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1.
海洋低温碱性蛋白酶的急性毒性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
应用酶工程技术,得到在室温下有较高酶活力的海洋低温碱性蛋白酶。为对海洋低温碱性蛋白酶进行安全性评价,作者应用小鼠和大鼠急性毒性试验及最大耐受量（MTD）测定,观察海洋低温碱性蛋白酶对小鼠1次口服后产生的急性毒性反应和大鼠完整皮肤短期内接触海洋低温碱性蛋白酶所产生的毒性反应。结果表明,小鼠1次口服海洋低温碱性蛋白酶的MTDM＞20g/kg为实际无毒物,其中毒的靶器官是肝脏,未见大鼠经皮的急性毒性反应。 相似文献
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海洋低温碱性蛋白酶的刺激性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
探究海洋低温碱性蛋白酶的刺激性,并为其应用提供实验依据。作者应用新西兰大耳白兔,以40％、20％和5‰浓度的海洋低温碱性蛋白酶进行皮肤急性刺激试验,5‰海洋低温碱性蛋白酶的皮肤多次刺激性试验,1‰的海洋低温碱性蛋白酶的兔角膜刺激性试验,评价其安全性。结果表明,5‰和20％海洋碱性蛋白酶单次应用实验皮肤未出现红斑和水肿,对皮肤无刺激性。40％海洋低温碱性蛋白酶液对皮肤有中度刺激性。皮肤病理学显示5‰的海洋低温碱性蛋白酶液未见皮肤的慢性刺激反应,皮肤结构完整、层次清晰。1‰的海洋低温碱性蛋白酶液对兔眼亦无刺激性。 相似文献
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海洋低温碱性蛋白酶的遗传毒理学研究 总被引：1，自引：0，他引：1
应用NIH纯系小鼠骨髓细胞微核试验和染色体畸变试验,探究海洋低温碱性蛋白酶的遗传毒性作用及对人类的潜在危害。观察并计数嗜多染红细胞（PCE)与正红细胞（NRBC）的比值、微核率;染色体的畸变类型和畸变率,检测海洋低温碱性蛋白酶的诱变作用。结果表明,皮下注射环磷酰胺的小鼠,P／N比值＜1,微核率为22.97‰,染色体畸变率为18.32,与生理盐水（NS）对照组比较差异极显著（P＜0.01),而海洋低温碱性蛋白酶各组小鼠微核率均＜4‰,染色体畸变率为0.19%-0.25%,与NS组比较无显著性差异（P＞0.05）。未见海洋低温碱性蛋白酶各组对小鼠骨髓细胞的遗传毒性。 相似文献
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海洋低温碱性蛋白酶亚慢性毒理学研究 总被引：2，自引：0，他引：2
应用大鼠经口、经皮肤亚慢性毒性试验,对海洋低温碱性蛋白酶毒理学进行研究。120只Wistar大鼠,随机分为6组：对照组,海洋低温碱性蛋白酶1.2g/kg(经口）,1.2g/kg、0.135g/kg、0.015g/kg(经皮）和1.2g/kg(经皮追踪组）,用药周期90d,追踪组增加28d观察。记录和检测大鼠的一般状况和体质量增长、脏器系数、血常规、凝血时间、肝肾功、部分血液生化和离子浓度及病理检查。结果表明,海洋低温碱性蛋白酶各组（经皮、经口）大鼠的各项指标与对照组比较均未见明显异常（P均＞0.05）,提示大鼠能耐受长期给予1.2g/kg（经皮、经口）的海洋低温碱性蛋白酶。 相似文献
5.
