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鸭病毒性肝炎的研究：弱毒在雏鸭和成年鸭体内分布和排泄 总被引：1，自引：0，他引：1
本文首次报道了将鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）弱毒株接种鸭（成年鸭和雏鸭）后，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测不同时间病毒在鸭体各组织器官的分布和由粪便排出的情况，以及同群饲养但不接种ＤＨＶ的雏鸭和成年鸭感染ＤＨＶ弱毒后在体内分布及排泄情况，结果表明ＤＨＶ弱毒接种１日龄争论鸭后２０小时，接各成年鸭后４８小时即可在直肠中检出ＤＨＶ；雏鸭接种弱毒后年鸭后４８小时即可在直肠中检出ＤＨＶ；雏鸭接种弱毒后用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 相似文献
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不同毒力鸭肝炎病毒对雏鸭肝脏抗氧化功能的影响 总被引：10，自引：1，他引：9
用不同毒力株鸭肝炎病毒感染雏鸭复制病理模型 ,研究雏鸭感染病毒性肝炎后肝脏抗氧化功能的变化。将 16 0只刚出壳的北京鸭 ,经 1周适应性饲养后 ,随机均分为对照组、弱毒株组、中毒株组和强毒株组。在攻毒组的每只雏鸭背部分别肌肉注射 0 .3m L弱毒株、中毒株和强毒株的稀释液。攻毒后 1、3、5、7d剖杀雏鸭 ,采集其肝组织 ,测定鸭肝组织中过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)及超氧化物歧化酶 (SOD)的含量。结果表明 ,中毒组和强毒组的 CAT含量在攻毒后 1d便显著或极显著低于对照组 ,但弱毒株组在攻毒后的 5 d才显著低于对照组。攻毒后1d,雏鸭肝组织中 SOD含量开始下降 ,3d后显著或极显著低于对照组。攻毒后 5 d,各攻毒组雏鸭肝组织中的 GSH-Px的含量亦显著降低。这些抗氧化酶含量的降低 ,说明感染鸭肝炎病毒后雏鸭清除自由基的能力下降 ,自由基参与了鸭病毒性肝炎的发病过程。 相似文献
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PCR检测鸭瘟病毒的研究 总被引：10，自引：0，他引：10
根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因序列，设计、合成了1对引物，以1株鸭瘟病毒疫苗株DNA为模板，进行：PCR扩增，扩增出预期563bp的目的DNA片段。将扩增出的DNA片段克隆到pMDl8—T载体，经Amp／IPTG／X-gal平板筛选，HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定，获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定，与参考序列比较，二者同源性为99．3％。小鹩瘟病毒、鸭肝炎病毒、鹅副黏病毒：PCR扩增均为阴性。用此方法检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织(脑、肝、脾)，均能检测到鸭瘟病毒DNA。PCR检测鸭瘟病毒具有高度的特异性、敏感性，能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。 相似文献
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为研究鸭坦布苏病毒对雏鸭的致病性,对1周龄樱桃谷雏鸭肌肉接种坦布苏病毒FX 2010株,建立雏鸭感染模型,动态观察感染雏鸭的临床表现、病理变化、组织病毒含量及免疫反应。结果显示,雏鸭攻毒后第3天食欲下降,排黄白色稀粪,第5天时出现神经症状,部分雏鸭急性死亡,死亡率高达22.5%(9/40)。剖检病、死鸭可见心内膜出血,脾肿胀、坏死,肝、肾变性肿胀,脑膜充血。感染雏鸭的组织病理学变化主要表现心、肝、肾实质细胞变性、坏死,间质炎性细胞浸润或见出血;脾淋巴细胞局灶性坏死并伴有大量异嗜性粒细胞浸润;大脑呈典型的病毒性脑炎变化。雏鸭感染后第1天各器官就能检测到坦布苏病毒,第3天器官病毒含量除脾外均达峰值,后逐渐下降。雏鸭攻毒后第5天血清中出现微弱的中和抗体,以后逐渐升高,第17天时达峰值。以上结果表明,鸭坦布苏病毒感染雏鸭后能迅速入侵机体各组织器官并大量复制,呈组织泛嗜性特征,造成全身广泛性组织损伤,重症雏鸭死于急性败血症病变。雏鸭接种病毒后能快速产生中和抗体以抵抗感染并迅速清除病毒。 相似文献
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斑点酶联免疫吸附试验检测小鹅瘟病毒的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
应用斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）能检出少至４．８８３ｎｇ／ｍｌ的小鹅瘟抗原。与鸭瘟病毒（ＤＰＶ）、雏鸭病毒性肝炎病毒（ＤＶＨＶ）、猪细小病毒（ＰＰＶ）等对照，病毒不发生交叉反应。能从人工感染１２小时后的雏鹅组织中检出小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）。对１８只人工感染死的雏鹅的检同率为１００％，其中对不同组织的阳性检出率为：肝脏、肾脏、空肠为１００％，心脏、脾脏、十二指肠为９４．４％，回肠８８．９ 相似文献
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雏鸭胰脏组织损伤在新型鸭肝炎病毒感染过程中的变化特点 总被引：1，自引：0，他引：1
对新型鸭肝炎病毒人工感染9日龄樱桃谷雏鸭的胰脏损伤特点进行了研究。对感染雏鸭在接毒后12、24、48、72、96、168h以及14d时胰脏病理组织学变化的观察结果表明：感染雏鸭的胰脏组织在接毒后24h出现胰腺细胞的局灶性坏死及嗜酸性小体，且在接毒后48h分布广泛而严重；接毒后72～168h期间，胰脏组织中出现炎性细胞浸润并且逐渐增多，而胰腺的局灶性坏死及嗜酸性小体逐渐减少；接毒后14d，仅见到组织炎性细胞的浸润。应用透射电镜对接毒后48h胰脏的超微结构观察结果显示，胰腺细胞发生坏死．同时出现凋亡细胞的形态特征。本试验结果表明，在新型鸭肝炎病毒感染雏鸭时，胰脏的局灶性坏死是典型病理变化之一，胰腺细胞在发生坏死的同时，可能也发生凋亡，二者同时出现在同一胰脏组织内。 相似文献
