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新城疫病毒样颗粒已开发成一种高效递送外源蛋白的载体平台。本研究在小鼠模型中开展了嵌合布鲁菌BCSP31病毒样颗粒(BCSP31-cVLPs)免疫原性及其保护效力评价。体内试验数据表明,BCSP31-cVLPs能有效激活脾脏中树突状细胞,进而促进初始型CD3^+CD4^+ T的活化。ELISA法检测小鼠血清结果表明,BCSP31-cVLPs可刺激机体产生针对重组BCSP31蛋白的特异性抗体水平,且呈剂量依赖性。流式细胞术检测结果显示,BCSP31-cVLPs可激活T细胞并使其分化。攻毒结果表明,BCSP31-cVLPs具有与疫苗株M5相当的免疫保护效力。本研究为新型布鲁菌疫苗的研制提供了数据支撑,并扩展了新城疫病毒样颗粒疫苗载体平台的应用。 相似文献
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《中国兽医学报》2019,(7)
莱姆病是一种经蜱传播的人兽共患病,随着人们经济的发展,伴侣动物的不断出现增加了人与动物经蜱传播莱姆病的风险,而当前并未有治疗莱姆病的有效方法,因此研制莱姆病疫苗成为一大热点。为了更好地预防莱姆病的发生,本研究通过替换新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白(haemagglutinin-neuraminidase protein,HN)胞外域的方式,利用昆虫杆状病毒表达系统分别构建了含伯氏疏螺旋体候选抗原表位外膜蛋白A(outer surface protein A,OspA)、外膜蛋白C(outer surface protein C,OspC)的新城疫病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),形成了含有伯氏疏螺旋体抗原表位的新城疫病毒样颗粒,为之后研制莱姆病疫苗提供了新思路、新想法。 相似文献
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《畜牧与兽医》2017,(6):120-124
为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。 相似文献
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《中国兽医学报》2017,(2):201-205
利用昆虫细胞/杆状病毒表达载体系统,将已构建编码新城疫病毒(NDV)M、F和HN结构基因的3种单顺反子重组杆粒共感染悬浮培养的Sf9细胞以大量制备新城疫病毒样颗粒(ND VLPs)。收集细胞培养上清经超速离心浓缩,蔗糖密度梯度纯化后,利用Western blot检测和透射电镜观察。结果显示,3种目的蛋白均正确表达且组装形成与原病毒粒子形态相似的颗粒,测定其血凝活性效价可达12log2。动物试验结果表明,与LaSota灭活油乳苗相比,将纯化后的病毒样颗粒以含25μg蛋白的剂量或联合佐剂免疫商品蛋鸡后能产生较高水平的HI抗体,且可有效减少攻毒鸡只口咽、泄殖腔途径的排毒时间,从而减少病毒在健康鸡群中的传播感染机会;表明所研制的基因Ⅶ型ND VLPs可作为疫苗候选株具有很大的防控优势。 相似文献
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《中国兽医学报》2019,(9):1721-1727
基于病毒样颗粒生产平台,以绵羊痘病毒P32蛋白为研究靶点,通过GPI锚定策略将P32蛋白锚定至新城疫病毒样颗粒囊膜表面制备嵌合型病毒样颗粒cVLP-P32。透射电镜可见近圆形的病毒粒子上布满纤突,Western blot结果显示各组分蛋白均正确表达。随后以BALB/c小鼠和绵羊为试验动物,评价cVLP-P32的免疫原性,ELISA结果显示cVLP-P32能够诱导小鼠及绵羊产生较高滴度的特异性抗体;流式细胞术分析结果显示,与可溶性GPI-P32蛋白相比,cVLP-P32可诱导小鼠激发更强的CD3~+CD4~+T及CD3~+CD8~+T细胞免疫应答。 相似文献
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新城疫病毒的分子生物学及应用研究进展 总被引：4，自引：0，他引：4
新城疫是当今全球范围内最严重的家禽传染病,特别是对养鸡业可造成重大经济损失。新城疫病毒是一种负链RNA病毒,含有六个主要蛋白,按顺序3′-NP-P-M-F-HN-L-5′排列,其中最主要的糖蛋白是F和HN蛋白,这两个蛋白不仅与病毒的毒力和致病性有关,也是诱导产生保护性抗体的蛋白。许多分子生物学技术已经应用于新城疫的诊断。利用分子生物技术也研究出了很多基因工程疫苗比如基因工程活载体疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等。近年来反向遗传操作技术的发展,新城疫病毒已经被开发成病毒载体,可以携带外源基因研制新城疫病毒活载体疫苗,表达IBDV和IBV的新城疫活载体疫苗已经研制。 相似文献
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《中国家禽》2021,(6)
