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1.
《华北农学报》2021,36(1)
为了探究p38 MAPK及PI3K/Akt信号通路是否参与雌二醇(E_2)对奶牛子宫内膜上皮细胞中COX-2的表达及PGF_(2α)分泌的调节,通过体外培养妊娠早期奶牛子宫内膜上皮细胞,并添加E_2单独或联合p38 MAPK抑制剂SB203580和PI3K抑制剂LY294002处理奶牛子宫内膜上皮细胞。通过Western Blot、qRT-PCR检测COX-2基因和蛋白的表达,ELISA技术检测PGF_(2α)的水平变化。结果显示:E_2促进了妊娠早期奶牛子宫内膜上皮细胞中COX-2的表达和PGF_(2α)的分泌;与此同时,E_2激活了p38 MAPK及PI3K/Akt信号通路,添加SB203580和LY294002则抑制了E_2对COX-2表达及PGF_(2α)分泌的促进作用。说明E_2通过激活p38 MAPK及PI3K/Akt信号通路促进了COX-2的表达及PGF_(2α)的分泌。 相似文献
2.
《分子植物育种》2020,(15)
为探究吲哚(Indole)对水稻抗病性的诱导(Priming)作用,本研究使用吲哚预处理‘丽江新团黑谷’(lijiangxintuan-heigu, LTH)水稻离体叶片和接种稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae),在不同时间点使用MAPK级联抑制剂(MAPK cascade inhibitors, U0126)抑制促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传递途径以及使用NADPH氧化酶抑制剂(NADPH oxidase inhibitors, DPI)抑制活性氧的产生和积累,统计发病情况并检测抗性相关基因的表达。研究发现50 mg/L吲哚预处理48 h可以极大地增强水稻的抗病性,而使用抑制剂后,水稻对稻瘟病菌侵染更敏感、发病率更高,同时相关抗性基因的表达也受到抑制。表明吲哚priming可以诱导产生和积累更多的ROS,ROS激活MAPK级联通路积累MAPK蛋白,促使水稻进入防御准备状态,在受到外来胁迫时,MAPK受诱导信号激活,继而启动下游防御反应增强水稻的抗性。本研究为深入探究吲哚诱导提高植物对腐生型病原菌的抗性提供了参考依据,同时也为吲哚作为天然抗性诱导剂在生态农业中的应用和发展提供科学依据。 相似文献
3.
《分子植物育种》2020,(17)
植物有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)参与调控植物低温胁迫应答,但橡胶树中MAPK同源蛋白NTF4至今未被克隆与鉴定,克隆和研究HbNTF4的功能对橡胶耐寒品种的选育具有重要意义。本研究成功从橡胶树c DNA中克隆出HbNTF4基因,氨基酸序列分析表明HbNTF4与其他物种序列同源性很高。通过qRT-PCR发现橡胶树4℃处理后HbNTF4基因表达量上升。将HbNTF4构建至原核表达载体p ET-28a上,在Escherichia coli BL21 (DE3)中诱导并成功纯化出HbNTF4重组蛋白。SDS-PAGE电泳检测表明HbNTF4在37℃诱导8 h,IPTG浓度为0.2 mmol/L的条件下最优,最后成功纯化出符合预期大小的可溶性蛋白,为深入研究HbNTF4的生物学功能提供了理论依据。 相似文献
4.