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以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV—Ⅰ）免疫兔制备兔抗DHV—Ⅰ抗体，建立了检测石蜡组织切片中DHV—Ⅰ抗原的间接免疫酶染色（indirect immunoperoxidase staining，ⅡS）方法，并对DHV—Ⅰ强毒人工感染死亡或濒死雏鸭的各个组织器官进行了检测。结果表明，ⅡS与DHV—Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝等呈现阳性反应，与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝以及健康雏鸭的肝呈现阴性反应。感染DHV—Ⅰ死亡或濒死雏鸭的肝、脾、肾、心、胸腺、腔上囊、胰腺、十二指肠、盲肠、空肠、回肠、直肠的免疫组织化学检测呈阳性或强阳性，DHV—Ⅰ抗原主要分布于感染细胞的细胞质。该ⅡS法具有良好的特异性，可用于DHV—Ⅰ在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位、DHV—Ⅰ感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断。 相似文献
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通过鸭胚接种,从山东和安徽两地疑似鸭瘟临床病例中分离鸭瘟病毒,分别命名为SD株和AH株。根据鸭瘟病毒疫苗株UL26-UL30的基因序列,设计引物,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增UL27(gB)的全基因,并对扩增的片段进行测序。结果表明,扩增片段包括完整的gB基因,长度均为3 003 bp,2株鸭瘟病毒分离株与鸭瘟病毒疫苗株的gB基因同源性均为99.8%,并且分别发生4个和2个氨基酸的变异。2分离株无血凝特性,鸭胚半数致死量DELD50分别为10-4.5/0.2 mL和10-4.35/0.2 mL,动物回归试验可致15日龄雏鸭死亡,鉴定为鸭瘟病毒强毒株。 相似文献
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新型鸭肝炎病毒的分离及初步鉴定 总被引：24，自引：0，他引：24
从北京和广西发病鸭群中分离到2株病毒，分别编号为B株和G株，病毒大小约40nm，无囊膜。血清中和试验表明，2株病毒为同一血清型，与1、3型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒无血清学相关性。人工感染试验表明，G株对雏鸭具有很强的致病性，可引起典型的鸭肝炎病变，但死亡率随雏鸭日龄的增长而明显下降；B株病毒不能致死正常雏鸭，但雏鸭经过环磷酰胺处理后，感染B株病毒可引起雏鸭死亡，死亡鸭肝肿胀、出血。 相似文献
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鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus, DEV),又称为鸭瘟病毒,是一种只感染雁形目禽类的疱疹病毒。DEV具有基因组大、非必需基因多、能插入外源基因的容量大、遗传稳定等优点,其庞大而复杂的基因组为外源基因提供了诸多可插入位点,以DEV为载体,成功表达了禽流感病毒HA蛋白[1]、鸭病毒性肝炎病毒VP0蛋白[2]、鸭坦布苏病毒E基因[3]以及鹅细小病毒VP2蛋白[4]。构建重组DEV的重要一步是将报告基因插入到基因组中,目前常用的报告基因有绿色荧光蛋白(GFP)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、红色荧光蛋白(RFP)以及LacZ报告基团。本研究用RFP报告基团插入DEV UL2基因中,获得表达红色荧光的重组病毒,一步生长曲线表明,RFP对DEV的生长无影响;连续传代12代,RFP能够稳定表达,为DEV载体研究奠定基础。 相似文献
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Xuefeng Qi Xiaoyan Yang Anchun Cheng Mingshu Wang Dekang Zhu Renyong Jia Qihui Luo Xiaoyue Chen 《Research in veterinary science》2009,87(2):218-225
Duck virus enteritis (DVE) is an acute and contagious herpes virus infection of duck, geese and swans with high morbidity and mortality. The development of specific mucosal immune system against duck enteritis virus (DEV) infection for ducks has been hindered by a lack of knowledge concerning the purification of immunoglobulin A (IgA) of duck. In the present work, the method for purification of duck immunoglobulin A was developed, and the induction of intestinal mucosal immune responses against DEV was studied by orally infected ducklings with virulent DEV. The results showed that a continuous increased DEV DNA levels were observed in blood and various organs examined of orally infected ducklings throughout the infection, which was accompanied by the development of infection in ducklings from mild progressed to severe pathological lesions. Furthermore, a marked increased level of DEV-specific IgA and IgG antibodies in bile, serum and the intestinal tract, as well as the density of IgA+ cells in