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自从１９８５年建立转基因方法以来，将外源性ＤＮＡ注射到受精卵的原核内是唯一可行的产生转基因家畜的方法。然而，仅有少部分动物（约５％）把注入的外源ＤＮＡ整合入基因组中。另外，由于整合时间和整合位点是随机的，许多转基因系不能高效表达外源基因或外源基因不能... 相似文献
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全鱼基因在鲫鱼体内的整合与转录 总被引：1，自引：0，他引：1
以鲤鱼金属硫蛋白启动子与大麻哈鱼生长激素基因重组的融合全鱼基因（ｃｏｍｍｏｎｃａｒｐｍｅｔａｌｏｔｈ－ｉｏｎｅｉｎｐｒｏｍｏｔｅｒａｎｄｔｒｏｕｔｓａｌｍｏｎｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅｇｅｎｅ，ｃＭＴｓＧＨ）为外源基因，通过显微注射法将其线性片段导入鲫鱼受精卵内，研究了其整合与转录效率。结果表明，全鱼基因在鲫鱼基因组中的整合率为３６．４％（１６／４４），对转基因鱼阳性的ＲＮＡ样本进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交检测，转录率为２５％（１／４）。由此认为，该全鱼基因可以作为转基因鱼研究和应用的外源基因。 相似文献
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动物乳腺生物反应器的原理及研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
1 基本概念1 .1 转基因动物 (ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃａｎｉｍａｌ) 转基因动物是指通过实验室的某些方法 ,将人为构建的外源目的基因导入动物的生殖细胞或早期胚胎 (原核或受精卵 ) ,使其稳定地整合到动物基因组中 ,并能遗传给后代的动物。最早的转基因动物是鸡 (Ｍｕｎｒｏ,1 968) ,其后是利用注射法和病毒感染法转基因鼠 (Ｊａｅｎｉｓｈ ,1 976)。1 .2 动物生物反应器 (ａｎｉｍａｌｂｉｏｒｅａｃｔｅｒ) 一般把目的基因在血液循环系统或乳腺中表达的转基因动物叫动物生物反应器。利用它来生产人类所需的生物活性物质或药用珍稀蛋白… 相似文献
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哺乳动物精子载体转基因技术新研究 总被引：1，自引：0，他引：1
精子载体法是以精子作为外源基因的载体，在受精过程中将外源基因导入动物胚胎，从而使外源基因进入子代的基因组中。相对于显微注射法、反转录病毒感染法、胚胎干细胞法等方法而言，它的主要优点是利用精子的自然属性克服了人为机械操作给胚胎造成的损伤，提高了转基因效率，而且操作简便、成本低廉。因而成为转基因动物研究的热点技术。现就精子结合外源基因的机制进行简要介绍，并对发展起来的精子细胞输精管内注射法、曲细精管徽注射法和睾丸直接注射法等精子载体转基因新途径进行综述。 相似文献
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确定外源基因的整合位点是获得转基因动物后的首要任务。本试验应用TAIL-PCR得到了2头转入人溶菌酶基因克隆牛外源基因的整合位点,结果表明:2头转基因个体中外源基因均整合在受体基因组上,其中WS个体外源基因整合在牛24号染色体的基因组克隆（NW003104566.1）中。YW个体中外源基因整合在牛16号染色体的基因组克隆（NW003104440.1）中,整合位点位于LOC10030和RGL1基因之间。综上表明,在WS和YW个体中,外源基因的整合分别造成受体染色体238和228bp核苷酸的缺失。4个整合片段（InS1InS4）的末端均与拓扑异构酶I作用位点的共有序列相连。在WS个体中外源基因与染色体的整合连接处（InS1InS3）存在1nt的同源序列。在整合片段InS2、InS3、InS4中表现出共同的相似处,即均存在具有间隔的短的同源序列。 相似文献
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转基因动物关键技术及其进展 总被引：3，自引：0，他引：3