本试验旨在研究大豆异黄酮(SI)对育成期蛋用种公鸡睾丸发育、血浆生殖激素水平以及与睾酮(T)合成相关的酶和蛋白表达的影响。选用108只10周龄的‘京红1号’蛋用公鸡随机分成6组,每组3个重复,每个重复6只鸡。以玉米-鱼粉型饲料为基础日粮,分别添加不同剂量SI：0、5、10、15、20、25 mg/kg。试验预饲期为1周,正式试验8周。试验结束后采集血液,检测血浆生殖激素(T、LH、FSH和GnRH)浓度。采血后处死,取睾丸组织,称重后检测睾丸组织中与T合成相关的酶(P450scc、3β-HSD)和蛋白(StAR)mRNA的表达量的变化。结果表明：（1）添加量在5~15 mg/kg范围时,SI对育成期蛋用种公鸡进睾丸的生长发育有促进作用,其中添加量为5 mg/kg,睾丸重量和睾丸指数均极显著增加(P＜0.01)。添加量在25 mg/kg时,睾丸指数较对照组极显著降低(P＜0.01)。（2）SI添加量为5 mg/kg时,对生殖激素分泌的促进作用最为明显,添加量达到25 mg/kg时,各激素分泌水平下降。（3）SI添加量在5~15 mg/kg范围时,StAR mRNA表达量显著提高(P＜0.05),而P450scc和3β-HSD mRNA表达无显著差异(P＞0.05)。在本试验条件下,SI添加量为5 mg/kg时,能够促进育成期蛋用种公鸡睾丸发育、提高StAR mRNA表达量和生殖激素分泌水平。饲料中SI的安全添加范围为5~20 mg/kg。 相似文献
5.
为了考察艾叶黄酮异泽兰黄素(eupatilin, EPT)对运动损伤大鼠炎症和抗氧化系统的影响。本研究将SD大鼠分组,每组20只。处理组大鼠分别灌胃不同浓度的异泽兰黄素溶液,灌胃4周。通过力竭运动诱导的运动损伤大鼠模型。对照组大鼠不建模,处理组大鼠在灌胃异泽兰黄素当天开始进行建模。分别检测了大鼠的力竭时间、心肌损伤指标(LDH, CK和c TnI)、心肌TUNEL阳性率、心肌氧化应激(SOD, CAT和MDA)和炎症(IL-1β, IL-6和TNF-α)指标。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2和p38 MAPK/NF-κB信号轴的蛋白表达水平。结果显示,3种剂量的异泽兰黄素均提高了大鼠的力竭时间,降低了血清LDH、CK和cTnI水平,降低了心肌组织TUNEL阳性率,升高了心肌组织SOD和CAT水平,降低了心肌组织MDA水平,降低了心肌组织IL-1β、IL-6和TNF-α水平,升高了心肌组织细胞核Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白相对表达量,降低了心肌组织Keap1蛋白相对表达量,降低了心肌组织p38 MAPK和NF-κB p65磷酸化水平(P<0.05)。总之,异... 相似文献
6.
渗透胁迫对玉米幼苗叶片不同形态多胺含量的影响 总被引：13，自引：0，他引：13
用高压液相色谱法，研究了玉米品种农大108（抗旱性较强）和掖单13（抗旱性较弱）幼苗叶片中游离态(free, f)、酸可溶性共价结合态(AS-conjugated)和酸不溶性共价结合态(AIS-bound) 多胺（polyamine, PA）与渗透胁迫的关系。结果发现，渗透胁迫7 d，农大108的fSpd和fSpm的含量显著(P＜0.05)上升，而掖单13的fPut的升幅显著(P＜0.05)。用S-腺苷蛋氨酸脱羧酶（SAMDC）抑制剂甲基乙二醛-双（鸟嘌呤腙）（MGBG）处理农大108，显著抑制了渗透胁迫诱导的fSpd和fSpm的增加，并且加重了渗透胁迫伤害，用外源Spd处理掖单13，则显著促进了渗透胁迫诱导的fSpd和fSpm的增加，并且减缓了渗透胁迫的伤害。渗透胁迫下，农大108幼苗叶片中AS-conjugated-PA和AIS-bound-PA的上升幅度都显著大于掖单13。用转谷氨酰胺酶（TGase）抑制剂菲咯啉(o-Phen)处理，则抑制了渗透胁迫诱导的AIS-bound-PA含量的上升，并加重了渗透胁迫的伤害。上述结果说明，玉米幼苗叶片中的fSpd、fSpm、AS-conjugated-PA和AIS-bound-PA的升高有利于增强幼苗的抗渗透性。 相似文献
7.