试验旨在探究以新城疫病毒为载体进行多联疫苗的构建。通过将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和红色荧光蛋白(Ds Red)基因用T2A肽串联后克隆入嵌合新城疫病毒AI4-2FHN的P和M基因之间,获得重组质粒p AI4-2FHN-GRFP。该质粒与p CI-NP、p CI-P和p CI-L 3个辅助质粒共转染至稳定表达T7 RNA聚合酶的BSR细胞后,获得可同时表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的重组新城疫病毒。拯救病毒在SPF鸡胚中繁殖传代,通过RT-PCR验证,并检测重组病毒的生物学活性和外源蛋白的表达效率。结果显示:重组病毒在鸡胚内传3代后,鸡胚尿囊液HA效价稳定在8 log_2,感染细胞24 h、36 h、48 h后在荧光显微镜下观察到EGFP与Ds Red的荧光亮度逐渐增强,且相同时间内红色荧光蛋白与绿色荧光蛋白表达量相似。重组病毒的构建为新城疫病毒作载体用于多联多价疫苗的研发提供了参考。 相似文献
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用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）和家蚕核型多体病毒（ＢｍＮＰＶ）构建的杂合杆状病毒表达了鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｄ２６株的融合（Ｆ）糖蛋白，将编码Ｆ蛋白的基因插入宿主范围扩展的改良杆状病毒表达载体，重组杆状病毒ＨｙＦ１２１感染的草地贪夜蛾（ｓｆ）细胞中，表达的Ｆ蛋白定位于细胞表面，ＨｙＦ１２１感染吞蛹后，用感染蚕蛹制取抗ＮＤＶ的亚单位疫苗，这种亚单位疫苗接种鸡后可抵抗ＮＤＶ强毒的攻击。 相似文献
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（国家禽流感参考实验室）的科研人员选择我国自行培育．免疫效果良好的一株新城疫病毒弱毒疫苗为载体，采用国际先进的反向基因操作技术．经过近四年努力，在国际上首次研制了表达H5亚型高致病力禽流感病毒抗原基因的重组新城疫病毒活载体双价疫苗。 相似文献
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《畜牧兽医科技信息》2006,(1):15
农业部昨天宣布，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（国家禽流感参考实验室）的科研人员选择我国自行培育、免疫效果良好的一株新城疫病毒弱毒疫苗为载体，采用国际先进的反向基因操作技术，经过近四年努力，在国际上首次研制了表达H5亚型高致病力禽流感病毒抗原基因的重组新城疫病毒活载体双价疫苗。 相似文献
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新城疫是当今全球范围内最严重的家禽传染病之一,特别是对养鸡业造成重大经济损失。利用分子生物技术已研究出了很多基因工程疫苗用于预防鸡新城疫,比如基因工程活载体疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等。近年来随着反向遗传操作技术的发展,新城疫病毒已经被开发成病毒载体,可以携带外源基因研制新城疫病毒活载体疫苗,表达IBDV和IBV的新城疫活载体疫苗已经成功研制。本文将从新城疫病毒的分子生物学及疫苗方面进行综述。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征是当前危害世界养猪业最重要的传染病之一,可引起母猪的繁殖障碍和各种年龄的猪呼吸道相关疾病。目前,主要采用灭活疫苗和活疫苗来防控该病。由病毒一种或多种结构蛋白自行组装而成的病毒样颗粒,不含病毒基因组,不能复制、不具有感染能力。病毒样颗粒具有和真正病毒相似的结构,它们呈递免疫细胞的途径相同,刺激机体产生免疫应答,目前,已经研制了多种人和动物病毒的病毒样颗粒疫苗。论文就病毒样颗粒的特点及猪繁殖与呼吸综合征疫苗的研究现状做以综述,为研究和制备猪繁殖与呼吸综合征新型病毒样颗粒疫苗提供参考。 相似文献
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新华网北京10月14日电（记者董峻）农业部14日宣布，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（国家禽流感参考实验室）的科研人员选择我国自行培育、免疫效果良好的一株新城疫病毒弱毒疫苗为载体，采用国际先进的反向基因操作技术，经过近四年努力，在国际上首次研制了表达H5亚型高致病力禽流感病毒抗原基因的重组新城疫病毒活载体双价疫苗。 相似文献
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<正>1非典型新城疫造成的原因新城疫病毒侵入机体咽喉部位定居和繁殖。根据机体与新城疫病毒之间力量对比,可表现为免疫、隐性感染、发病和死亡,隐性感染的鸡可不表现症状但排毒。鸡新城疫的临床表现决定于新城疫病毒的毒力和机体的免疫状态。当新城疫病毒强毒遭到免疫力降低的鸡群或新城疫病毒中毒遇到无免疫力的鸡群时表现非典型新城疫。 相似文献