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1.
用RAPD技术对5种经济海胆基因组DNA多态性的研究 总被引：10，自引：0，他引：10
利用随机扩增多态DNA技术对紫海胆(Anthocidaris crassispina)、海刺猬(Glyptocidaris crenularis)、马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)、光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)等我国最主要的5种经济类海胆基因组DNA的多态性进行初步研究一经20个随机引物扩增,共得到377条扩增片段．片段长度为200～1600bp。根据片段的共享度计算出平均遗传距离并采用CPTGMA和NJ两种聚类分析方法进行处理得到系统树。从聚类图得知长海胆科与疣海胆科有较近的亲缘关系,球海胆科的光棘球海胆与中间球海胆有较近的亲缘关系,其次是马粪海胆。本研究还讨沦了RAPD技术在海胆的遗传学研究中的广阔应用前景以及从分子生物学方法上为海胆传统分类方法提供科学依据。 相似文献
2.
5种经济海胆线粒体16SrRNA基因片段的序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
对光棘球海胆、中间球海胆、马粪海胆,海刺猬和紫海胆线粒体DNA 16SrRNA基因片段进行了PCR扩增和测序,得到395 bp的可信片段。通过ClustalX 1.83和Mega 3.0软件对所得线粒体16SrRNA片段序列进行比较,共检测到118个碱基变异,其中简约信息位点为33个。应用Mega 3.0计算各种间的相对遗传距离,以糙海参为外类群,得到NJ系统树和MP系统树,系统树各分支的置信度由“Bootstrap”1000次循环检验。结果表明,马粪海胆与光棘球海胆的亲缘关系较近,其次为中间球海胆,而紫海胆、海刺猬与这3种海胆的关系相对较远。 相似文献
3.
四种海胆杂交的可行性及子代的早期发育 总被引：18，自引：0，他引：18
报道了中国北部沿海马粪海胆、海刺猬、光棘球海胆三种主要海胆与引自日本的中间球海胆四种海胆之间的不同组合的杂交试验及其子代浮游幼体及幼海胆的早期生长发育.结果表明,采用生殖调控可使不同海胆达到同步繁殖,在8～24℃下各种海胆杂交组合的受精率与亲本亲缘关系有关,同时受到双亲繁殖适宜温度的影响,受精率介于0～69.6%之间,均低于自交组.以马粪海胆和海刺猬为亲本的正反交、以马粪海胆和中间球海胆为亲本的正反交以及马粪海胆()×光棘球海胆()各组杂交胚胎均可发育至四腕幼虫,但畸形率较高,浮游时间比自交组延长3～10d,在其中的3个杂交组得到了幼海胆,经过14个月的室内培育,杂交组成活率低于自交组,壳直径达2.59～2.88cin. 相似文献
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《中国渔业质量与标准》2018,(3)
以中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)为研究对象,探讨饲料中不同水平(0.0、0.5%、1.0%和2.0%饲料干物质)的花生四烯酸(arachidonic acid,ARA)对其存活、生长和肠道菌群组成的影响。饲料中添加或不添加ARA饲喂56 d后统计12个网笼海胆的存活数量及体重变化,随后每个网笼随机选取10只海胆,无菌收集肠道内容物进行高通量测序分析肠道菌群组成。结果表明:饲料中不同含量水平的ARA对海胆的成活率无显著影响(P0.05),但随着饲料中ARA添加量的升高,海胆的增重率先升后降。当饲料中添加1.0%ARA时,海胆增重率最高,且显著高于空白组和0.5%添加组(P0.05),但与2.0%添加组差异不显著(P0.05)。高通测序发现:肠道菌群的多样性和门水平的丰度差异不显著(P0.05),但属水平的丰度差异显著(P0.05)。各饲料处理组海胆肠道中变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)的丰度均较高;随着饲料中ARA水平的升高,海胆肠道中变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)有升高的趋势(P0.05),弧菌属(Vibrio)和(Lutibacter)的丰度显著升高(P0.05);而厚壁菌门(Firmicutes)和软壁菌门(Tenericutes)则下降,但不显著(P0.05);芽孢杆菌属(Bacillus)和(Candidatus Hepatoplasma)的丰度显著降低(P0.05)。因此,尽管饲料中添加ARA不影响中间球海胆的成活率,但饲料中添加1.0%~2.0%ARA较低添加量能够显著提高海胆的生长速率,且添加不同水平的ARA均显著影响了海胆肠道菌群组成,这不仅有助于明确ARA添加对中间球海胆存活、生长和肠道菌群组成的影响,也为开发适合海胆的微生态制剂提供了理论依据。 相似文献
5.
