改良CTAB法从采后荔枝（Litchi chinensis Sonn.）果皮中提取总RNA   总被引：13，自引：0，他引：13  

王家保  徐碧玉  杜中军  赖建勋  金志强 《农业生物技术学报》2006,14(6):998-999

成熟荔枝果实的果皮中多酚、花色素苷、多糖、蛋白质等物质含量较高。内源RNAase活性也上升，使得从中提取高质量RNA较为困难。丁晓东0999）、张以顺等（2004）曾分别探索了从荔枝果实组织中提取总RNA的方法。但用这些方法都不能从荔枝果皮中得到高产率或高质量的总RNA。在综合比较多种方法的基础上。本实验对CTAB法（山蓝等，2002）作了改良．成功地从采后荔枝果皮中提取了可用于反转录的RNA。  相似文献   

四种类型竹种竹叶总RNA提取方法的比较研究     

马迎春  王曙光  詹卉  于丽霞  杨德佳  高若天  李娟 《核农学报》2024,(2):256-264

为探索适合不同类型竹种竹叶总RNA的提取方法,本研究选取合轴丛生型竹种勃氏甜龙竹、合轴散生型竹种云南箭竹、单轴散生型竹种毛竹、复轴混生型竹种巴山木竹为代表,提取其心叶的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,利用超微量紫外分光系统检测RNA的纯度和浓度,比较自配TRIzol试剂法、商品化TRIzon试剂法、RNA提取试剂盒法、改良十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法四种方法提取的竹叶总RNA的质量、纯度和提取成本的差异。结果表明,自配TRIzol试剂法可以提取出质量好、浓度高的竹叶总RNA,且提取成本较低;商品化TRIzon试剂法提取的总RNA质量及浓度仅次于自配TRIzol试剂法,提取成本稍高;而RNA提取试剂盒法和改良CTAB法无法提取出高浓度的竹叶总RNA。本研究结果为竹类植物更深入的分子生物学研究提供了一定的基础,并为其他竹类植物总RNA的提取提供了参考依据。  相似文献   

梨花柱RNA提取方法   总被引：4，自引：1，他引：4  

徐义流  张绍铃 《农业生物技术学报》2004,12(6):737-738

在一步法和酚-SDS法两种最基本方法的基础上进行了许多改进，成功地从多种植物的叶、根等组织中提取出高质量的RNA。然而，不同植物种类、同一植物不同组织、甚至不同基因型植物的同一组织RNA的提取方法都可能存在差异。我们应用这些方法也未能从自交不亲和性(self-incompatibility，SI)梨花柱中获得可用于进一步实验的RNA。本实验从富含RNase和酚类化合物的组织中提取RNA，探讨简便和有效的总RNA提取方法，为深入开展相关研究奠定基础。  相似文献   

山药组织总RNA提取方法的比较与分析     

覃芳  ;王军民  ;何海旺  ;何龙飞  ;李创珍  ;韦本辉  ;何虎翼  ;甘秀芹 《广西农业生物科学》2009,(4):755-759

采用异硫氰酸胍一巯基乙醇联合变性法、Trizol法和CTAB—LiCl法等3种方法,分别对山药叶片和块茎进行总RNA提取效果进行了比较。结果表明,Trizol法难以提取RNA,异硫氰酸胍-巯基乙醇联合变性法提取RNA效果不理想,存在DNA污染,这2种方法不适合于富含多糖类物质的山药组织总RNA的提取;CTAB-LiCl法提取叶片和块茎组织总RNA质量高、完整性好、成功率高,可作为山药类植物总RNA提取的首选方法。  相似文献   

葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究     

牛建新  陈萍  李西平  马兵钢  鲁晓燕 《农业工程学报》2004,20(Z1):100-103

以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法.建立了GLRaVⅢRT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaV RT-PCR的优化体系.  相似文献   

