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转基因动植物生物反应器研究进展及应用现状 总被引：1，自引：0，他引：1
转基因动植物作为生物反应器,有完善的真核表达系统,可以为多种外源蛋白提供正确的翻译后修饰,表达具有生物活性的外源蛋白,可以应用于人或动物的疾病治疗及预防,因其具有成本低、产出高、产品珍贵且需求高的特点而具有广阔的商业前景。目前,转基因动植物生物反应器研究领域已经取得多项成果与突破,以此生产的蛋白制品也有部分被权威机构批准上市应用,还有许多未上市的研究成果已经进入临床试验阶段,为产业化发展做准备。动植物生物反应器已成为重组药用蛋白生产的新趋势。综述了转基因植物和转基因动物作为生物反应器生产重组蛋白的研究进展及应用现状,介绍了生物反应器类型、生产的蛋白种类、已获批应用的动植物生物反应器,讨论了利用动植物生物反应器生产外源蛋白的意义及存在的问题,对其研究及应用前景进行展望。 相似文献
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利用植物生物反应器表达抗肿瘤药物,来激发机体产生免疫应答反应已成为当今肿瘤免疫治疗的研究热点之一.在绝大多数动物实验研究中,利用植物生物反应器表达的外源蛋白,比如抗体、抗原、细胞因子等都能诱导机体产生体液免疫和特异性的细胞免疫反应,并且在临床试验中也取得了较好的疗效.综述了利用植物生物反应器表达抗肿瘤药物的研究进展,并... 相似文献
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《中国农业科技导报》2010,(4):67-67
课题内容、目标：
针对当前已分离得到的有机磷降解酶、黄曲霉素解毒酶和N-酰化高丝氨酸内酯降解酶的缺陷,利用基因改组、定点突变、随机突变、蛋白质分子修饰等手段及蛋白质分子设计技术,着重对酶蛋白特性进行分子改良,筛选出具有更加优良特性的蛋白质分子,建立酶蛋白的分子改良和修饰技术的方法体系。进一步构建高效重组生物反应器,研究改良酶的高效发酵技术和酶的后加工技术,实现产业化廉价生产。 相似文献
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植物生物反应器生产口服疫苗的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
随着基因工程技术的快速发展、植物转基因技术的日趋成熟,植物已成为基因重组生物制品的重要表达载体。利用转基因技术构建植物生物反应器生产口服疫苗是目前新兴的研究领域。综述了亚单位抗原在转基因植物中的表达系统、转基因植物生产的重组疫苗、转基因植物疫苗存在的问题及解决方法等,并展望了其研究趋势和应用前景。 相似文献
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利用转基因植物作为生物反应器生产具有重要价值的多肽和蛋白质，包括抗体、疫苗、药用蛋白等较之其他系统具有很多优越性，已经成为当前植物基因工程和药物生物技术领域中的研究热点，着重就这一领域近年来国内外的研究现状、发展趋势、存在的问题及对策进行综述。 相似文献
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为了制备新城疫病毒(NDV)HN蛋白并研究其免疫原性,将优化的HN基因胞外区插入毕赤酵母表达载体pPICZαA中,构建毕赤酵母表达载体pPICZαA-HN,并将其电转入毕赤酵母X-33感受态中,经PCR鉴定得到阳性转化子,甲醇诱导表达后,经SDS-PAGE和Western blot鉴定筛选出目的蛋白表达菌株;通过对诱导剂含量、诱导时间、培养基初始pH值和诱导温度进行优化,研究最佳表达条件;采用镍柱亲和层析对目的蛋白进行纯化,并用SDS-PAGE、Western blot和间接ELISA对目的蛋白进行鉴定;利用去糖基化酶PNGase F对目的蛋白进行处理,验证其糖基化修饰程度。结果显示,HN重组蛋白在毕赤酵母中成功表达,且在28℃条件下,培养基初始pH值为7.0,用0.5%甲醇诱导5 d,蛋白质表达量最高;通过镍柱亲和层析可获得纯度高于90%的重组蛋白;间接ELISA结果表明,重组蛋白活性良好;去糖基化试验验证了重组蛋白存在糖基化修饰。综上,利用毕赤酵母X-33成功表达了HN蛋白,且纯化产物纯度较高、活性良好,具有糖基化修饰。 相似文献
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转基因烟草与生物制药 总被引：5，自引：0，他引：5
利用转基因烟草生产药物最早是由比利时PGS公司的研究人员发现的，他们在研究中意外地发现利用转基因烟草可以生产神经五肽，这开创了转基因烟草作为生物反应器生产药物的先例。一、利用转基因烟草生产药物的研究利用基因工程技术手段，将某些生物制剂的编码基因转育到高等植物中表达，使过去只能在动物或微生物中生产的药物，由植物作为生物反应器（bioreactor）来生产，从而使这类生物制剂的生产变为高产高效，其产品对人类的使用更加安全。利用转基因植物生产出来的重组药用蛋白和肽的优点为：（１）植物容易转化，尤其烟草更易转化；… 相似文献
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无选择标记的植物转基因方法研究技术进展 总被引：1，自引：1，他引：0
植物遗传转化中,标记基因起着非常重要的作用。目前使用的抗性标记基因大多数是抗生素或除草剂抗性基因,其引发的转基因植物安全性问题越来越受重视。笔者综述了近年来发展的各种无选择标记转基因植物方法及其在转基因植物中的应用,主要有共转化法、位点特异性重组系统、转座子系统、同源重组法和多元自主转化载体系统。通过评述各种方法的优缺点,以期推动安全型转基因植物培育和转基因植物产业化进程。 相似文献
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动物乳腺生物反应器拥有巨大的开发价值,利用转基因家畜的乳腺生产人类重组蛋白,可以获得安全而有效的药用蛋白。在此,在阐述乳腺生物反应器概念的基础上,探讨了乳腺生物反应器医用蛋白产品、载体构建以及转基因技术等方面的研究现状,并指出了乳腺生物反应器存在的主要问题,展望了发展前景,特别是指出了利用体细胞克隆技术生产乳腺生物反应器的优势及可能性。 相似文献
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植物基因工程疫苗的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
植物基因工程疫苗是利用植物表达重组抗原蛋白来生产疫苗。作阐述了用转基因植物生产疫苗的基本原理和方法以及植物疫苗的优点，特别是食用疫苗的研究进展、优缺点及其应用前景。 相似文献