为研究不同月龄光棘球海胆（Strongylocentrotus nudus）形态性状对体质量的影响，测量了100只6月龄和74只18月龄的光棘球海胆的壳径（SL）、壳高（SH）和体质量（TW），用相关分析、通径分析统计分析各性状间的相关性。结果表明，两个不同月龄光棘球海胆各性状间均呈极显著正相关（P<0.01）,6月龄海胆SL与TW之间相关系数为0.965,18月龄海胆SL与TW之间相关系数为0.961,6月龄和18月龄海胆的SL对TW的直接作用分别为0.741和0.598均高于SH对TW的直接作用（分别为0.237和0.389）。随着月龄增加，SH对TW的直接作用呈上升趋势。SL、SH与TW的回归方程为：6月龄TW=-0.513+0.076SL+0.046SH;18月龄TW=-15.885+0.614SL+0.589SH。本研究结果可为光棘球海胆的选择育种提供参考。 相似文献
6.
球海胆属（Sh。楷叫优。ntrotu抓9海胆世界上共有十几种,光棘球海胆（S.n。;d u s）和中间球海胆（S.fll。。。。巾l。）是我国北方主要的经济品种,其营养价值和经济价值高,国际市场需求量大,开展海胆人工育苗和增养殖是海胆产业可持续发展的重要举措。而掌握其胚胎和幼虫生长发育的区别,不仪对苗种生产有帮助,而且对海胆资源的保护利用十分有利。 1卵及胚胎 光棘球海胆的卵径为106 pITI左右,黄色;中间球海胆90 pill左右,橙色,其卵径比光棘球诲胆小一点。受精膜举起后,光棘球海胆的卵径为 相似文献
7.
提取成熟光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)性腺中的RNA做模板,根据NCBI数据库中已知海胆(编号:AB097218、AB192414、AY090112)主要卵黄蛋白MYP cDNA保守序列设计引物,用LA PCR方式分段扩增并测序得到了光棘球海胆MYP cDNA的全序列。扩增的cDNA全长4 061 bp,包含4 047 bp的开放阅读框,共编码1 349个氨基酸。用CluxtalX1.83对光棘球海胆与其他几种已知海胆MYP cDNA及推导的氨基酸序列进行比对,用Mega3.01计算遗传距离及构建进化树,结果表明,光棘球海胆与其他7种海胆的MYP具有高度的同源性。从氨基酸水平上看,光棘球海胆与红海胆(Pseudocentrotus depressus)亲缘关系最近,遗传距离为0.069±0.01;与同科的马粪海胆(Hemicentrotus pulcher-rimus)、紫球海胆(S.purpuratus)、中间球海胆(S.intermedius)的遗传距离分别是0.095±0.012、0.098±0.011和0.101±0.012;与白棘三列海胆(Tripneustes gratilla)、拟球海胆(Paracentrotus lividus)及绿海胆(Lytechinus variega-tus)亲缘关系相对较远,遗传距离分别是0.216±0.017、0.218±0.017和0.535±0.028。获得光棘球海胆MYP cDNA序列可为进一步研究MYP基因的功能和系统的进化分析奠定基础 相似文献
8.
本研究通过人工抽离中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)体质量10%的体腔液诱导体腔细胞的修复更新,分组测定6、12、18和24 h后海胆围脏腔内的体腔细胞密度,分析体腔细胞的修复规律;同时,取各时间点海胆的中轴器进行组织学观察,并利用鼠抗人Ki-67(细胞增殖抗原)单克隆抗体检测中轴器内的细胞增殖信号。结果显示,人工抽离体腔液后6 h,体腔细胞密度与初始密度相比明显偏低;12 h后逐步升高,密度略低于初始密度,恢复度为(92.78±29.40)%;18 h后已明显高于初始密度,恢复度为(137.08±32.40)%,显著高于6 h和12 h的恢复度(P<0.05),随后,体腔细胞密度逐渐降低。海胆损失体腔液后,中轴器表现为内部组织消减、空腔化,外壁上皮细胞层崩解、脱离,凸起结构空泡化等变化,18 h后内部疏松组织略有增加,24 h后中央腔内出现明显的新生组织。利用Ki-67单克隆抗体检测发现,正常海胆中轴器内具有一定的细胞增殖信号,该信号在损失体腔细胞18 h后明显增强。结果表明,损失体腔细胞后,中间球海胆可启动快速恢复机制,而海胆的中轴器发生明显的组织结构变化,组织内的细胞增殖活动也明显增强。研究结果可为海胆体腔细胞的造血组织与发生机制研究提供依据。 相似文献
