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单抗介导的斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用群特异性的单克隆抗体作第一抗体,用酶标兔抗体ＩＢＶＩｇＧ作第二抗体,建立夹心法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测鸡传染性支气管炎病毒抗原。试验表明,本程序检测ＩＢＶ抗原高度敏感性和特异性。最低抗原检出量为０．５μｇ,约１００个气管环半数感染量（１００ＴＯＣＩＤ５０）,阳性检出率为９６％。 相似文献
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利用ＩＢＤＶ高免血清ＩｇＧ作为包被抗体，成功地建立了双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ，对人工感染雏鸡免疫器官抗原动态分布进行了检测。结果表明，不同毒株感染雏鸡免疫器官病毒抗原含量不一致，持续时间也有差异。采用本方法共检测ＩＢＤ阳性样品２７５份，检出率为１００％，检测对照阴性样品２５份，结果均为阴性，比ＡＧＰ法检出率高４０％左右，灵敏度高１００～２００倍。试验证明双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ可用于组织抗原分布的检测，并且该方法具有特异性、高度敏感性，稳定性、快速性等优点，是一种实用的组织病毒检测方法。 相似文献
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应用双抗体夹心法ELISA检测IBDV的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从抗ＩＢＤＶ高免蛋黄液中提取ＩｇＧ，用作包被抗体和酶标记，建立了检测ＩＢＤＶ的双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ。经抗原阻断，无关病毒对照、取代、验证等项试验，并与常规ＡＧＰ法比较，对来源不同的１００多个样品进行检测，结果表明：该法对患鸡腔上囊、脾脏的检出率均为１００％，比ＡＧＰ法敏感１００倍以上，用肉眼观察阳性与阴性之间颜色差异显著，不存在非特异性反应。试验证明该法具有满意的待异性、敏感性、快速性和稳定性，是ＩＢＤ早期病原学诊断和流行病学调查的有效手段。 相似文献
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胶乳凝集试验在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用 总被引：2，自引：0，他引：2
应用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体致敏的聚苯乙稀胶乳，建立了检测ＩＢＤＶ抗原和抗体的胶乳凝集和胶乳凝集抑制试验。ＬＰＡ可检测出６ｍｇ／Ｌ的ＩＢＤＶ蛋白。比较了ＬＰＡ，直接萤光抗体试验和琼脂扩散沉淀试验三种方法检测ＩＢＤＶ抗原的特异性，敏感性和相关性，明确了ＬＰＡ和ＤＦＡ的检出率高于ＡＧＰ，ＬＰＡ和ＤＦＡ检测结果的符合率为８６％。 相似文献
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本文应用间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ进行鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗原的检测，其最低检出量为０．４３μｇ／ｍｌ。对人工感染／自然病例的各组织脏器进行检测，结果法氏囊的ＩＢＤＶ检出率为１００％，脾脏的检出率为８０％／８４．９％，其它器官组织如肾、胸腺、心、肝、肺、盲肠扁桃体、胸肌等均含有一定量的病毒（１１～６０％）。经统计学分析，法氏囊与脾脏的病毒检出率之间具有显著性差异（人工感染差异极显著Ｐ＜０．０１，自然病例差异显著Ｐ＜０．０５），进一步证实法氏囊是ＩＢＤＶ最主要的靶器官。试验结果表明，该法检测ＩＢＤＶ抗原，敏感性高、特异性强、重复性好，并且经济、方便、快速，适于大批量样品检测，可作为一种诊断ＩＢＤ的比较理想的方法。 相似文献
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兔源抗IBDV独特型抗体疫苗的制备 总被引：3，自引：0，他引：3