为证实热休克小鼠胎儿成纤维细胞中钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)对热休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)基因表达的影响及其作用机理,将体外培养的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEF)随机分为39℃和41℃热处理组(分别处理0.5,1,1.5,2 h)和常温对照组(37℃),测定各组细胞CaMKⅡ和HSF1 mRNA的量。此外,将培养的细胞分为37℃和39℃CaMKⅡ特异性抑制剂(myr-AIP)处理组和相应的空白对照组,分别测定各组细胞HSP70、HSF1及其mRNA的量。结果表明,39℃热休克1 h后HSF1和CaMKⅡ的mRNA表达量极显著高于常温对照组,经过myr-AIP处理的39℃组细胞HSP70及其mR-NA含量显著低于39℃空白对照组,而37℃myr-AIP处理组与37℃对照组没有显著差异;myr-AIP对37℃组和39℃组的HSF1 mRNA和蛋白含量影响均不显著,却使p-HSF1的含量显著降低。热休克能增加CaMKⅡ和HSF1 mRNA的转录,且CaMKⅡ通过磷酸化HSF1促进HSP70基因表达。 相似文献
8.
为了初步探讨大肠杆菌型奶牛子宫内膜炎发生机制,进而为后续筛选出作用于关键信号通路靶点的药物奠定基础。试验通过组织块培养法和传代培养分离纯化得到奶牛子宫上皮细胞(Bovine endometrial epithelial cell,bEEC)。30μg/mL的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激bEEC 12 h后,收集细胞用于奶牛子宫内膜上皮细胞体外炎性损伤模型的研究。通过荧光定量RT-PCR检测LPS作用于bEEC 2、6、9、12 h后细胞内IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达,然后通过Western-blot检测LPS诱导bEEC NF-кB和MAPKs相关蛋白的表达。结果表明：30μg/mL的LPS作用b EEC细胞2、6、9、12 h可极显著(P<0.01)诱导IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达。LPS可上调MAPKs相关蛋白P38、ERK、JNK的磷酸化水平(P<0.01),促使NF-κB抑制蛋白IκBα的降解(P<0.05)。说明LPS可激活MAPKs和NF-кB信号通路,诱导大量炎症介质的... 相似文献
9.
本试验通过对性成熟公鸡睾丸组织中神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及其受体酪氨酸激酶(tyrosine kinase, TrkA)的表达定位,研究促卵泡素(FSH)对睾丸中NGF及TrkA mRNA表达的影响。选用28只20周龄的庄河大骨鸡公鸡,随机分为4组,分别是对照组和3个FSH处理组。处理组连续静脉注射FSH5天,第6天采集睾丸组织。结果显示：公鸡睾丸组织中存在NGF和TrkA的mRNA及蛋白,且二者主要表达于精原细胞、精母细胞和精子细胞;FSH处理组的TrkA mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),且TrkA mRNA的表达水平随着FSH浓度的增加而增加,但NGF mRNA的表达水平无显著性差异(P>0.05)。总之,以上研究结果表明公鸡睾丸组织中存在NGF和TrkA,且FSH可能通过调节TrkA的表达影响NGF在精子生成过程中的作用。 相似文献
10.
糖皮质激素受体对TLRs信号网络的抑制研究进展 总被引：1，自引：1，他引：0
糖皮质激素(GC)主要是通过特异性受体(GR)参与的蛋白-蛋白相互作用(PPI)和蛋白-DNA相互作用(PDI)网络激活或抑制靶基因的转录。其中,GC干预Toll-like receptors(TLRs)信号网络时,主要依赖于增强TLR通路天然抑制因子表达、直接抑制TLR激活的转录调节因子以及交叉利用GR与TLR信号通路的必需辅助因子。笔者在总结GR的转录调节、TLRs信号网络以及GR与TLRs信号网络串扰的最新研究进展的基础上,着重评述了GR介导TLR信号通路的降调节机制,以期为深入揭示GC调节哺乳动物细胞功能的分子机制和临床应用提供参考。 相似文献
11.
