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相似文献
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1.
[目的]观察九香虫含药血清对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子FADD、p53表达的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。[方法]20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为2组(生理盐水对照组和九香虫含药血清组),每组10只。其中,九香虫含药血清组给予九香虫煎剂灌胃5 d后,制备九香虫含药血清,按不同浓度体外作用于SW480细胞72 h。CCK8细胞增殖试验检测其对SW480细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测其对SW480细胞凋亡的诱导作用,Western blot法、荧光定量PCR法检测细胞中FADD、p53蛋白及mRNA的表达。[结果]各浓度九香虫含药血清对SW480细胞生长均有抑制作用,且明显促进其凋亡,凋亡率明显高于对照组(P〈0.01)。Western bolt及荧光定量PCR结果表明,九香虫含药血清干预可使FADD表达明显增强,p53表达明显减弱。[结论]九香虫含药血清可诱导人结肠癌细胞凋亡,并影响凋亡相关因子p53、FADD的表达,从而达到抗肿瘤作用。  相似文献   

2.
为探究九香虫血淋巴对胃癌细胞SGC-7901体外增殖的抑制作用,本文以体外培养人胃癌细胞SGC-7901为材料,经九香虫血淋巴处理后,采用台盼蓝染色法检测细胞死亡率,并用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果表明:九香虫血淋巴能显著抑制胃癌细胞SGC-7901生长,且在浓度为5、10、20、30、40 mg/L时呈时间和剂量依赖性。  相似文献   

3.
[目的]研究苍术酮对体外培养肝癌细胞HepG2生长的抑制作用。[方法]选取对数生长期的HepG2细胞,用配制的不同浓度的苍术酮在3个时间段进行诱导,CCK-8法检测苍术酮对肝癌细胞的抑制作用,相差显微镜下观察肝癌细胞形态的变化,荧光显微镜下观察细胞核的变化,流式细胞仪检测苍术酮诱导对细胞周期的影响及凋亡的影响。[结果]苍术酮能够诱导Hep G2的凋亡并呈明显的剂量依赖性。[结论]苍术酮可通过抑制HepG2细胞生长而发挥抗肿瘤作用。  相似文献   

4.
现代医学证明九香虫具有良好的抑癌抗癌作用。为了明确九香虫抑癌抗癌活性组份大类,采用超滤技术分离九香虫血淋巴小分子物质、60%丙酮沉淀蛋白质、醇提法提取多糖成分,通过MTT法检测三种生物分子对SGC-7901细胞的增殖影响。结果表明,在较高的作用浓度条件下,蛋白质提取物的增殖抑制活性显著高于小分子物质(P0.05),多糖提取物各作用浓度与无药对照相比均无明显的抑制活性,说明九香虫蛋白质组份是其抑癌抗癌的主要功能分子。  相似文献   

5.
目的 探讨重楼水提物对人肝癌HepG2细胞株增殖和凋亡的影响.方法 以体外培养的肝癌HepG2细胞为研究对象,MTT法检测重楼对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪Annexin V/PI 双染法检测重楼对其凋亡的影响,ELISA法检测Bcl-2、Bax 蛋白表达的情况.结果 不同浓度重楼水提物能有效抑制HepG2细胞的增殖,且呈时间及浓度依赖性,作用效果在12 μg/ml时抑制效果最好(P〈0.01).12 μg/ml重楼水提物作用HepG2细胞24 h、48 h后,结果表明HepG2随着重楼水提物作用时间的延长,细胞凋亡率增加,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.01).12 μg/ml重楼水提物作用HepG2 细胞24 h后,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05).结论 重楼水提物能抑制HepG2细胞的体外增殖,抑制作用表现出时效关系,其机制可能与促进细胞凋亡、降低Bcl-2蛋白表达、增加Bax蛋白表达有关.  相似文献   

6.
[目的]通过建立的荧光定量PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒载量的检测,探究双黄连水煎液在体外对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响.[方法]建立非洲绿猴胚胎肾细胞与猪繁殖与呼吸综合征病毒共感染模型,并应用CCK8法筛选双黄连水煎液的最大安全质量浓度.根据DNA序列数据库公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒-N蛋白参考序列,设计特异性引物,构建猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因质粒,建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因的荧光定量PCR方法,研究最大安全质量浓度下的双黄连水煎液对猪繁殖与呼吸综合征病毒载量的影响.[结果]双黄连水煎液对非洲绿猴胚胎肾细胞的最大安全质量浓度为6.25 mg/mL,在此安全质量浓度下对猪繁殖与呼吸综合征病毒具有良好的阻断吸附和抑制复制作用,作用效果呈时间和剂量依赖性,而对猪繁殖与呼吸综合征病毒的直接杀灭作用效果不显著.[结论]成功建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒载量的荧光定量PCR方法,通过此方法检测到双黄连水煎液在6.25 mg/mL时具有抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用.  相似文献   

