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1.
为了研究三氯化铬与大鼠胰岛细胞共培养对胰岛细胞活性与胰岛素分泌水平的影响,并对其影响机制进行探讨,以台盼蓝染色法和MTT法检测胰岛β细胞活性,以不同浓度葡萄糖刺激胰岛素释放评价三氯化铬对胰岛细胞功能的影响,同时以RT-PCR检测胰岛细胞的抗凋亡基因bcl-2的表达。结果发现,随培养液中三氯化铬浓度的增加,胰岛活性随之增加,凋亡率降低,但2.0μmol/L的活性有所降低,凋亡率与对照组没有显著差异(P>0.05)。低糖和高糖浓度环境中试验组与对照组的胰岛素分泌没有显著差异(P<0.05),RT-PCR发现试验组的bcl-2表达显著高于对照组(P<0.05)。2.0μmol/L CrCl3明显降低胰岛细胞的凋亡率,提高其存活率,改善胰岛功能。 相似文献
2.
本实验旨在分析不同浓度的EETs对胰岛β细胞的影响,为防治2型糖尿病提供理论依据。体外培养MIN6小鼠胰岛瘤细胞,经不同浓度EETs处理细胞后,分别采用CCK-8法和ELISA法检测细胞活性和胰岛素含量。浓度为100 nM的11,12-EET和14,15-EET对胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌能力具有显著促进作用。100 nM11,12-EET和14,15-EET均显著增加胰岛β细胞的增殖以及其胰岛素分泌能力。 相似文献
3.
【目的】简化胰岛的分离纯化方法,建立完善的胰岛评价体系。【方法】采用Ⅴ型胶原酶分离出Spra-gue-Dawley大鼠胰岛,并采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛。纯化的胰岛通过双硫腙(Dithi-zone,DTZ)染色进行计数及纯度检测,丫啶橙(AO)-碘化丙啶(PI)双染色法确定分离细胞的存活率,体外葡萄糖刺激释放胰岛素试验检测胰岛的分泌活性。采用Adobe Photoshop程序改进了常规的胰岛计数方法,并进行胰岛标准计数。【结果】平均每只成年Sprague Dawley大鼠的胰腺,可获得(3 840±24)当量数(IEQ)纯化胰岛,纯度可达到90%,细胞平均存活率达92%。【结论】采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法及基于Adobe Photoshop程序的标准计数方法,可分别用于大鼠胰岛分离纯化和计数。 相似文献
4.
【目的】研究人PDX-1基因对胰岛发育相关基因和胰岛素基因(Insulin,INS)表达的影响,探讨PDX-1基因诱导非β细胞为胰岛素分泌细胞的可能性。【方法】采用PCR扩增技术,从人的胰腺cDNA中扩增PDX-1基因和INS基因的阅读框架,分别构建了质粒pAAV-PDX-1和pAAV-INS;将pAAV-PDX-1转染人胚肾细胞(293T)48 h后,RT-PCR检测293T细胞中胰岛发育相关基因的表达;再将pAAV-PDX-1和pAAV-INS共转染293T细胞48 h后,RT-PCR检测293T细胞中INS的表达。【结果】转染pAAV-PDX-1的293T细胞中,检测到胰岛发育相关基因PDX-1、Ngn3、PC2、BETA2的表达;PDX-1没有直接增强INS基因表达的作用。【结论】在293T细胞中,PDX-1基因对胰岛发育相关基因的表达有重要影响,PDX-1在诱导非β细胞为胰岛素分泌细胞的过程中可能有着重要的作用。 相似文献
5.
目的：：通过对荆州区初发糖尿病患者的胰岛功能进行跟踪观察,探讨初发糖尿病患者胰岛功能的变化特点。方法：选取荆州区初发糖尿病患者220例作为观察对象,跟踪随访12个月。在就诊后的3个月、6个月及12个月时,全部患者检测血糖变化、C-肽释放量,计算胰岛素分泌指数(HOMA-β)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),观察总结患者的胰岛功能变化特点。结果：①通过药物治疗,患者血糖在3个月时基本达标,6个月及12个月时,患者的血糖水平未见明显波动；②随访期间,糖尿病患者 C-肽释放量持续降低,且在就诊后3个月内,C-肽释放量下降明显,与就诊后6个月时及12个月时比较,差异有统计学意义(P<0.05)。③随访期间,糖尿病患者胰岛素放量持续降低,就诊后3个月内下降最明显,差异有统计学意义(P<0.05)；④随访期间,糖尿病患者岛素分泌指数持续降低,胰岛素抵抗指数持续升高,且与6个月时和12个月时比较,3个月时变化幅度最为显著(P<0.05)。结论：随着病程的延长,初发糖尿病患者胰岛功能总体上降低,二者具有显著相关性,且3个月内患者的胰岛功能下降最为显著。 相似文献
6.
