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《家畜生态学报》2021,42(7)
试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。 相似文献
3.
为提高精液低温保存质量,在山羊精液低温保存基础稀释液中分别添加浓度为0、10、30、50、70 mg/L葡萄籽原花青素,检测精液保存过程中各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性、T-AOC、MDA等精子质量评定指标,探讨葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响及最适添加浓度。结果表明:一定浓度葡萄籽原花青素可提高精液保存质量,且最适添加浓度30 mg/L。在30 mg/L处理组中,精液各项指标(MDA除外)在保存期间均最高,且5 d时精子活率、顶体完整率.、线粒体活性、T-AOC显著高于其他组(P0.05),其精子活率为51.46%,顶体完整率为67.55%,质膜完整率为50.97%,线粒体活性为50.78%。 相似文献
4.
精液体外孵育保存会使精子品质下降,抗氧化剂L-肉毒碱可促进激活的脂肪酸从细胞质到线粒体基质的转运,减少ROS产生和脂质过氧化反应的发生。研究分析了牛精液体外保存过程中不同浓度L-肉毒碱(LC)(0、2、10和15mmol/L)和不同孵育时间(2、4、6h)对牛精子活力、质膜完整性、线粒体活性和顶体完整性的影响。结果表明:与对照组相比,在牛精液体外保存稀释液中添加10mmol/L和15mmol/L的LC均可显著(P0.05)提高精子活力(33.0%vs 45.6%,42.4%)、质膜完整率(61.2%vs 73.6%,68.4%)和顶体完整率(81.4%vs 88.4%,86.3%),而线粒体活性则是10 mmol/L LC组效果最好;将筛选的最佳浓度10mM LC组于27℃体外孵育2、4、6h后,其精子的活力、质膜完整率和线粒体高膜电位百分率均显著高于对照组(P0.05),顶体完整率仅在孵育6h后与对照组差异不显著(P0.05)。由此可见,LC可保护精子功能和结构免受损伤,不仅能改善牛精液体外保存的品质参数,又可延长牛精液体外保存的时间。 相似文献
5.
为研究精液低温保存稀释液中添加不同浓度褪黑素对羊精液低温保存效果的影响,本试验将不同浓度褪黑素(0、10、20、40、80mg/L)添加到羊精液低温保存稀释液中,通过分析5d内各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性等精子质量评定指标的差异。结果表明:经过5d的保存,20mg/L试验组对山羊精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率以及线粒体活性均显著高于其他试验组(P0.05)。说明适度浓度(20mg/L)的褪黑素有利于提高精子保存品质;但随着添加褪黑素浓度的升高(至80mg/L),精子低温保存效果下降明显。 相似文献
6.
《养猪》2016,(4)
研究通过检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜完整率来评价3种商品稀释剂对关中黑猪精液保存的效果。结果表明,日本某稀释剂对关中黑猪精液常温保存效果要显著优于比利时以及英国某稀释剂(P0.05),保存至第5天时日本某稀释剂组的精子活率仍达到0.75,大于比利时某稀释剂组的0.53和英国某稀释剂组的0.51。此外,保存至第5天精子活率、顶体完整率、线粒体膜完整率保存效果上,比利时某稀释剂组和英国某稀释剂组较为相近,而在对质膜完整率的保存效果上,英国某稀释剂组要显著优于比利时某稀释剂组(P0.05),保存至第5天时质膜完整率英国某稀释剂组和比利时某稀释剂组分别为44.52%和32.48%。 相似文献
7.
《畜牧与兽医》2014,(12):34-37
在猪精液基础稀释液中添加不同浓度的菟丝子水提物,测定17℃保存时猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率及SOD活性,探讨菟丝子水提物对猪精液17℃保存效果的影响。试验分5组:基础稀释液组(I)、菟丝子水提物0.125%(II)、0.25%(III)、0.5%(IV)及Vc对照组(V),结果表明,随着保存时间的延长,各组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和SOD活性均降低,且前三者降低显著(P<0.05),后者I、IV和V组在保存第2天时及II组和III组在保存第4天时显著降低(P<0.05)。各组相比,保存后第1天和第2天时,精子活率、质膜完整率和顶体完整率均无显著差异(P>0.05),且保存后第35天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第15天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第13天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第43天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第45天时,精子SOD活性II-V组均显著高于I组(P<0.05),其中以III组最高,但仅第4天III与各组存在显著差异(P<0.05)。结果表明:适量浓度的菟丝子水提物对17℃保存猪精子具有保护作用。 相似文献
8.