7.
旨在探究PrxⅡ对5-FU诱导HepG2(人肝癌细胞系)细胞凋亡的影响,阐明沉默PrxⅡ基因提高5-FU促进HepG2发生细胞凋亡的作用。利用慢病毒介导的shRNA干扰技术建立PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞系、MTT法检测细胞存活率、荧光显微照相测定凋亡情况、蛋白质免疫印迹检测凋亡相关蛋白表达水平。结果表明PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞系构建成功;MTT检测发现在1mmol·L-15-FU处理下,shPrxⅡ组细胞存活率明显低于Scramble组;荧光显微照相结果表明shPrxⅡ组细胞凋亡率明显高Scramble组;蛋白质免疫印迹结果表明PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞中凋亡标志物PARP、促凋亡蛋白Bad的表达水平明显升高,抗凋亡蛋白Bcl-xL表达水平明显下降。研究表明,沉默PrxⅡ基因能提高HepG2对5-FU促凋亡作用的敏感性,导致HepG2细胞凋亡水平上升,研究结果可为提高肝癌细胞对于5-FU的敏感性提供新的潜在靶目标。  相似文献   

8.
MTT法检测金针菇多糖(FVP)在不同浓度(0,50,100,200,500,1 000μg/mL)及不同时间(24 h和48 h)对肝癌细胞HepG2增殖的影响;利用Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测FVP对肝癌细胞凋亡的影响; Hoechst33258荧光染色法检测细胞形态学变化;试剂盒法检测凋亡蛋白Caspase3、8、9活性变化。结果表明:FVP以剂效时效关系抑制细胞增殖,浓度在500,1 000μg/mL处理48 h后细胞抑制率分别为47. 2%和57. 1%。细胞凋亡率随着FVP浓度增高而增高,浓度为500μg/mL和1 000μg/mL时的凋亡率分别为33. 8%和40. 7%。FVP使细胞呈现致密、明亮、蓝色浓染的核固缩细胞凋亡变化,且镜下细胞数目随FVP浓度增加而减少。FVP能够同时使Caspase3、8、9活性蛋白表达增高,且呈浓度依赖性。FVP能抑制癌症细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能涉及线粒体及死亡受体途径,具体作用机制有待进一步研究。  相似文献   

9.
目的观察漆树黄酮对人肝癌细胞系HepG2端粒酶活性及NF-κBp65表达的影响。方法端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)检测不同浓度漆树黄酮对HepG2细胞端粒酶活性的影响,RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达,Western blot检测NF-κBp65蛋白表达。结果漆树黄酮对端粒酶活性具有抑制作用。漆树黄酮组hTERT mRNA和NF-κBp65蛋白表达降低,并且与端粒酶活性下调存在相关性。结论漆树黄酮可能通过下调NF-κBp65蛋白表达而抑制HepG2细胞hTERTmRNA转录,导致端粒酶活性降低。  相似文献   

10.
陈佳瑜  许洁  葛正龙 《安徽农业科学》2010,38(21):11069-11070,11074
[目的]检测从人白介素-12(human interleukin12,hIL-12)转基因马铃薯中提取的hIL-12的抗肝癌效应。[方法]用MTT法检测转基因马铃薯中hIL-12对人肝癌细胞HepG22.2.15的体外杀伤作用;用AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察转基因马铃薯中hIL-12对HepG22.2.15细胞的诱导凋亡作用。[结果]转基因马铃薯中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)在体外对HepG22.2.15具有杀伤作用,而野生对照组无杀伤作用;AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察结果表明,转基因马铃薯中表达hIL-12可诱导HepG22.2.15细胞凋亡。[结论]转基因马铃薯表达体系表达的人白介素-12具有抗肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。  相似文献   

11.
[目的]检测从人白介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯中提取的hIL-12的抗肝癌效应。[方法]用MTT法检测转基因马铃薯中hIL-12对人肝癌细胞HepG22.2.15的体外杀伤作用;用AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察转基因马铃薯中hIL-12对HepG22.2.15细胞的诱导凋亡作用。[结果]转基因马铃薯中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)在体外对HepG22.2.15具有杀伤作用,而野生对照组无杀伤作用;An-nexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察结果表明,转基因马铃薯中表达hIL-12可诱导HepG22.2.15细胞凋亡。[结论]转基因马铃薯表达体系表达的人白介素-12具有抗肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。  相似文献   

