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以猪血为原材料,通过硫酸铵盐析和柱层析等方法,分离纯化出2种半胱氨酸蛋白抑制剂激肽原（kininogen）．激肽原Ⅰ的得率为0．7％,纯化倍数为613．7;激肽原Ⅱ的得率为24．1％,纯化倍数为295．7．SDS—PAGE结果表明,激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ的分子质量分别为58ku和116ku．激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ对白鲢鱼（Hypophthalmichthys molitrix ）鱼浆中肌原纤维蛋白降解都有一定的抑制作用,当激肽原Ⅱ添加量为鱼浆质量的0．03％时,可以使鱼糜凝胶强度提高24％．因此,激肽原可作为添加剂有效提高鱼糜制品的凝胶强度． 相似文献
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以苏云金杆菌HD 73伴胞晶体为活性蛋白,经胰蛋白酶酶解后分别用阴离子交换柱分离纯化法和等电点纯化法进行纯化,纯化后得到的样品进行SDS-PAGE分析,结果表明,两种分离纯化都获得67kDa的毒素蛋白,但是离子交换柱纯化法样品消耗量大,得率低;而等电点沉淀法样品消耗少,得率高。 相似文献
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为获得猪圆环病毒Ⅱ型 ORF3编码蛋白,研究该蛋白的特性及功能,根据 GenBank 数据库中PCVⅡ的基因组序列设计引物,利用 PCR 从病料基因组 DNA 中扩增 PCVⅡ河南地方株 ORF3,将其克隆至表达载体 pET 32a 中进行诱导表达,SDS PAGE 电泳检测重组蛋白表达情况,采用 Ni＋NTA 亲和纯化表达产物,透析复性后免疫日本大白兔制备多抗血清,并采用 ELISA 和 Western blot方法检测多抗血清的效价和特异性。结果显示,PCR 扩增获得全长315 bp 的 ORF3,重组质粒经测序和双酶切证实构建正确;SDS PAGE 结果显示,ORF3能够在大肠杆菌中表达,产物的分子量约为30 ku,以包涵体形式存在;纯化的重组蛋白具有较好的抗原性,制备的多抗血清抗体效价达1∶12800以上,抗体特异性高,能与表达的 ORF3编码蛋白结合。成功克隆了 PCVⅡ河南地方株 ORF3并实现原核表达,获得纯化的重组 ORF3编码蛋白。 相似文献
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[目的]从牛脑中分离纯化钙调素(CaM),并进行生化鉴定,同时用碳二亚胺法制备CaM偶联免疫原.[方法]以phenyl-Sepharose层析法从牛脑中分离纯化CaM,用PDE法检测其活性,以SDS-PAGE、PAGE检测其分子量并观察CaM有无Ca~(2+)结合时的电泳行为,检测其紫外扫描光谱,同时用交联剂碳二亚胺制备CaM偶联抗原进行动物免疫,并用间接Elisa法检测动物血清免疫效价.[结果]纯化后的CaM对PDE有明显的激活作用,电泳结果显示为均一条带,分子量约为17.3 kDa,在SDS-PAGE中,CaM结合Ca~(2+)时比未结合Ca2+时迁移率快;而在PAGE中,迁移率在结合Ca~(2+)比未结合Ca~(2+)时慢;紫外光谱扫描显示约在251、260、267、272 和283 nm有5个吸收峰,动物血清免疫效价为1∶800.[结论]用phenyl-Sepharose层析法纯化CaM和用碳二亚胺法制备CaM偶联抗原是成功的. 相似文献
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[目的]为了提高Dotg蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达并获得较高纯度的蛋白。[方法]以pGEX—KG—Dot4重组质粒转化EcoliBL21后,用IPTG诱导重组菌表达GST—Dot4融合蛋白,采用SDS—PAGE及WesternBlot法鉴定表达产物,用GlutathioneSepharose4B亲和层析柱分离纯化。[结果]pGEX—KG—Dot4重组表达载体在大肠杆菌中获得高效表达;经GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得了高纯度的Dot4融合蛋白;WesternBlot表明,该蛋白可与GST标签抗体反应,表明获得了目的蛋白。[结论]在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST—Dot4融合蛋白,为Dot4蛋白的结构、功能及作用机制研究奠定了基础。 相似文献
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[目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coli M15（pQE32／His6-HSF1,pREP4）为材料,用异丙基硫代-β—D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚丙酰胺（SDS．PAGE）电泳分析表达蛋白和纯化蛋白。[结果]试验获得了表达的HSF1,并且进一步获得了纯化的HSF1。[结论]该研究为探讨拟南芥HSF1在基因组的结合位点提供了试验材料,为全面认识HSF1作用机理和生理功能奠定了基础。 相似文献
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以东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense Lu）为材料,经热变性、离心处理,上清液依次经DEAE纤维素阴离子交换层析和苯基．Sepharose CL．4B疏水层析分离纯化钙调蛋白（CaM）．SDS—PAGE和Westem blot检测结果显示：东海原甲藻中CaM的相对分子质量为16ku．采用该实验方法首次有效地从海洋浮游植物东海原甲藻中分离纯化出钙调蛋白． 相似文献