转基因动物是指体内基因组中稳定地整合有外源性基因的动物。通过基因重组的各种方法可人为的改造动物基因组，并在动物活体水平上研究有关基因的结构和功能，是一个四维时空的研究体系，为从分子到个体多层次、多方位的研究基因提供了新的方法和思路。这种突出的优越性使转基因动物具有广泛的应用潜能，其中转基因小鼠已大量地应用于基础研究中的各个领域；转基因大动物则在应用研究中取得了显著的进展。１原核显微注射法该法由美国人Gordon发明，是最可靠，也是使用最广泛的动物转基因方法。其基本原理是：通过显微操作仪将外源基因直接… 相似文献
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动物生物反应器是指将外源目的基因导入整合到动物基因组中，该外源基因可以遗传给后代，并能够表达相应目标蛋白，所获得的个体表达系统就是动物生物反应器。这样的一个具有动物生物反应器功能的转基因动物，其体内可以合成所需的蛋白，并通过乳汁、尿液、血液、精液、蛋清或蚕丝等分泌产生。 相似文献
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精原干细胞介导法制备转基因动物是用试验导入的方法将外源基因移入动物细胞并整合到其基因组中,伴随着精原干细胞分化成精子,通过受精最终使外源基因得以表达。近年来,随着对精原干细胞研究的不断深入,人们发现其在建立转基因动物方面具有巨大的应用潜力和优势。作者从精原干细胞的生物学特性及携带外源基因的原理等方面阐述了其应用于转基因动物制备的理论机制,同时介绍了精原干细胞介导法在制备转基因动物方面,特别是转基因羊生产中的应用现状。 相似文献
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动物转基因技术的研究应用进展 总被引：2，自引：0，他引：2
动物转基因技术的研究应用进展李兴光山东省农科院畜牧兽医研究所（２５０１００）动物转基因技术就是将外源基因或体外重组的基因结构，经体外增殖和修饰转移到动物受精卵内，或将部分内源基因剪除或抑制，使其在动物体内得以整合和表达，以产生具有新遗传特征或性状的转... 相似文献
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转基因动物研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
曹宏楷 《江西畜牧兽医杂志》2008,(2):2-5
<正>转基因动物(trangenic animal)是通过实验方法,人工地将外源基因导入动物受精卵(或早期胚胎细胞),使之与动物本身的基因组整合在一起,外源基因能随细胞的分裂而增殖,并能稳定地遗传给下一代的动物。转基因动物的研究是一项需要应用现代动物胚胎学、发育生物学、分子生物学、遗传学等众多基础生物学科的理论知识和技术成果的一 相似文献
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1显微注射法转基因猪的研究中最常用的技术方法是核显微注射法。其原理是在显微镜下将外源基因注入到原核期或经重构发育至原核期的受精卵细胞的胚胎原核中,注射的外源基因与胚胎基因组融合,然后进行体外培养,最后移植到受体母畜子宫内发育,这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段,此即转基因后代。显微注射法的缺点是效率低、位置效应(外源基因插入位点随机性)造成表达结果的不稳定性、动物利用率低等。其优点是外源基因的转移率和整合效率都较高。迄今为止,核显微注射法还是最有效、最实用的动物转基因方法。2核移植转基因法… 相似文献
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转基因猪在农业和生物医学中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
早期方法制备转基因猪仅局限于外源基因的随机整合。胎儿体细胞同源重组技术与核移植技术相结合，使猪的基因组定位修饰成为可能。在人猪器官移植研究中，对引起超急排斥反应(HAR)基因进行敲除，首次实现了猪基因组的定位修饰。因为猪被广泛用作人类疾病模型，所以基因修饰为改变这些模型或创建更多模型提供了较好的途径。然而棱移植动物易出现表型异常。表型异常可能是外源基因改变而未被正常转入所致。虽然利用棱移植基因定位修饰技术已成功制备出转基因动物，但棱移植技术、体细胞培养条件及基因修饰技术尚待进一步完善。 相似文献