用纯化的抗鸡传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体免疫家兔，将所获效从较高（１：１６）的兔源抗ＩＢＤＶ独特型抗体分别与福氏完全和福氏不完全佐剂按１：１比例乳化制备成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗，用该疫轩免疫迪卡公雏鸡和ＳＰＦ组鸡，经用ＩＢＤＶ强毒株以点眼和滴鼻方式攻击，试验组的保护率分别为９８／９８，１００／１００，４９／４９，大群免疫接种的应答率为１００％。 相似文献
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应用ELISA双抗体夹心法检测传染性法氏囊病免疫器官病毒抗原… 总被引：2，自引：0，他引：2
利用ＩＢＤＶ高免血清ＩｇＧ作为包被抗体，成功地建立了双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ，对人工感染雏鸡免疫器官抗原动态分布进行了检测。结果表明，不同毒株感染雏鸡免疫器官病毒抗原含量不一致，持续时间也有差异。采用本方法共检测ＩＢＤ阳性样品２７５份，检出率为１００％，检测对照阴性样品２５份，结果均为阴性，比ＡＧＰ法检测率高４０％左右，灵敏度高１００￣２００倍。试验证明双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ可用于组织抗原分布的检测 相似文献
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麻雀自然感染鸡传染性法氏病病毒的调查 总被引：2，自引：0，他引：2
从鸡传染性法氏囊病流行的鸡场捕杀麻雀５４只，用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ检测抗体，阳性检出率为７．４％；以逆转录－聚合酶链反应检测病毒核酸，阳性检出率为１１．１％；ＲＴ－ＰＣＲ阳性样本病毒分离亦为阳性。结果表明；ＩＢＤ流行的鸡场里的麻雀能够发生ＩＢＤＶ自然感染，麻雀可能是ＩＢＤＶ的贮存宿主或二次传染源之一。 相似文献
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用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ试验对采自三种不同鸭群的３８０份血清进行ＩＢＤＶ抗体检测，抗体阳性率分别为，农村散养鸭１００％，农场圈养鸭２９．９％，市场贩运鸭９５．４％，总阳性率为９５．５％，抗体效价为１２～１０４。这一结果不仅表明在我国ＩＢＤＶ传染已到了非常高的程度，而且揭示了鸭在ＩＢＤ病原生态和传播中可能起重要作用。 相似文献
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用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ试验对采处三种不同鸭群的３８０份血清进行了ＩＢＤＶ抗体检测，抗体阳性率分别为：农村散鸭１００％，农场圈养鸭２９．９％，市场贩运鸭９５．４％，总阳性率为９５．５％，抗体效价为１＾２～１０＾４，这一结果不仅表明在我国ＩＢＤＶ传染已到了非常高的程度，而且揭示了鸭在ＩＢＤ病原生态和传播中可能起重要作用。 相似文献
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将ＩＢＤ病鸡粪便及饲料经ＰＥＧ浓缩处理后用ＲＴＰＣＲ与单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ进行ＩＢＤＶ检测。在ＲＴＰＣＲ试验中，粪便和饲料的阳性检出率均为１００％（８／８）；在夹心ＥＬＩＳＡ试验中，粪便的阳性检出率为１００％（８／８），而在饲料中末检出ＩＢＤＶ（８／８％。试验结果证明，ＲＴＰＣＲ是ＩＢＤＶ流行病学特别是传播途径研究的首选方法。 相似文献
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Dot—ELISA间接法检测鸡新城疫病毒（NDV）的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
常规方法分离纯化鸡ＩｇＧ,免疫羊制备羊抗鸡ＩｇＧ二抗,以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记制备酶标记物的工作浓度为１：１０００;选用硝酸纤维素（ＮＣ）膜作固相载体,建立检测ＮＤＶ抗原的斑点间接酶联免疫吸附试验诊断方法。检测ＮＤＶ鸡胚毒４０份,阳性检出率１００％;人工感染非免疫鸡的气管组织、肺组织各４７份,检出率为９３．６％;人工感染ＳＰＦ鸡气管组织、肺组织各４０份,检出率１００％。与传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）无交叉反应。试验显示该方法简便、特异、快速、结果直观,便于生产应用 相似文献