为揭示Ghrelin在绵羊卵母细胞的表达情况,运用实时定量RT-PCR技术检测不同培养系统中绵羊卵母细胞Ghrelin mRNA的相对表达量。结果表明,以M199和血清为基础培养基添加不同激素后培养的卵母细胞GhrelinmRNA相对表达量均显著上升,仅以M199为基础培养基添加不同激素后培养的卵母细胞Ghrelin mRNA相对表达量均显著下降。在不同基础培养基中添加不同激素后,E2较FSH和LH有促进Ghrelin mRNA相对表达量升高的趋势。绵羊卵母细胞Ghrelin mRNA的表达以及在不同培养系统动力学变化,提示了这一新型分子在卵母细胞成熟过程中受激素潜在的调控作用。 相似文献
12.
LH在体外对GnRH脉冲模式的应答 总被引：7，自引：1，他引：6
摘要：[目的]分析哺乳动物LH表达的受体后信号转导机制。［方法］兴奋或抑制GTH细胞内cAMP后,观察LH对高频GnRH脉冲刺激的应答情况。［结果］细胞cAMP含量显著影响LH的应答。［结论］GnRH脉冲频率本身就是一个调控信号,高频GnRH脉冲刺激时,其受体后的信号是通过cAMP-PKA途径转导的,主要引起LHβ的应答。 相似文献
13.
糯玉米淀粉RVA黏度的杂种优势分析 总被引：4，自引：2，他引：2
以糯玉米10个自交系为材料应用p+q+2pq交配设计组配了50个杂种,研究了淀粉RVA的7个黏度性状的杂种优势表现,结果表明,（1）淀粉RVA各性状均存在广泛的变异,其中以回落值的变异最大,最高的杂种达249 cP,最低的仅为122.33 cP;变异最小的是糊化温度,最高的为79.5℃,最低的为76.92℃;（2）所有性状之间的差异均杂种大于亲本,且峰值黏度、沉降值、回落值3个性状杂种平均数高于亲本;（3）沉降值存在显著的超中亲优势,峰值黏度和回落值仅存在极显著的超低亲优势,而谷值黏度、终值黏度、糊化温度和糊化时间均无杂种优势;（4）杂种与双亲淀粉RVA黏度性状之间的关系因性状而异,其中在峰值黏度、谷值黏度、沉降值、回落值四个性状上,杂种与母本、中亲值RVA参数均达到了极显著的正相关,而其余三个性状则因组合的不同而异,相关关系未达显著水平。 相似文献
14.
猪圆环病毒2型和伪狂犬病弱毒疫苗体外共接种对猪外周血单个核细胞调节性细胞因子mRNA表达的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为分析猪圆环病毒2型（PCV2）对伪狂犬病弱毒苗（PRV）免疫反应的影响,用real-time PCR技术检测了仔猪外周血单个核细胞（PBMC）体外单接种和共接种PCV2与PRV后调节性细胞因子IL-4、IL-10、IL-12p40及IFN-γ的mRNA表达水平。结果表明,PRV能引起IL-4、IL-12p40与IFN-γ的mRNA表达上调,PCV2能引起IL-4、IL-10与IL-12p40的mRNA表达上调;而且,PCV2能抑制PRV诱导IL-4、IL-12p40及IFN-γ的mRNA表达上调,其中对IFN-γ mRNA表达的抑制效果最为显著（P<0.05）,提示PCV2可能会对PRV的细胞免疫反应产生不利影响。 相似文献
15.