谷子种子高质量总RNA提取方法的优化     

王金荣  许冰霞  尹美强  温银元 《核农学报》2020,34(4):729-734

为得到高质量的谷子种子RNA,本研究以5个不同谷子品种为材料,对RNAiso Plus法、改良RNAiso Plus法、CTAB法提取的RNA进行质量和纯度的比较。结果表明,改良RNAiso Plus法提取的总RNA完整性、纯度、浓度均优于其他2种方法提取的总RNA,5个不同谷子品种和不同萌发时期的谷子均可用改良RNAiso Plus法提取出高质量、完整性好的RNA,所得RNA产物可用于构建cDNA文库和转录组测序等后续试验。本研究为禾谷类植物种子的总RNA提取提供了一定的参考,也为谷子种子后续的分子生物学试验奠定了基础。  相似文献   

四种副溶血弧菌总RNA提取方法的比较     

陈星  潘迎捷  孙晓红  赵勇 《广西农业生物科学》2009,(6):1177-1182

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种革兰氏阴性嗜盐菌。提取高质量的RNA是研究副溶血弧毒力基因表达与其致病性和环境适应性的基础。本研究分别用SDS法、Trizol法,PureLinkTM RNA Mini Kit和Uniq-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒提取六株副溶血弧菌的总RNA,用普通琼脂糖凝胶电泳和核酸测定仪检测RNA的质量,并用RT-PCR法对四种提取方法进行比较。研究结果表明,Trizol法和Pure-LinkTM RNA Mini Kit简单快捷,提取的总RNA完整性好,纯度高,可用于后续实验的分子生物学研究;而Trizol法更适用于普通实验室细菌RNA的提取。  相似文献   

改良Trizol试剂法提取番茄成熟叶总RNA探究     

陈心语 《南方农业》2018,(2)

Trizol法是一种简单有效的总RNA提取方法,但在抽提总RNA的过程中,RNA又会受RNase的影响而降解。基于此,以番茄成熟叶为材料,对传统的Trizol试剂法进行了改良,利用nanodrop微量分光光度计及普通琼脂糖凝胶电泳技术对总RNA的浓度和完整性进行了检测。结果表明改良Trizol试剂法提取的总RNA经微量分光光度计测定A260/A280值为1.9;电泳显示28S、18S和5S RNA三条带清晰可见。这些结果说明经改良Trizol试剂法提取的番茄成熟叶总RNA,纯度及质量均达到理想状态,能用于后续分子生物学实验。  相似文献   

胡枝子高质量RNA的提取及ALMT基因片段的克隆和表达分析     

陈志长  赵学强  沈仁芳 《土壤》2011,43(3):433-438

针对木本植物胡枝子组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,采用改良的CTAB法,成功地从胡枝子组织中提取了总RNA。所提取的胡枝子总RNA OD260/OD280值介于1.9~2.1之间,产率介于100~250μg/g之间。采用该方法提取的胡枝子总RNA,经过RT-PCR成功地克隆到了胡枝子ALMT基因片段,克隆得到的胡枝子ALMT基因片段序列与已知ALMT基因序列之间具有较高同源性,经半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR表达分析,证明该基因在根中表达且受铝诱导。试验结果表明利用改良的CTAB法提取的胡枝子总RNA样品质量较高,能够用于基因的半定量和定量表达分析。  相似文献   

甘蔗茎RNA提取方法的比较     

王爱勤  范业赓  赵晓艳  何龙飞  黄荣韶  杨丽涛  李杨瑞 《广西农业生物科学》2007,26(2):175-178

以甘蔗茎为材料,分别用异硫氰酸胍法与Trizol提取法,比较从蔗汁、蔗渣和汁渣混合物匀浆中提取甘蔗茎总RNA的效果。结果表明,从蔗汁和汁渣混合物匀浆中提取到28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA,而蔗渣中仅提取到5S RNA;蔗汁中提取的mRNA,其转录水平可代表甘蔗茎mRNA的转录水平;异硫氰酸胍法提取的蔗汁总RNA纯度和产量均优于Trizol提取法的。  相似文献