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腐皮综合征是近年来刺参养殖最重要的疾病,导致刺参大批死亡和惨重的经济损失。以其主要致病原灿烂弧菌（Vibrio splendidus）DNA为模板,PCR扩增出16s-23s间隔区序列,将该片段克隆进pMD19-T Vector,转化大肠杆菌DH5a,获得重组质粒转化菌并进行测序。根据序列、设计引物,合成177bp的地高辛标记DNA探针。该探针对灿烂弧菌的DNA呈现特异性,而对其它细菌Vibrio fluvialis、Vibrio anguillarum、Vibrio alginolyticus、Aeromonas hydrophila、Vibrio harveyi、Vibrio parahaemolyticus、Vibrio vulnificus的核酸均呈阴性;探针对灿烂弧菌DNA的检出极限为6.25pg, 具有较高敏感度。应用该探针对人工感染以及从青岛、烟台、威海获取的腐皮综合征发病海参和养殖水体进行斑点杂交探针检测,其检出率均为100%。研究结果表明,该探针具有良好的特异性和敏感性,可成功用于快速检测养殖刺参“腐皮综合征”重要病原灿烂弧菌。该方法应用于刺参腐皮综合征的检测尚属首次,它将为刺参腐皮综合征的快速诊断、疾病防治和养殖生产提供技术支撑和参考。 相似文献
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虾夷马粪海胆（Strongylocentrotus intermedius）又称虾夷马粪球海胆、中间球海胆,隶属于棘皮动物门、海胆纲、正形目,球海胆科,原产于日本北海道和青森县沿海． 相似文献
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海胆（Seaurchin）为无脊椎动物，属棘皮动物门、海胆纲、正球目、球海胆科的一个种类，具有养殖不易发病，饵料来源广，成本低，生长速度快，经济效益高等特点。全世界约有８５０余种，我国已发现１０２种，绝大多数的海胆都不能食用，只有少数正形海胆可食用，种类有：虾夷马粪海胆（Hemicentrotuspulcherrimus），光棘球海胆（Strongylocentrotusnudues），紫海胆（Anthocidariscras－sispina），白棘三列海胆（Tripneustesgratilla）等。一、海胆的养殖前景海胆是名贵的海珍品，生殖腺可鲜食，也可加工成海胆酱、盐渍海胆、盐渍海胆黄… 相似文献
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以中国主要经济海胆马粪海胆(Hemicentrotus Pulcherrimus)、虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus intermedius)、光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)、紫海胆(Anthocidaris crassispina)以及杂交种海胆-马粪海胆(♀)×虾夷马粪海胆(♂)、虾夷马粪海胆(♀)×光棘球海胆(♂)、马粪海胆(♀)×紫海胆(♂)和紫海胆(♀)×光棘球海胆(♂)为对象,进行海胆的血细胞及体液中酶活力的研究。结果表明,海胆血细胞可分为4类,分别为色素细胞、纤毛游走细胞、变形吞噬细胞和无色球形细胞,比例分别为4.56%~10.96%、9.69%~12.18%、76.40%~85.36%和0.35%~1.03%;海胆血细胞体外有凝聚和吞噬现象。不同种海胆体液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(LSZ)的酶活力测定结果显示,紫海胆血清中各种酶的活性都较高,其中碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性在6种海胆中都是最高的,分别为2.871 U/mg和182.149 U/mL。马粪海胆(♀)×虾夷马粪海胆(♂)的溶菌酶活性最高,为0.085 U/mL;虾夷马粪海胆(♀)×光棘球海胆(♂)的酸性磷酸酶活性最高,为1.070 U/mg,但差异均不显著(P>0.05)。[中国水产科学,2006,13(1):33-38] 相似文献
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对中间球海胆（♀）与光棘球海胆（♂）杂交F1代的生殖腺特征进行了研究，并与母本中间球海胆进行了比较。试验结果表明，中间球海胆的生殖腺颜色一般呈橙色或橘黄色（不同发育时期有所不同），结构致密；杂交海胆中有约90％表现为橙色和橘黄色，约10％呈黄色和浅棕色，约20％的个体生殖腺结构疏松，且和发育周期及色泽无关。杂交海胆的生殖腺指数与中间球海胆的变化基本一致，并且雌雄个体差别不明显。杂交海胆在生殖腺发育的整个过程中，生殖腺指数虽然也出现周期性的变化，但组织切片观察发现杂交海胆生殖腺发育不能象母本一样有明显分期，只有个别雌性个体能产生成熟卵细胞，雄性个体未见成熟精子。 相似文献