在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。 相似文献
9.
为改善吐鲁番黑羊精液的冷冻保存效果,提高精液冻后的精子活率,本实验在3种精液冷冻稀释液中添加不同浓度(0、1%、2%)的十二烷基硫酸钠(SDS),TrⅠs-葡萄糖-柠檬酸钠为Ⅰ液,蔗糖-葡糖糖-柠檬酸钠为Ⅱ液,OptⅠdyl稀释液做对照为Ⅲ液。熏蒸冷冻后解冻,用精子分析系统(CASA)和流式细胞仪检测冷冻效果。结果表明:Ⅰ液1%SDS组精子活率最高(65.4%),与Ⅰ液2%SDS组精子活率没有差异,高于其他7组(P<0.05);Ⅲ液1%SDS组畸形率(9.4%)低于Ⅱ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液2%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组直线运动速率(51.4μm/s)高于Ⅰ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液0%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组和Ⅲ液1%SDS组的质膜完整率高于Ⅰ液2%SDS组和Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),且Ⅰ液1%SDS组最高;Ⅰ液1%SDS组的顶体完整活精子比率高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),各组的活精子顶体完整率无显著差异;Ⅰ液1%SDS组高线粒体膜电位比率(43.0%)高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05)。因此,采用添加1%SDS的Tris-葡萄糖-柠檬酸钠稀释液配方显著提高了吐鲁番黑羊精液冷冻保存效果。 相似文献
10.
原花青素对猪精液常温保存效果的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。 相似文献
11.
在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。 相似文献
12.
冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响,为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液(Ⅰ组)稀释后于17℃过夜保存(Ⅱ组),然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1.5h(Ⅲ组),再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min(Ⅳ组)。通过精子形态正常率及活力检测,吖啶橙(AO)染色检测精子DNA完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子头部质膜完整性,低渗肿胀试验(HOS)检测精子尾部质膜完整性,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,并用扫描电镜(SEM)观察精子结构,评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明,与新鲜精液相比,Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义(P0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响(P0.05),但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异(P0.05)。扫描电镜检测结果表明,17℃过夜保存精子未见异常,头、颈、尾结构完整,顶体完整、光滑;Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤;Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。 相似文献
13.
《畜牧兽医杂志》2021,(4)
本实验旨在研究不同浓度没食子酸(GA)对猪精液常温(17℃)保存效果的影响并筛选没食子酸的浓度范围。在猪精液稀释剂中分别添加不同浓度(0、5、6、7、8、9、10μg/mL)没食子酸,于不同保存时间测定猪精子的活率、A+B级精子数、质膜完整率及顶体完整率指标。结果表明,保存第1～3 d各浓度组间指标无明显差异(P0.05),保存第5 d, 6、9μg/mL组除组质膜完整率极显著高于对照组(P0.01),保存第5、7 d时,7、9μg/mL组精子活率显著高于对照组(P0.05);保存至第9 d时9μg/mL组活率显著高于对照组(P0.05)。综上表明,一定浓度范围的没食子酸有助于提高常温(17℃)保存下猪精液的质量,并延长保存时间。 相似文献
14.
为了开发猪精液常温保存新型稀释粉,通过检测精子活率、质膜完整性、顶体完整性以及超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)产生量等指标,分析常温保存稀释粉对猪精液的保存效果的影响。结果表明,在常温保存条件下,自配稀释粉保存猪精液5d时间内,精子活率平均为0.63,精子顶体完整率和质膜完整率分别达到78.4%和48.6%;SOD活力、H2O2产生量和MDA产生量分别是177.39IU/mL、86.28mmol/mL和9.36nmol/mL,可以在生产实践当中应用。 相似文献
15.