以缢蛏为试验材料,采用羟自由基清除率为评价指标,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适水解用酶,在单因素试验基础上使用响应面法优化酶解工艺条件,考察缢蛏蛋白肽的羟自由基清除能力并通过SephadexG-15凝胶层析测定其分子质量分布.结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的缢蛏蛋白肽清除羟自由基能力明显强于其他蛋白酶,优化后的碱性蛋白酶水解缢蛏蛋白工艺条件为底物浓度6 mg/ml、加酶量3％、pH8.0、温度55℃、酶解时间4h,蛋白肽的羟自由基清除率为76.60％,IC50值为1.89 mg/ml,蛋白肽中80％以上是分子质量小于1500 Da的小分子肽. 相似文献
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黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶的基因克隆和序列测定 总被引：4，自引：0，他引：4
黄海黄杆菌YS－9412－130具有稳定的分泌低温碱性蛋白酶的能力。将其染色体DNA用Sau3AⅠ部分酶切后,低熔点琼脂糖回收2－10Kb的DNA片段,用Klenow大片段酶半补齐,与用SalⅠ酶切且半补齐的质粒pUC19连续后,转化E.Coli.JM109,构建基因文库。且酪蛋白平板法和酶联免疫吸附（ELISA）的活性筛选方法从基因文库中筛选到一株产海洋低温碱性酶的阳性克隆（命名为pHH1）。序列测定分析表明,此重组质粒包含有长度为768bp低温碱性蛋白酶基因的完整的开放读码框架（ORF）和上游基因调控序列。此片段编码由256个氨基酸组成的酶,计算分子量为83000Dal。通过Southern杂交证实了此片段来自于黄海黄杆菌YS－9412－130基因组DNA。 相似文献
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酶法制备脱脂鱼蛋白的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
采用5种酶对脱脂鲢肉进行水解制备水解鲢蛋白。脱脂鲢肉是分别采用异丙醇、正己烷、乙酸乙酯3种溶剂萃取法进行脱脂后得到。分别用木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶、枯草杆菌碱性蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶对3种脱脂鲢肉及未脱脂鲢肉进行水解。试验结果表明，乙酸乙酯对鲢肉脱脂率最高，脱脂率为96．33％。复合蛋白酶为最适酶，乙酸乙酯脱脂鱼肉为最佳底物；在最佳水僻条件下：pH6．5，温度55℃，酶量3500U／g蛋白质，底物浓度（乙酸乙酯脱脂鲢肉：水）1：5，其水解度达到最大，为44．00％。 相似文献
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三株芽孢杆菌生长与蛋白酶活性的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
采用Folin -酚试剂法测定在不同pH值时三株芽孢杆菌Y2 - 2、F14、Y1- 13的酶活力 ,研究细菌生长与蛋白酶活力的关系。结果表明 ,在细菌生长初期 ,蛋白酶活力较小 ,随着细菌生长进入稳定期 ,蛋白酶活力逐渐增大。在同一生长阶段 ,芽孢杆菌发酵液的蛋白酶活力随pH值的增加而增大 ,在pH值为 9时达到最大值。证明该三株菌所产蛋白酶均为碱性蛋白酶 ,其中以Y2 - 2、F14的酶活力基本相当 ,且在整个实验中测得的酶活力均比Y1- 13的酶活力大。 相似文献
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黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶性质鉴定 总被引：8，自引：3，他引：8
对黄海黄杆菌YS-9412-130菌株产低温碱性蛋白酶的理化性质研究表明，该酶由256个氨基酸组成，分子量为33000Dar，等电点pI为9.45，米氏常数Km为5×10-3mmol/L；酶的最适作用pH范围为9.5～10.5，最适作用温度30℃，具有一定的抗氧化稳定性。Ca2+、Mn2对酶有激活作用，而Hg2+、Ag+对酶有抑制作用。DFP、NBS严重抑制酶的活性,而同时该酶也能被EDTA抑制。结果表明该低温碱性蛋白酶为一新型的丝氨酸蛋白酶。 相似文献
10.
利用木瓜蛋白酶、低温碱性酶、风味蛋白酶酶解红鱼（Sciaerlops ocellatus）鱼排，分别获得木瓜蛋白酶酶解物（PPH）、低温碱性酶酶解物（LPH）和风味蛋白酶酶解物（FPH）。对3种酶解物化学成分及氨基酸组成进行分析，结果显示，3种酶解物中总氨基酸含量都在70％以上，总氮含量为82．12％～84．61％。酶解物分别以5％（质量比）量加入鳙鱼（Aristichthys nobilis）鱼糜中，冻藏于-20℃。测定冻藏过程中肌原纤维蛋白质盐溶性和Ca^2＋-ATPase活性的变化，同时测量鱼糜凝胶弹性的变化，并对冻藏样品进行扫描电镜观察，抗冻效果同商业抗冻剂（4％蔗糖、4％山梨醇、0．3％多聚磷酸盐混合剂）进行比较。结果表明，各酶解物能够在一定程度上抑制鱼糜蛋白质的冷冻变性，延缓肌原纤维蛋白质盐溶性和Ca^2＋-ATPase活性的下降，鱼糜凝胶质量下降减少，其中木瓜蛋白酶酶解物具有最好的效果。 相似文献
11.