为了分析大鼠FSH分泌受体后信号转导机制。将GTH细胞用PMA或H7处理后,用GnRH脉冲刺激,再用ELISA法检测其FSH分泌量,并与空白对照组比较。结果表明,PMA能显著提高GTH细胞中PKC活性,H7能显著降低GTH细胞中PKC活性,PMA或H7都不会影响GTH细胞的cAMP含量,GTH细胞PKC活性显著影响FSH的分泌,FSH随着PKC活性的升高而升高,随着cAMP的降低而降低。得出PKC-Ca2+是GnRH脉冲刺激所引起的FSH分泌的受体后的信号转导途径。 相似文献
16.
烟草RAPD反应体系的建立与优化研究 总被引：8，自引：2，他引：6
以烤烟品种为材料,研究了烟草RAPD分析过程中的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq 酶、循环次数、退火温度等,建立了适于烟草RAPD分析的PCR反应体系：即在25μl反应体系中,模板用量为40ng;引物浓度为0.4μM;Mg2+浓度为2.5mM;dNTP浓度为0.2mM;Taq DNA聚合酶用量为1U。扩增程序为94℃预变性5min;然后94℃变性1min,38℃复性1min,72℃延伸1.5min,39个循环;最后72℃延伸5min。 相似文献
17.
水稻纹枯病改良新抗源YSBR1的抗性评价 总被引：13，自引：1，他引：12
从籼粳交后代群体中筛选到一份抗纹枯病水稻新种质YSBR1。多年的大田和温室接种鉴定以及立枯丝核菌毒素对水稻胚根伸长抑制率试验结果均表明,YSBR1的抗性水平极显著高于其他参试品种(系),且稳定、可靠,在大田接种试验中的纹枯病平均病级为2.39±0.23级(按0~9级评价标准),达“抗病”水平。YSBR1的株高为(102±4.32) cm,叶片稍内卷而挺拔,株形优良,生育期适中,在水稻抗纹枯病遗传育种中可有较大研究价值和利用前景。 相似文献
18.
本研究共进行了2个试验。试验Ⅰ,成年布尔山羊在繁殖季节初期经超排处理,平均每只采得有效胚胎17.07枚,2个月后再行重复超排处理,虽有3只羊未能实现采卵,但其它羊只均获成功,其中B组（FSH加量）平均获有效胚胎15.46枚,明显高于A组（FSH未加量,平均每只12.93枚）。试验Ⅱ,选择了2000年超排效果较好的布尔山羊,在2001年和2002年秋季进行了第2次、第3次重复超排处理。结果表明：在生殖器官未发生粘连的情况下,第2次平均获有效胚胎15.83枚,与第1次超排结果（平均15.50枚）相近。第3次超排因两只羊生殖器官粘连未能采卵,其余10只羊平均采得有效胚胎13.40枚。 相似文献
19.
水稻抗纹枯病QTL qSB-9TQ和抗条纹叶枯病基因Stv-bi的聚合育种 总被引：1，自引：0，他引：1
以携带抗纹枯病QTL qSB-9TQ的籼稻品种特青和携带抗条纹叶枯病基因Stv-bi的粳稻品种镇稻88为优良等位基因供体亲本,江苏省推广的粳稻品种武育粳3号和武粳15为受体亲本,分别杂交并连续回交。在回交及自交分离世代,利用开发的覆盖目标基因区间的双侧分子标记对目标基因进行辅助选择。至回交BC4F1世代,同一遗传背景2个回交方向的中选单株间聚合杂交,获得2个目标基因位点均纯合的聚合F3株系。条纹叶枯病抗性鉴定和纹枯病抗性接种鉴定结果表明,聚合株系对条纹叶枯病均表现抗病;以0~9级评级标准评价,聚合株系的纹枯病较相应的轮回亲本分别低1.1~1.6级和0.8~1.4级。结合回交低世代抗性鉴定结果分析,自行开发的分子标记对目标基因的辅助选择是有效的。讨论了抗纹枯病育种及分子标记辅助选择聚合育种的相关问题。 相似文献