比较不同平衡时间和不同DMF添加量对猪精液冷冻保护效果的影响。结果表明,DMF能完全替代甘油,获得较好的冷冻保护效果。最佳平衡时间为90 min,解冻后精子活力为(44.57±0.72)%,显著高于对照组和其他组(P0.05)。当DMF添加量为5%时,冻后精子活力、活率、线粒体活性、顶体完整率和质膜完整率分别为(49.91±0.39)%(、46.51±0.26)%、(47.51±0.52)%(、49.84±0.56)%、(46.30±1.61)%,均显著高于2%、3%、6%DMF添加组(P0.05),但与4%DMF添加组相比,冻后精子活力、活率和质膜完整率差异不显著(P0.05)。本试验结果表明,DMF最适添加量为5%。 相似文献
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试验用含不同浓度(0、0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.10%、0.12%)水蛭素的稀释液稀释美系公猪精液,并以0.25mL细管分装冷冻。结果显示:(1)水蛭素浓度为0、0.02%时在冻后精子畸形率或水蛭素浓度为0、0.12%时冻后精子顶体完整率上存在明显的品种效应(P0.05);(2)3种公猪各浓度组(除大约克和杜洛克公猪0.02%浓度组外)冻后精子活力均显著高于对照组(P0.05),且均在浓度为0.08%时最高;除了长白公猪0.02%浓度组冻后精子畸形率显著低于对照组(P0.05)外,3种公猪各浓度组与对照组差异均不显著(P0.05);大约克公猪各试验组、杜洛克公猪0.08%浓度组及长白公猪0.02%、0.06%及0.08%浓度组冻后精子顶体完整率显著高于对照组(P0.05),且均在浓度为0.08%时最高,长白及杜洛克公猪其他试验组与对照组差异均不显著(P0.05)。结果表明,适宜浓度的水蛭素可以显著提高猪精液冻后质量,效果最好的浓度为0.08%。 相似文献
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德国牧羊犬精液冷冻保存研究 总被引：6，自引：0，他引：6
用手握法采９条德国纯种牧羊犬（２～８岁）精液,在卵黄Ｔｒｉｓ和卵黄－葡萄糖稀释液中添加保护剂甘油和ＤＭＳＯ,液氮熏蒸制作颗粒冻精。结果表明,卵黄－Ｔｒｉｓ稀释液优于卵黄－葡萄糖稀释液。ＤＭＳＯ单独加和与甘油混合加均不利于解冻后精子活率,最佳甘油浓度为４％～６％,始冻温度－１５０℃热平衡温度－１０５℃,入氮温度－１１８℃,保持了正常的冷冻温度曲线,干解冻法解冻后活率高于湿解法（Ｐ〈０．０５）。在最优 相似文献
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本试验以Tris－葡萄糖稀释液为基础稀释液，就冷冻起始温度和解冻温度对犬精子冻后活率的影响进行了研究。试验结果表明：始冻温度为－70℃时冻后精子活率最高，达0．6284±0．0408，明显优于始冻温度为－65℃和－75℃时的冻后精子活率（P〈0．05）；解冻温度为70℃时冻后精子活率最好，达0．6810±0．0324，明显优于60℃和65℃时的冻后精子活率（P〈0．05）。 相似文献
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利用甘油和二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂,以精子存活率为评价指标,研究了冷冻保护剂对香猪精液冷冻保存效果的影响。试验分工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个试验组和1个对照组。以解冻后的精子活力、活率为判断标准,比较了4种冷冻保护液对香猪精液冷冻保存的影响。结果表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组精子活率显著高于Ⅲ组（含5％甘油）（P〈0．05）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间差异不显著（P〉0．05）;Ⅰ组精子活率最高,达到53．10％。 相似文献
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试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精（IVF）试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔（MPTP）活性、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧（ROS）以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低（P<0.05）,冻精的顶体完整率也明显下降（P<0.05）;冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值（RFU）、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度（OD）值均显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精（P<0.05）;精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精（P<0.05）;而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著（P>0.05）。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。 相似文献