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综述了生物反应器在动、植物基因工程中的应用，并从外源基因在动、植物生物反应器中表达的基本方法和遗传机制等方面，比较分析了这两个生物反应器各自的优点和存在的问题，分析了其生产基因工程产品的试验、投放市场的现状及前景。 相似文献
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骨质疏松症严重威胁着人类的健康,鲑鱼降钙素是一种治疗骨质疏松的有效药,但是昂贵的价格限制了它的使用。本研究以生菜作为生物反应器来表达降钙素中生物活性较高的鲑鱼降钙素,以期通过鲜食表达降钙素的生菜达到防止或治疗骨质疏松目的,同时可大大降低生产成本。首先按植物偏爱密码子设计合成了编码鲑鱼降钙素的msCT基因,其次考虑到转基因产品安全性问题,构建植物双元表达载体p35S-2300-twinT—DNA：：pil—msCT：：noster,利用农杆菌介导进行生菜转化。经PCR和Southem blot确认得到了12株独立的转基因植株。同时RT-PCR分析表明鲑鱼降钙素在To代转基因植株中成功表达,而且表达量存在显著差异,为利用植物生物反应器生产治疗用降钙素奠定了基础。 相似文献
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人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体具有特异性诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性的特点,被认为是肿瘤凋亡疗法较有希望的候选药物。植物生物反应器在药用蛋白质生产方面具备较大优势。构建了可溶性人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的植物表达载体,进行本氏烟(Nicotiana benthamiana)瞬时表达,并对目的蛋白的体外活性进行检测。结果显示,本氏烟叶片中目的蛋白平均表达量为68.60 pg/mg TSP;在浓度为200 pg/m L时,对NCI-H460细胞株的抑制率为28.75%。研究表明,经密码子优化的编码基因能够在受体植物中表达出有活性的目的蛋白,为开展目的基因的稳定转化工作奠定了基础。 相似文献
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利用转基因牛生产重组人乳铁蛋白研究 总被引：6，自引：0，他引：6
[目的]研究利用转基因牛生产重组人乳铁蛋白,为利用转基因动物生产药用或食用蛋白提供依据。[方法]对已获得的人乳铁蛋白转基因牛进行人工催乳,用乳成分分析仪分析了转基因对乳汁的影响,并利用放免法检测了重组人乳铁蛋白在转基因牛乳中的表达。[结果]重组人乳铁蛋白在牛乳中获得了高效表达,表达水平为(3.429±0.417)mg/ml。通过转基因牛乳的乳成分分析发现,转基因牛乳与常乳在乳脂、总蛋白、乳糖和干物质的含量上没有明显变化。[结论]重组人乳铁蛋白在转基因牛乳中获得了高效表达,为大规模生产重组人乳铁蛋白奠定了基础。 相似文献
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【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子（VEGF）的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390RVEGF,通过农杆菌菌株EHA105介导将其T-DNA区转入到番茄细胞中,再生后获得转基因番茄植株,对其进行分子和蛋白水平检测。【结果】成功构建了植物整株表达载体p1390R-VEGF,建立了高频的番茄再生培养体系;PCR检测、Southern blot和Western blot检测结果表明,VEGF基因已经转入番茄中,并成功得到了表达。【结论】得到了转基因番茄植株和果实,且VEGF蛋白有良好的抗原性。 相似文献
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Hamilton SR Bobrowicz P Bobrowicz B Davidson RC Li H Mitchell T Nett JH Rausch S Stadheim TA Wischnewski H Wildt S Gerngross TU 《Science (New York, N.Y.)》2003,301(5637):1244-1246
We report the humanization of the glycosylation pathway in the yeast Pichia pastoris to secrete a human glycoprotein with uniform complex N-glycosylation. The process involved eliminating endogenous yeast glycosylation pathways, while properly localizing five active eukaryotic proteins, including mannosidases I and II, N-acetylglucosaminyl transferases I and II, and uridine 5'-diphosphate (UDP)-N-acetylglucosamine transporter. Targeted localization of the enzymes enabled the generation of a synthetic in vivo glycosylation pathway, which produced the complex human N-glycan N-acetylglucosamine2-mannose3-N-acetylglucosamine2 (GlcNAc2Man3GlcNAc2). The ability to generate human glycoproteins with homogeneous N-glycan structures in a fungal host is a step toward producing therapeutic glycoproteins and could become a tool for elucidating the structure-function relation of glycoproteins. 相似文献