胰腺-十二指肠同源盒1(PDX-1)是在胰腺发育中起重要作用的转录因子。小GTP酶Ran、β2肾上腺素受体等物质可通过调节PDX-1基因的表达来影响胰岛素的合成。此外,PDX-1可诱导非胰岛细胞如骨髓间充质干细胞、脂肪源性干细胞等向胰岛素分泌细胞分化,提示PDX-1在胰岛β细胞再生,促进胰岛β细胞恢复中有着巨大潜能。 相似文献
7.
目的通过联合测定血清谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛素自身抗体(IAA)、胰岛细胞抗体(ICA),探讨其在1型、2型糖尿病诊断中的价值。方法 GADA、ICA和IAA检测均采用酶联免疫吸附法。结果糖尿病患者的GA-DA、ICA和IAA阳性率明显高于正常对照组(P<0.05),其中1型糖尿病患者的GADA、ICA和IAA阳性率分别为52.94%、29.41%和26.47%,明显高于2型糖尿病组(P<0.05)。三项抗体联合检测结果,阳性率显著提高。结论 1型糖尿病患者可能存在明显的胰岛功能损伤;GADA、ICA和IAA联合检测可以提高诊断敏感性,并且对1型糖尿病与2型糖尿病的鉴别有重要意义。 相似文献
8.
胎猪胰岛源胰腺干细胞分离培养与诱导分化试验 总被引：3，自引：0，他引：3
【目的】分离培养胎猪胰腺干细胞对其进行功能检测。【方法】用先悬浮后贴壁的方法从胎猪胰岛获得胰腺干细胞，用免疫组化方法鉴定该细胞，以MTT法测定其不同代次的生长活性，诱导该细胞成为胰腺内分泌细胞并检测其功能。【结果】分离得到的细胞不表达nestin，而表达导管上皮细胞标志ck-19、平滑肌标志α-actin,其在体外的生长行为有类似胚胎干细胞样生长形态，细胞体外增殖活力很强，现已传至18代，细胞经诱导后分化为分泌胰岛素的胰腺内分泌细胞，并且伴随着细胞超微结构的改变。【结论】通过本方法可以分离到胎猪胰腺干/祖细胞，经诱导分化可形成有功能的胰岛样细胞团并释放胰岛素。 相似文献
9.
通过葡聚糖 Sephadex G-50凝胶过滤和反相高压液相层析等手段,对无指盘臭蛙皮肤分泌液进行分离纯化,得到了高纯度的多肽分离峰.分别采用体外培养的大鼠胰岛和INS-1胰岛β细胞系检测分离峰的促胰岛素释放活性.结果表明,所得多肽既可促进原代培养的大鼠胰岛分泌胰岛素,又可以促进INS-1细胞胰岛素释放;运用飞行质谱仪测定该促胰岛素释放肽的相对分子质量,其大小为1 868.此外,利用鸡胚尿囊绒毛膜(CAM)体内模型检测,发现该多肽还具有显著的抑制血管生成活性. 相似文献
10.
甲状腺功能亢进症患者糖代谢及胰岛素抵抗和胰岛素分泌功能的变化 总被引：1，自引：0，他引：1
目的:探讨甲状腺功能亢进症(甲亢)患者糖代谢及胰岛β细胞分泌功能、胰岛素抵抗的变化及意义。方法:对甲亢患者72例行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素释放试验,并测定糖化血红蛋白(HbA1C)、血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平。经抗甲状腺药物治疗9～12月后复查以上指标,分别计算胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(HO-MA-IR)、胰岛β细胞分泌功能指数(HOMA-IS)。结果:甲亢合并糖代谢异常者占52.78%(38/72),其中,糖耐量减低(IGT)占34.72%(25/72),空腹血糖受损(IFG)占6.94%(5/72),达糖尿病标准者占11.11%(8/72);甲亢组的餐后2h血糖(2hPG)、HbA1C及HOMA-IR指数显著高于正常对照组(P<0.05),而ISI、HOMA-IS低于对照组(P<0.05);经治疗甲状腺激素恢复正常以后,糖调节受损(IGR)中86.67%(26/30)的患者的血糖及HbA1C恢复正常;前后比较其2hPG、HbA1C及HOMA-IR明显下降(P<0.05),而ISI、HOMA-IS升高(P<0.05)。... 相似文献
11.