intestine were detected between 1 and 12 days p.i., followed by a drastic reduction of the antibody levels and the density of IgA+ cells at 15 days p.i. The results indicate that the DVE infection can stimulate both IgA-dominated antibody immune responses in the intestinal tract, and IgG-dominated antibody systemic immunity in the serum of ducklings orally inoculated with virulent DEV. The severe lesions of the villus epithelial cells and the lymphoid organs can suppress the intestinal mucosal immune responses. 相似文献
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Quantitative analysis of virulent duck enteritis virus loads in experimentally infected ducklings 总被引：7，自引：0，他引：7
To better understand the pathogenesis of duck virus enteritis (DVE), the levels of viral DNA in various tissues of ducklings during acute stage of virulent duck enteritis virus (DEV) infection were investigated by using quantitative real-time polymerase chain reaction. The results show that the viral levels of DEV in systemic organs have a close correlation with the progression of disease. The rapid dissemination and active replication of virulent DEV in multiple systemic organs at the early phase of acute infection accelerate the progression of disease. The levels of viral DNA increase sharply soon after developed clinical signs of disease, and the extent of increase and the magnitude of DEV DNA load in various tissues of ducklings after the exhibition of clinical signs may be a critical determinant of the outcome of DEV infection. The relatively high levels of DEV in bursa and small intestine tissues of dead ducklings most likely reflect the abundance of target epithelial and lymphoid cells in these tissues, which therefore play a key role in the pathogenesis of acute DVE and manifest as severe tissue lesions on the bursa and small intestine. 相似文献
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A chicken embryo-adapted duck enteritis virus (DEV) strain is the most widely used vaccine against duck virus enteritis (DVE) infection. The kinetics of attenuated DEV vaccine was examined in tissues of ducklings vaccinated by the mucosal or systemic route at 20 days of age and sampled regularly up to 60 days post-vaccination (p.v.). Significant numbers of virus genomes in the lymphoid and other parenchymatous organs were first detected at 60 min p.v., and subsequently rose to peak levels during 90 min to 1 day p.v. independent of the route of vaccine administration. The peak level of vaccine virus in the individual parenchymatous organs of subcutaneously immunized ducklings was significantly higher than that of orally or nasally immunized ducklings. The route of vaccine administration had significant effect on the initial tissue distribution of vaccine virus in respiratory and digestive tracts. Vaccine viruses spread to digestive tract and trachea tissues by mucosal route, i.e. oral and nasal administration, early than that by subcutaneous route. The rapid early increase of vaccine virus levels in all samples examined followed by a steady decline from 90 min to 6 days p.v. The real-time PCR analysis of a variety of tissues is significant for further investigation of the mechanism of vaccinal protection, and the optimization of vaccination regimes. 相似文献