鲣鳔蛋白抗氧化酶解物制备工艺 总被引：2，自引：1，他引：2
为有效提高鲣鳔蛋白的附加值,研究以DPPH自由基清除率为抗氧化活性评价指标,采用蛋白酶酶解制备活性多肽的工艺,选用菠萝蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶7种酶在各自最适的条件下酶解,筛选出复合蛋白酶为最适用酶,通过单因素实验分别研究加酶量、溶液初始p H、酶解温度和时间对酶解物抗氧化活性的影响,在此基础上,根据响应面法优化鲣鳔抗氧化酶解物的制备工艺。结果显示,最佳酶解工艺条件为加酶量8.53 U/mg,p H 5.54,温度50.03°C,时间5.07 h。此外,利用超滤法对最佳条件下制备的酶解物进行初步分级,得到分子质量分别为大于10 000 u、3000~10 000 u和小于3000 u的3段组分,且这3段组分对DPPH自由基的半抑制浓度IC50值分别为0.64、0.52和0.37 mg/m L。研究表明,最优条件下制备的酶解物的DPPH清除率达72.00%,与模型预测值71.60%接近,且其中小于3000 u的组分具有较强的DPPH自由基清除活性。 相似文献
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蛋白酶对文蛤肉水解效果的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本文探讨了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、精制中性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶等6种蛋白酶对文蛤肉的水解效果,以文蛤肉水解液的水解度、氮收率及水解得率为指标,并对酶解液进行感官鉴评和风味评分,结果表明精制中性蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶为适用于文蛤肉水解的蛋白酶。 相似文献
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Le-Chang Sun Yong-Lin Chen Chan Zhong Emiko Okazaki Min-Jie Cao Wu Yin Weng Kazufumi Osako 《Fisheries Science》2014,80(4):839-847
Autolysis of North Pacific krill protein in acidic and alkaline solubilization during protein recovery via isoelectric solubilization/precipitation was investigated. Pronounced auto-degradation of myosin heavy chain and actin from krill protein was observed at alkaline pH values (pH 9.0–12.0), with maximum autolytic activity at about pH 12.0. Meanwhile, proteolytic activity in krill protein at pH 12.0 was observed at low temperatures, suggesting a possible cause for the autolysis of krill protein during the protein recovery process. Three major proteinases were detected by zymographic analysis of myofibrillar protein, with approximate molecular weights of 26 kDa (KP-1), 18 kDa (KP-2) and 17 kDa (KP-3). KP-3 was active over a pH range from pH 5.0–12.0, suggesting that it may be responsible for the autolysis of krill protein during alkaline-induced protein recovery. Further study on substrate specificity and inhibitory specificity of KP-3 showed that KP-3 is serine type proteinase. 相似文献
14.
水杨酸对龙须菜抗高温生理的影响 总被引：5，自引：3，他引：2
以龙须菜为材料,研究了不同浓度水杨酸对高温下龙须菜的生长速率、抗氧化酶、渗透调节物质、藻胆蛋白、叶绿素荧光特性和HSP70基因的影响。结果表明,水杨酸处理组不论是生长、酶活性和膜脂受损情况都不同程度优于对照组,其中5.0、10.0μg/mL处理组效果较好。10.0μg/mL水杨酸处理组效果最为明显,日生长速率与对照组相比增长了340%。在处理第3天,10.0μg/mL处理组各指标达到最大,SOD增长了74%,POD增长了70%,CAT增长了40%。脯氨酸和甘露醇分别增长了70%和26%。藻红蛋白增加了46.2%,藻蓝蛋白增长了40%。与对照组相比,MDA含量第1天下降最为显著,下降了10%。高温胁迫下,龙须菜叶绿素荧光参数Fv/Fm、Fv/Fo、qP和ΦPSⅡ均明显降低,非光化学淬灭(NPQ)呈现先上升后下降的趋势。水杨酸处理能有效减缓5种龙须菜叶绿素荧光参数的降低程度。水杨酸处理后HSP70基因表达量较对照组低。本实验结果表明水杨酸具有增强龙须菜抗高温胁迫的作用。 相似文献
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研究了褐藻酸钠寡糖(AOS)和壳寡糖(COS)对仿刺参(Apostichopus japonicus)生长及免疫功能的影响。实验分为对照组、COS组和AOS组,对照组投喂企业常规饲料,COS组在对照组饲料基础上添加壳寡糖(1 g·kg~(-1)),AOS组在对照组饲料基础上添加褐藻酸钠寡糖(1 g·kg~(-1))。在第30、60、90天,测定各组仿刺参的质量,并在第90天随机采集50 ind仿刺参的体腔液,测定酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化氢酶和一氧化氮合酶等免疫酶的活力。结果表明,AOS组和COS组仿刺参体质量分别比对照组增长16.4%和18.2%;AOS组仿刺参的酸性、碱性磷酸酶活性分别提高了75.1%和67.3%;而COS组仿刺参的过氧化氢酶和一氧化氮合酶的活性分别提高了190.3%和55.6%。海洋寡糖COS和AOS作为仿刺参的免疫增强剂,可有效提高幼参的生长性能和免疫力,其中COS的作用效果优于AOS。 相似文献