TALEN 技术研究进展     

严爱芬  刘婉霞  刘芳  唐冬生 《广东农业科学》2015,42(23):145-151

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基因编辑新技术研究进展     

《亚热带农业研究》2013,(4)

基因编辑是一项旨在对基因组进行定点修饰的新技术,目前主要有人工核酸酶介导的锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和RNA引导的CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas RGNs)技术。它们都能特异性地识别靶位点,对其单链或双链进行精准切割后,由细胞内源性的修复机制来完成对靶标基因的敲除和替换。本文比较了这3种基因编辑技术,并对其应用进展做了介绍。  相似文献   

核酸酶P1高产菌选育及酶学特性研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

陈信波  罗泽民 《湖南农业大学学报(自然科学版)》1995,21(4):382-385

采用紫外线诱变方法选育到一株高活力核酸酶Ｐ１产生菌，其酶活可达５００ｕ／ｍＬ，该菌株最适培养条件为２８￣３０℃下培养３￣４ｄ。粗酶液的贮存稳定性好，在４℃可贮存４个月仍保留８０％的活性，该酶在６０℃以下，ｐＨ５￣８条件下稳定。其最适作用条件为底物浓度１％，ｐＨ６．５￣７．０，反应温度７０℃下降解２ｈ，其ＲＮＡ降解率和５－核苷酸生成率分别可达９０％和８０％。  相似文献   

印度水牛瘤胃内容物细胞外核酸酶的提取及其特性     

李英爱 《延边农学院学报》1992,14(1):62-66

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转基因猪研究新进展     

孙武  娜日苏 《安徽农业科学》2014,(15):4650-4652,4655

由于猪既是重要的经济动物,又是常用的实验动物,并且因为其解剖、组织、生理和营养代谢等方面与人类相似,因此转基因猪的研究意义重大。纵观转基因猪的发展历史,关键核心技术包括显微注射技术、体细胞核移植技术、精子载体技术、胚胎干细胞介导技术、病毒转染技术、基因打靶、ZFN技术和TALENS技术。科学家们通过这些技术对猪进行了大量研究,已经在生命科学领域取得了令人欣慰的成就。  相似文献   

绿豆核酸酶的提取及活力测定     

胡敏  赵晓菊  张奕婷  樊雪  李旭 《安徽农业科学》2018,46(2):149-151,154

[目的]优化绿豆核酸酶的提取条件并测定其活力。[方法]利用单因素和正交试验,考察提取时间、料液比、p H、芽长几个因素对从绿豆芽中提取核酸酶的影响,优选出各影响因素的最佳水平,并进行活力测定。[结果]提取时间20 h,料液比1∶12(g∶m L),p H 3.0,芽长是绿豆长的4倍时,绿豆核酸酶酶活最高为478.86 U/m L。影响绿豆核酸酶提取的因素主次顺序依次为提取时间、p H、料液比、芽长。采用饱和度为80%的硫酸铵盐析沉淀后,酶活达1 569.6 U/m L,较提纯前提高了2.28倍。[结论]该研究可为核酸酶的开发利用提供参考。  相似文献   

基因组编辑技术在植物中的应用研究进展     

潘志文  高洁儿  陈伟庭  周峰  姚涓  姜大刚 《贵州农业科学》2020,48(12):16-20

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小麦返白系叶片核酸含量及核酸酶活性研究   总被引：5，自引：0，他引：5       下载免费PDF全文

杨莉  郭蔼光  汪沛洪 《西北农业学报》2001,10(2):32-35

测定了小麦返白系和对照矮变 1号的全卷叶、半卷叶和初展叶中核酸含量及核酸酶活性在返白过程的变化。结果表明 ,在返白过程中返白系各叶龄叶片 DNA和 RNA含量均不程度地降低 ,复绿时又迅速增高 ,其 DNA水解酶 ( DNase)和 RNA水解酶 ( RNase)活性变化趋势与之相反 ,且叶片愈幼嫩变化幅度愈显著 ;分析显示 ,核酸含量的降低与核酸水解酶活性的升高有关 ,也与返白过程叶绿体结构破坏有关  相似文献   

Establishment of Ecotilling for Discovery of DNA Polymorphisms in Brassica rapa Natural Population   总被引：3，自引：0，他引：3  

WU Jian SUN Ri-fei ZHANG Yan-guo WANG Xiao-wu 《中国农业科学(英文版)》2005,4(9):654-659

Ecotilling is a new approach based on enzyme-mediated heteroduplex cleavage to discover DNA polymorphisms in natural population. We used mung bean nuclease（MBN） instead of routinely used CELI to cleave single base pair mismatches in heteroduplex DNA templates. Nested set of primers were designed to amplify targeted region to avoid the influence of the variation in quality and quantity of the genomic DNA. To reduce the costs in fluorescently labeled primers, we added M13 adapter to 5＇end of gene specific primers to make IRD dye labeled M13 forward and reverse primers possibly universal for different genes. A Brassica rapa ZIP gene homologue was subjected to the analysis to practise the feasibility of the method in polymorphisms detection. Our experiment showed this method is efficient in discovering DNA polymorphisms in Brassica rapa natural population.  相似文献   

巨核酸酶I-SceI转基因元件的构建及其在斑马鱼中转基因效率的评估     

孙成飞  董浚键  田园园  余嘉欣  叶星 《上海海洋大学学报》2015,24(5):650-655

巨核酸酶I-SceI是由酿酒酵母线粒体中的核糖体大亚基上的I型内含子编码的一种核酸内切酶,近年已被应用于转基因研究中。I-SceI介导的转基因大多是将I-SceI蛋白和带有其识别位点的质粒共注射于动物的受精卵,但注射酶蛋白前期处理耗时长且工作量大,直接用I-SceI的mRNA代替蛋白进行注射可更为简捷。本研究应用I-SceI mRNA介导荧光蛋白基因在斑马鱼中的转植,进一步了解其转基因效率。首先设计合成带有巨核酸酶I-SceI编码序列的辅助质粒,pCS2-I-SceI,并分别构建了带有巨核酸酶I-SceI识别位点、EF1α启动子和荧光蛋白基因（eGFP/RFP）编码序列的供体质粒pI-SceI-EF1α-eGFP/RFP。辅助质粒pCS2-I-SceI体外转录成mRNA, 以50ng/μl供体质粒和100ng/μl的I-SceI巨核酸酶mRNA共注射到斑马鱼（Danio ririo）受精卵中,注射后48 h时的斑马鱼eGFP的平均荧光表达率可达75.86%。在斑马鱼的头部、躯干到尾部均可观察到荧光蛋白的表达,且随着胚胎发育,荧光信号逐渐增强。结果表明I-SceI系统在斑马鱼中可介导较高效率的转植,具有在经济鱼类转基因研究中应用的潜力。  相似文献