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本试验在产卵前最佳免疫日期内胸肌接种中等毒力ＮＤＩ系苗，皮下接种ＩＢＤ灭活油乳剂疫苗，收集免疫后２．５－５个月卵，低温环境冻结，卵黄液中ＮＤＨＩ综合滴度平均值接近１０ｇ６４，ＩＢＤＡＧＰ综合滴度平均值接近１０ｇ３２卵为双联高滴度抗体卵。拌料喂服该卵黄液的ＮＤ，ＩＢＤ非免疫试验组，攻击ＮＤ，ＩＢＤ强毒株，保护率１００％。对照组致死率１００％。中间试验用该卵液治疗ＮＤ和ＩＢＤ阳性的ＡＡ商品代仔鸡１６３ 相似文献
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应用Dot—ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
用差速离心结合琼脂糖凝胶层析纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）制备抗原免疫兔,获得高效价的多克隆免疫血清,提纯ＩｇＧ后用辣根过氧化物酶标记,建立了检测ＩＢＶ的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）方法。对影响本方法因素的研究表明,当酶标抗体作１：１００稀释、工作时间为３７℃、６０ｍｉｎ时结果最理想;对待检组织用氯仿处理、对硝酸纤维素膜用０．３％Ｈ２Ｏ２处理３０ｍｉｎ可有效地消除组织内过氧化物酶的影响。该方法具有较强的特异性和敏感性,对病毒的最低检出量为０．０１２４ｍｇ／ｍＬ。本法不仅可检测到纯化ＩＢＶ,而且可直接用于检测鸡胚尿囊液或病变组织（如气管、肾）中的病毒;对临床上疑似ＩＢＶ感染的病鸡的阳性检出率达７８．６％,而病毒分离率仅达６０％,两者符合率为９０％。试验结果表明,Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ可作为ＩＢＶ早期诊断的方法,具有简单、快速、样品用量少等优点。 相似文献
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１９９５年１０月至１９９６年５月，我站对各市送来的３５个种禽场，６２６７份禽血清运行ＮＤ，ＩＢＤ，ＭＧ，ＳＰ四种疫病抗体检测，结果：ＮＤＨＩ－Ｔ检测５９９８份血清，阳性率为９０．１６％，合格率为７５．８９％，幅度为０～１００％，说明种鸡场ＮＤ免疫水平比较高，但悬殊甚大。ＩＢＤＡＧＤ检测６２６７份血清，阳性率为８７．９４％，证明我省种鸡场生产的鸡苗ＩＢＤ的母源抗体是相当高的，大多数小鸡可以避免ＩＢＤ 相似文献
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应用间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）、免疫过氧化物酶（ＩＰ）、病毒分离（ＶＩ）、组织病理学、聚合酶联反应（ＰＣＲ）和ＤＮＡ杂交技术等诊断方法检测实验感染鸡 管中的传染性喉气管炎病毒，并进行了比较。用ＶＩ作为参考标准。总结了这些试验的敏感性和特异性。ＩＰ、ＩＦＡＴ、组织病理学、ＰＣＲ和杂交技术的敏感性分别为１００％、９３％、７％、２７％和０％。其特异性分别为９３％、９３％、１００％、１００％和１００％。 相似文献
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利用常规法建立分泌抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的单抗细胞株，选其中特异性强、稳定性好、分泌抗体效价高的两株单抗２（１）和２（４），用于建立单抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＢＶ，该方法仅与ＩＢＶ，呈阳性反应，而与鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊炎病毒、禽腺病毒、鸡传染性喉气管炎、鸡支原体等病原体均呈阴性反应。１４日龄ＳＰＦ鸡接种ＩＢＶ后，用本方法对其两周内的口腔棉拭样品进行跟踪检测，结果检出率为８０％。将 相似文献
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将８头健康猪进行ＩＢＤ强化免疫接种常规采集免疫猪血清，用琼扩试验测定血清ＩＢＤ抗体效价为１：６４－１：１２８。抗血清对自然发生ＩＢＤ的病鸡，皮下注射０．５ｍｌ／只，其总存活率达９５－１００％，但发病后期的病鸡治疗存活率一般为７０％左右。 相似文献