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通过硫酸铵沉淀法提取到疫霉菌的原始毒素。采用甜椒叶片注射法检测毒素的活性。采用两种方法对原始毒素进行纯化,用连续Bio-gel P-100柱层析法纯化能将毒素提至层析纯。在离子交换一分子筛层析法中,原始毒素依次经DEAE52-cellulose→CM32-cellulose→Sephadex G-75柱层析纯化后,经电泳检测为单一条带,说明达到电泳纯。采用SDS—PAGE法测定毒素的分子量为41．9ku。对毒素的组分进行了测定,结果表明毒素中蛋白质含量为70．4％,糖含量为29．6％。毒素经蛋白酶K和胰蛋白酶处理后活性均下降,而用β-葡萄糖苷酶处理后活性变化不大,说明蛋白质亚基在P.capsici毒素活性中起着主要作用。 相似文献
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林蛙皮抗菌肽的提取及其某些特性的测定 总被引：15，自引：2，他引：15
从长白山产林蛙皮肤中分离到具有抗菌活性的蛋白、多肽混合物LPⅠ，经凝胶过滤，进一步分离纯化，获得一种具有抗菌尖性的多肽物质LPⅡ。抑菌试验表明，对于多种革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌以及真菌，LPⅠ具有一定的抑菌作用；LPⅡ具有较中的抗菌作用。SDS－PAGE电泳分析表明：LPⅡ为单一区带，测定其分子量为6．3ku。 相似文献
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以甘蓝型白花油菜及其分离群体为材料,对甘蓝型油菜白花性状的遗传规律进行了研究。结果表明,白花对黄花是一对由不完全显性基因(WW)控制的不完全显性遗传性状;利用集群分离法(BSA)对该白花基因进行RAPD分析,在1 200个随机引物中,获得了引物S1092(5-CCC AGG CTA C-3),在白花基因库和黄花基因库间扩增出多态性产物S-10921250;对该分离群体及其姊妹系和其他白花油菜进行的单株验证表明,S-10921250与甘蓝型油菜白花基因相连锁,遗传距离为0.84 cM。 相似文献
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中国白梨S基因研究——Ⅱ9个主栽品种S基因型的确定及S29-RNase新基因的分离鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
以中国白梨9个品种为实验材料．在分子水平上对其基因组DNA进行了PCR—RFLP系统检测、DNA序列测定及生物信息学分析．鉴定了6个品种的S基因型和3个品种的一个S等位基因．并从天生伏和蜜梨中分离鉴定了一个新的S等位基因,命名为梨Szg-RNase基因．该基因与S13的DNA序列最接近，推导氨基酸序列与S13仅有2个氨基酸序列的差异． 相似文献
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广西花卉产业现状、问题与对策 总被引：1，自引：1，他引：1
花卉业是一项占地少、科技含量高、市场前景好、劳动容量大的产业，与传统农业相比，其经济效益可以成倍甚至几十倍增长。文章论述了广西花卉产业的现状和存在问题，并结合广西的资源优势，提出了进一步发展广西花卉产业的对策：1、加强宏观指导，制订发展规划，突出区域特色；2、实施科技兴花战略，增强科技支撑与保障作用；3、增加投入，建设基地，构建良好的经营模式和服务体系。 相似文献
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李品种的RAPD分析 总被引：3，自引：0，他引：3
从96条S系列RAPD引物中筛选出能稳定扩增并具有多态性的13条引物．对25个李品种进行了RAPD分析．结果表明．只用S17、S459和S1169等3条引物就能鉴别出所供试的25个李品种．利用PopGene软件中的UPGMA方法对供试25个李品种进行分子聚类分析．取LD=0．45．可将这25个李品种分为8类． 相似文献
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硼对棉花~(32)P、~(86)Rb和~(14)C的吸收及其在体内分布的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
在盆栽条件下,采用严重缺硼的灰紫色土为供试土壤,研究硼对棉花~(32)P、~(36)Rb和~(14)c的吸收及其在体内分布的影响。结果表明,~(32)P无论土施、涂叶或茎部浸泡,缺硼棉株各器官中~(32)P的含量均高于施硼棉株,而单株总吸收量则比施硼棉株少。~(32)P的根部吸收或叶部吸收,均不因施硼与否而影响其在体内的分布规律,但~(32)P浸泡茎部则干扰其在棉株中的正常分布。适量施硼增加棉株各器官中~(36)Rb的含量,并促进单株~(36)Rb的吸收,高硼使~(36)Rb吸收受到抑制,但对其在各器官中含量的影响无明显规律,不同硼水平对~(36)Rb在棉株各器官中的分布也无显著影响,施硼可提高棉叶中~(14)C光合产物,并促进这些产物向其它器官转移,苗期转移到根、茎以及蕾期转移到果枝的~(14)C光合产物均比缺硼棉株高。 相似文献
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根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国632株TK基因序列设计并合成1对引物,以ILTV烟台株DNA为模板扩增了TK基因,并对其进行了序列测定。将ILTV烟台株的TK基因和TK蛋白分别与ILTV美国632株,英国T horne株,B e ijing E 2株,BHV-1,EHV-1,EHV-2,FHV-1,HHV-1,HHV-2,HHV-3,HHV-4,HVT,M DV-1,M DV-2,PRV和SHV-2的TK基因和TK蛋白比较后发现,其TK基因的核苷酸和TK蛋白的氨基酸同源性分别为24.6%~99.5%和15.1%~98.9%,表明不同ILTV毒株之间TK基因和TK蛋白相对保守,但与其他α-疱疹病毒的TK基因和TK蛋白同源性则较低。 相似文献