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平变化与胰岛细胞功能的关系。方法 20例初诊T2DM、22例长病程(≥5 a)T2DM和18例健康对照者,测定空腹及餐后30、120 min血清葡萄糖、胰岛素、C肽、GLP-1水平,以稳态模型胰岛素分泌指数(HOMA-)、早相和晚相胰岛素分泌指数评价细胞功能。结果 T2DM组餐后血清GLP-1、C肽均较对照组低(P<0.01),尤以长病程组明显(P<0.05)。T2DM组血清GLP-1与血糖呈负相关,但与C肽、HOMA-、早相和晚相胰岛素分泌指数呈正相关。结论 T2DM患者血清GLP-1水平下降可能与胰岛细胞分泌功能减退有关。 相似文献
12.
骨钙素（boneγ-caboxyglutamic acid—containing protein，BGP）是由非增殖期成骨细胞特异合成与分泌的一种非胶原蛋白，BGP的与骨质疏松密切相关。过去研究认为胰岛素减少等原因使骨骼肌中的成骨细胞合成能力减弱，分泌BGP减少，可导致糖尿病患者发生骨质疏松，BGP是骨质疏松的生理指标。但目前研究认为BGP能够负反馈作用于胰岛β细胞，促进胰岛素的分泌，因此机体缺乏BGP时，胰岛β细胞胰岛素分泌较少和敏感性降低，葡萄糖耐量降低，β细胞量和leptin表达降低，可能加重糖尿病的发生发展。BGP的负反馈途径及其作用于其他内分泌器官的的受体也在进一步研究中。 相似文献
13.
无指盘臭蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化与活性初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
通过葡聚糖Sephadex G-50凝胶过滤和反相高压液相层析等手段,对无指盘臭蛙皮肤分泌液进行分离纯化,得到了高纯度的多肽分离峰。分别采用体外培养的大鼠胰岛和INS-1胰岛β细胞系检测分离峰的促胰岛素释放活性。结果表明,所得多肽既可促进原代培养的大鼠胰岛分泌胰岛素,又可以促进INS-1细胞胰岛素释放;运用飞行质谱仪测定该促胰岛素释放肽的相对分子质量,其大小为1868。此外,利用鸡胚尿囊绒毛膜（CAM）体内模型检测,发现该多肽还具有显著的抑制血管生成活性。 相似文献
14.
目的观察罗格列酮(RSG)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞功能、胰岛细胞增殖以及胰腺十二指肠同源盒-1(PDX-1)基因表达的影响。方法将36只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、T2DM未治疗组和RSG组。T2DM未治疗组和RSG组给予高脂饲料喂养,于第8周末以链脲佐霉素(STZ)30 mg/kg腹腔注射,成模后RSG组每天给予RSG 4mg/kg灌胃持续8周。检测各组空腹血糖以及胰岛素水平;12周后处死大鼠立即取出胰腺组织,用免疫组化染色和荧光定量PCR观察胰岛增殖细胞核抗原(PCNA)、PDX-1 m RNA表达。结果与正常对照组相比,T2DM未治疗组PDX-1m RNA表达减少(P<0.01);与T2DM未治疗组比较,RSG组大鼠PCNA和PDX-1m RNA基因表达增加(P<0.01)。结论RSG上调T2DM大鼠胰腺PDX-1基因表达,改善胰岛β细胞功能。 相似文献
15.