通过在猪鲜精和17℃保存精液中添加聚维酮碘(PVP-Ⅰ),探讨其杀灭精液有害细菌的效果和对精子质量的影响,从而达到阻断病原菌垂直传播的目的。保存后不同时间时取样精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测精液中细菌菌落总数,并用MicroScanA/S4细菌鉴定仪鉴定细菌种类。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率、活力,低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测线粒体活性和考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,用PVP-Ⅰ消毒猪精液时,在0～0.27g/L随着PVP-Ⅰ质量浓度的增加杀菌效果越好。精液中添加0.20g/L和0.27g/L PVP-Ⅰ能杀死棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌(作用1h),但不能杀死变形杆菌。在猪精液稀释液中添加质量浓度0～0.20g/L的PVP-Ⅰ对17℃保存猪精子质量无影响。结果表明,聚维酮碘在质量浓度0.20g/L能杀死猪精液中的棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌,并且对17℃保存猪精子质量常规指标(活率、活力、线粒体活性、质膜完整性和顶体完整性)无影响。 相似文献
16.
在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳. 相似文献
17.
不同稀释液对藏猪精液℃保存效果的影响 《畜牧与饲料科学》2016,37(10):22-22
为探讨不同精液稀释液对4℃保存藏猪精液的效果,保证优良藏猪种公猪精液的合理、高效利用,该试验选用5种常用的猪精液常温保存稀释液,并在藏猪精液4℃保存至第5天时检查藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率等。结果表明,在精液保存过程中,2号液对藏猪精液的保存效果最佳,精子活力在保存至第5天时仍然保持在0.54,且藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率均高于其余4组（P〈0.05）。该试验研究初步筛选了4℃保存藏猪精液的稀释液,为今后藏猪精液的生产应用奠定了基础。 相似文献
18.
《中国养兔杂志》2018,(5)
本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。 相似文献
19.
《中国畜牧杂志》2021,(8)
为探究牛血清白蛋白(BSA)对湖羊精液低温保存效果的影响,在湖羊精液低温保存的稀释液中添加不同浓度BSA(0、1、2、3、4、5、6 g/L),检测分析BSA对精子在4℃保存条件下的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率。结果表明:保存24～96 h时,2～3 g/L BSA组的精子活率显著高于对照组;保存120 h时,3g/LBSA组的精子活率显著高于其他组;保存24、48、120h时,3g/LBSA组的精子活力显著提高;保存24～120 h时,6 g/L BSA组的精子活力低于对照组;保存48～72 h时,1～4 g/L BSA组的精子质膜完整率显著提高;保存48～72 h时,4 g/L BSA组的顶体完整率显著高于对照组;保存96～120 h时,3 g/L BSA组的顶体完整率显著高于对照组。本研究结果表明,在4℃条件下,1～5 g/L BSA可以提高湖羊精子活率、活力和质膜完整率,其中3 g/L BSA的作用效果最佳。 相似文献
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使用荧光染色和流式细胞术检测山羊精子 总被引：1，自引：0，他引：1
分别使用PI(碘化丙碇),FITC-PSA(异硫氰酸荧光素络合豌豆凝集素)和RH123(罗丹明)对山羊冷冻精子进行染色,再使用流式细胞仪进行检测、分析。试验发现,对于山羊的冷冻精子,PI染色阴性的为质膜完整的精子;FITC-PSA染色阴性的可能为顶体完整的精子,染色FITC-PSA+和FITC-PSA++,可能分别为顶体反应中的精子和顶体破损精子;RH123+应为线粒体无活性精子,有绿色荧光可能是因为染料残留在细胞膜上导致,而RH123++可能应为线粒体有活性的活精子。不同个体羊的精子对于低温敏感度不一样。不同个体羊之间的冻精顶体完整率、质膜完整率、线粒体有活性的精子比率之间差异显著,据此应选择合适的山羊个体进行精液冷冻。 相似文献