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商品肉鸭鸭瘟病毒的分离与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒（DEV），分别命名为SD和BJ。以单抗介导的间接免疫荧光（IFA）检测方法，对两个分离株感染细胞滴片进行间接IFA检测，可见感染细胞内有明显的蓝绿色荧光。试验感染7日龄北京鸭可引起鸭瘟的典型临床症状．死亡率为100％（3／3），取试验感染死亡鸭肝脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片，利用单抗进行免疫组化检验，除脑组织外均检测到病毒抗原。根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物，采用聚合酶链式反应（PCR）对野毒sD株人工感染鸭肝脏和BJ珠自然发病鸭肝脏病科提取核酸为模板进行扩增，得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段，对长片段进行测序，与发表序列进行比较，毒株间的碱基序列同源性达到99．73％。 相似文献
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为构建含有Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒3D基因的重组鸭瘟病毒,本研究将已建立的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体(pBlueSK-TK-EGFP)进行改造,在其荧光表达盒内插入Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒3D基因,将重组后的转移载体(pBlueSK-TK-EGFP-30)转染已感染鸭瘟病毒的鸭胚成纤维细胞,转染细胞盲传2代后仍能观察到绿色荧... 相似文献
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为了建立重组鸭瘟病毒技术,构建了鸭瘟病毒转移质粒。在对鸭瘟强毒和弱毒株TK基因进行测序分析后,将鸭瘟病毒TK-UL24DNA片段克隆于pUC18载体中,构建了质粒pTK;将PCR扩增的GFP真核表达盒插入pTK质粒的TK基因内部,获得转移载体质粒pTK-GFP。鸭瘟病毒TK-UL24测序分析表明鸭瘟强、弱毒株TK基因序列完全相同;转移载体携带Pcmv-GFP-SV40pA表达盒,测序验证其序列与源序列一致。pTK-GFP在脂质体介导下,转染鸭胚成纤维细胞和鸭肾细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况。质粒转染细胞后,绿色荧光蛋白得到了有效的表达,为进一步开展重组鸭瘟病毒的研究和构建具有遗传标记的鸭瘟疫苗奠定了基础。 相似文献
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为研究鸭病毒性肠炎病毒(DEV)基因组异构体的存在形式,本研究在已建立的以pCC1FOS为载体的DEV疫苗株基因文库基础上对DEV全序列进行了测定,并进一步对DEV基因组的异构体进行了研究。对261个重组fosmid中的DEV基因组片段的末端序列进行测序及序列分析,初步证明了DEV基因组有3种异构体,即P型、IS型和ILS型,未发现IL型的存在。并且,以上3种异构体在基因组中所占比例分别为77.1%、8.6%和14.3%。通过对11个重组fosmid的全序列测定,进一步确认了以上3种异构体的存在。该结果为DEV的分类提供了重要实验依据。 相似文献
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We studied apoptosis induced by duck enteritis virus (DEV) in vivo, focusing on the lymphoid organs that constitute the main targets for infection: thymus, bursa of Fabricius (BF), and spleen. Fifty Pekin ducks were inoculated subcutaneously with a virulent strain of DEV. The morphology of lymphoid organs of these infected ducks was observed by light microscopy and transmission electron microscopy. Cell death by classical necrosis was observed in lymphocytes of the DEV-infected thymus, BF, and spleen. Lymphocyte apoptosis also was observed at the same time, and it was further confirmed by in situ terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end labeling and agarose gel electrophoresis. We conclude that apoptosis and necrosis of lymphocytes induced by DEV infection resulted in the depletion of lymphocytes and that apoptosis of lymphocytes may play an important role in the pathogenesis of duck viral enteritis. 相似文献