[目的]研究Activin A体外定向诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成胰岛β细胞的作用,为移植体外新生β细胞治疗宠物犬糖尿病打下基础,同时为胰岛细胞体外再生培养的优化提供科学依据.[方法]采用培养液RPMI-1640+10%FBS+10 ng/mL EGF+1%青霉素—链霉素扩增大鼠胰腺导管干细胞至单层,空白对照组加基础培养液,诱导组在基础培养液中分别添加5、10、15和20 ng/mL Activin A,连续培养28 d.诱导培养期间于倒置显微镜下观察细胞形态变化,诱导结束后通过双硫腙(DTZ)染色、细胞免疫荧光染色、ELISA检测及实时荧光定量PCR等方法对分化形成的类胰岛细胞团功能和性状进行验证.[结果]大鼠胰腺导管干细胞经Activin A诱导分化形成球形细胞,并聚集成团(类胰岛),DTZ染色结果均呈阳性.诱导28 d后,20 ng/mL Activin A诱导组的类胰岛细胞团数量及其Insulin基因表达水平均极显著高于其他3个Activin A诱导组(P<0.01,下同),且类胰岛细胞体积最大,类胰岛细胞的Pdx1基因表达水平最高;无论在低葡萄糖(5 mmol/L)还是高葡萄糖(25 mmol/L)的刺激下,20 ng/mL Activin A诱导组类胰岛细胞的Insulin和C-peptide分泌量均极显著高于其他3个Activin A诱导组.[结论]Activin A能体外诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成胰岛β细胞,且以基础培养液中添加20 ng/mL Activin A的诱导效果最佳. 相似文献
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胰岛移植被认为是攻克Ⅰ型糖尿病的有力治疗手段,但胰岛细胞供体的缺乏与移植后的免疫排斥反应仍是胰岛移植不可回避的两大难题。免疫隔离技术的出现,为胰岛移植提供了新的思路。当然,新技术的应用必然也伴随着新的问题与挑战。本文就微囊化免疫隔离技术的发展、目前在胰岛移植中的应用状况、遇到的问题及解决方案、未来的研究方向等方面做一综述。 相似文献
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植物多肽激素PA1b的纯化鉴定及功能研究 总被引：1，自引：1，他引：0
通过稀醋酸低温浸提、海藻酸吸附、盐析、SephadexG25凝胶过滤、Sephacel离子交换层析和高效液相色谱等方法,从豌豆种子中分离纯化出PA1b及其多种异构体,并通过质谱和氨基酸测序进行了鉴定,结果表明:PA1b能抗胃蛋白酶(pepsin)水解,其高度的酶稳定性是由于分子内具有胱氨酸结构模体。此外,PA1b能明显延长体外培养的胰岛β细胞的存活时间,并影响胰岛β细胞的功能。 相似文献
18.
《天津农学院学报》2017,(1)
2型糖尿病是一种常见的慢性疾病,其发生与胰岛素的耐受相关。β-抑制蛋白2(β-arrestin2)的缺失或功能紊乱,会导致胰岛素抵抗和2型糖尿病的发生。而使用β-arrestin2进行治疗可明显缓解葡萄糖不耐受及胰岛素抵抗。本研究通过重组PCR方法,将小分子泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)与β-arrestin2基因融合,再将融合基因插入原核表达载体p ET22b中,成功构建了p ET22b-SUMO-β-arrestin2表达载体,将重组表达载体转入大肠杆菌Rosetta Blue(DE3)宿主细胞,使用IPTG在温度为20℃诱导表达,再将诱导表达后的蛋白经Ni-NTA进行纯化,成功获得SUMO-β-arrestin2蛋白,为后续β-arrestin2药效学的研究奠定基础。 相似文献
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采用组织切片和免疫组化技术对大口黑鲈的胰腺进行了组织学观察。经H-E染色和G-醛复红染色了的切片显示:大口黑鲈腹腔中10多个肉眼可见的黄白色颗粒物其实是被一层结缔组织和外分泌胰腺包裹着的胰岛结构,其中最大的一个即为主岛;还有许多肉眼不可见的胰岛结构被埋藏于总胆管的管壁中;肝脏中有外分泌胰腺的存在与分布。过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组化切片和图像分析显示:B细胞主要集中胰岛的中央区;A细胞分布于胰岛的全部。本研究的结论为:大口黑鲈的内分泌胰腺主要分布于总胆管周围,外分泌胰腺除了包裹于胰岛之外也分布于肝脏中,胰腺的分布属于弥散型。 相似文献
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他汀类药物治疗糖尿病伴代谢综合征的作用机制 总被引：1，自引：0，他引：1
他汀类药物可用于糖尿病伴有代谢综合征的治疗,其作用机制主要是减轻胰岛素抵抗及胰岛β细胞的损伤,改善高血压、血脂障碍和高血粘度,防治心脑血管疾病、减少心脑动脉事件发生和保护肾功能、减少蛋白尿等。 相似文献