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中间球海胆(♀)×光棘球海胆(♂)F1代的生殖腺特征 总被引：2，自引：1，他引：2
对中间球海胆(♀)与光棘球海胆(♂)杂交F1代的生殖腺特征进行了研究,并与母本中间球海胆进行了比较。试验结果表明,中间球海胆的生殖腺颜色一般呈橙色或橘黄色(不同发育时期有所不同),结构致密;杂交海胆中有约90%表现为橙色和橘黄色,约10%呈黄色和浅棕色,约20%的个体生殖腺结构疏松,且和发育周期及色泽无关。杂交海胆的生殖腺指数与中间球海胆的变化基本一致,并且雌雄个体差别不明显。杂交海胆在生殖腺发育的整个过程中,生殖腺指数虽然也出现周期性的变化,但组织切片观察发现杂交海胆生殖腺发育不能象母本一样有明显分期,只有个别雌性个体能产生成熟卵细胞,雄性个体未见成熟精子。 相似文献
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三种海胆性腺总脂的脂肪酸组成的研究 总被引：8，自引：1，他引：7
本文采用了ＦＦＡＰ石英毛细和气相色谱柱,对光棘球海胆,虾夷马粪海胆及海刺猬的性腺中总脂的脂肪酸组成进行了研究。结果表明这几种海胆含有四十种以上的脂肪酸,分布十分相似。主要的ＨＵＦＡ为１８：４ｎ－３（３．２％－７．４）,２０：４ｎ－６（６．４％－１６．７％）及２０：５ｎ－３（６．６％－１２．１％）,并含有非常罕见的ｎ－５及ｎ－７烯酸。 相似文献
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以养殖刺参“腐皮综合征”的重要致病菌——灿烂弧菌Vibrio splendidus的16S~23S间隔区序列,设计特异性引物,用PCR方法制备地高辛(DIG)标记探针,建立了原位杂交技术检测感染刺参体内灿烂弧菌的技术方法,并利用该方法对人工感染刺参和健康刺参各组织进行检测。结果显示,感染刺参的体壁结缔组织、肌肉组织、肠粘膜上皮、辐水管等组织的原位杂交检测呈阳性,而与健康刺参组织无交叉反应。在感染组织中,阳性信号（显色）强弱清晰,能准确反映出灿烂弧菌的侵染部位及感染程度,这为探明灿烂弧菌的感染途径、感染病程等致病机理研究奠定了基础,也为养殖刺参疾病预防和健康管理提供了技术支撑。 相似文献
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对用“腐皮综合症”致病菌灿烂弧菌（Vibrio splendidus）感染刺参的7个体腔液指标进行了测定。结果显示：1）抗病刺参和易感刺参体腔液吸光值和颗粒细胞浓度在第10天差异显著（P〈0．05）。2）抗病刺参和易感刺参总细胞浓度和透明细胞一淋巴样细胞浓度在第5天差异显著（P〈0．05）。3）抗病刺参体腔液碱性磷酸酶活力在试验各天均保持较高水平,且在第10天与易感刺参有显著差异（P〈0．05）;易感刺参体腔液酸性磷酸酶活力在第5天明显高于抗病刺参（P〈0．05）,之后各天迅速降低,并显著低于抗病刺参（P〈0．05）。4）抗病刺参和对照组刺参超氧化物歧化酶活力各天始终无显著蒡异（P〉0．05）．抗病刺参和易感刺参在第10天蒡异昂著（P〈0．05）． 相似文献
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中间球海胆乳酸脱氢酶基因克隆及其对海水酸化的响应 总被引：1，自引：0，他引：1
为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总LDH活性的变化情况。结果显示:①SiLDH基因的cDNA全长为1 499 bp,包含133 bp的5′非编码区,349 bp的3′非编码区和1 017 bp编码338个氨基酸的开放阅读框(ORF)。SiLDH编码蛋白的相对分子量为36.40 ku,理论等电点为6.55,属于无信号肽的非跨膜、温和疏水蛋白。②生物信息学分析显示,SiLDH蛋白序列与紫球海胆LDH X4蛋白序列一致性最高(90.88%)。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,SiLDH基因在检测的4种组织中均有表达,相对表达量从高到低为性腺管足肠体腔液;总LDH活性检测显示,中间球海胆总LDH活性从高到低为性腺管足体腔液肠;④海水酸化处理60 d后发现,与自然海水组(pH 8.06±0.01)相比,SiLDH基因在中间球海胆性腺、管足和肠道中呈现总体降低趋势,在体腔液中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势;总LDH活性在性腺、管足和体腔液中呈现随海水pH降低而降低的趋势,在肠道中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势。研究表明,中间球海胆面对海水酸化时可能通过调节SiLDH基因的表达和LDH活性来缓解海水酸化带来的负面影响。 相似文献