12.
汤俊  毕永红  万能  胡征宇 《安徽农业科学》2010,38(33):18643-18645,18656
[目的]研究葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性。[方法]采用二甲基四氮唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,形态学法观察凋亡的特征性变化,AnnexinV/PI双染及PI单染流式细胞术法检测凋亡率。[结果]经不同浓度提取物作用后,HepG2细胞的生长受到显著抑制,并呈现时间-浓度依赖关系趋势。观察细胞形态,发现有凋亡特征性变化。AnnexinV/PI双染结果显示,癌细胞早期凋亡率随提取物浓度的升高而显著增高,最高可达79.2%。PI法同样显示凋亡的发生,其凋亡峰最大比率为9.6%,显著高于对照组。[结论]葛仙米甲醇提取物能够诱导肝癌细胞HepG2的凋亡。  相似文献   

13.
小皱蝽为九香虫的伪品,市场上常被作为九香虫销售。本实验旨在用MTT法检测九香虫和小皱蝽血淋巴对人胃癌SGC-7901细胞的增长抑制作用,比较二者对人胃癌SGC-7901细胞的体外增殖抑制作用。用九香虫和小皱蝽血淋巴分别作用于体外培养的SGC-7901细胞,测定其抑制率。结果表明,九香虫和小皱蝽对SGC-7901细胞皆有抑制作用,且抑制率随时间和浓度的增加而增加;相同浓度不同时间(24 h、48 h、72 h)和相同时间不同浓度(100 mg/L、200 mg/L、300 mg/L、400 mg/L)小皱蝽对SGC-7901细胞的抑制率皆高于九香虫。  相似文献   

14.
《吉林农业科学》2013,(5):51-53
目的:探讨灭多威对家蝇胚胎细胞系MDEC-07114细胞凋亡的影响。方法:1、实验分组:不同浓度灭多威组(1 mg/mL组、2 mg/mL组、4 mg/mL组、8 mg/mL组),同时设正常组、1%丙酮组;2、HE染色法观察MDEC-07114细胞凋亡形态,并测定细胞凋亡指数;3、TUNEL检测MDEC-07114细胞凋亡。结果:1、不同浓度灭多威作用于MDEC-07114后,从2 mg/mL组开始见典型凋亡细胞,细胞凋亡指数增加,且随浓度的递增而逐渐升高;2、TUNEL检测:2 mg/mL组出现明显的绿色荧光,4 mg/mL组有所增加,8 mg/mL组荧光最强。结论:灭多威可诱导MDEC-07114细胞凋亡。  相似文献   

15.
杨萍  武学峰  姚旭辉  刘少兴  杨鸣琦 《安徽农业科学》2010,38(3):1124-1125,1176
[目的]研究豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素的降毒增效作用。方法]分别采用6种不同浓度的豆类丝核菌次级代谢产物(苦马豆素含量分别为10.00、5.00、2.50、1.25、0.62、0.31 μg/ml)处理人肝癌细胞HepG2,测量其IC50;然后用此代谢产物与2种不同浓度(60、6 μg/ml)阿霉素(ADR)联合处理HepG2,分析两者的增效作用。结果]豆类丝核菌次级代谢产物可抑制肝癌细胞HepG2生长,其对HepG2细胞作用72 h的IC50为1.25 μg/ml;ADR可显著抑制肝癌细胞HepG2生长,加入豆类丝核菌次级代谢产物后HepG2细胞的形态和存活率变化不大。结论]豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素体外联合不具有增效作用。  相似文献   

16.
采用影印培养法,以浓度为1/2MIC的五味子水煎液、五味子醇提物、百部水煎液、百部醇提物对耐环丙沙星大肠杆菌作用24 h,观察作用前后大肠杆菌对环丙沙星的耐药性变化。结果表明:五味子水煎液、五味子醇提物、百部水煎液、百部醇提物对临床分离耐药菌株均无明显耐药性消除作用,五味子水煎液、五味子醇提物对人工诱导耐药菌株有一定的耐药消除作用。  相似文献   

17.
[目的]研究魔芋葡甘露聚糖(KGM)对镉导致的L02细胞毒性损伤的影响。[方法]MTT法确定KGM对L02细胞的最适作用浓度和无菌处理方式;设置空白对照组、镉单独作用组、镉先作用3 h再加KGM作用组、KGM先作用3 h再加镉作用组,分别培养不同时间段后用MTT法检测L02细胞活力;检测ALT、AST、GSH-Px、MDA水平,并在光镜下进行细胞形态观察。[结果]0.2mg/mL的KGM溶液经121℃30 min灭菌处理后最适作用于L02细胞;L02细胞活力与CdCl_2浓度呈明显的剂量-效应关系;CdCl_2与KGM联合作用后其细胞活力均高于镉单独作用组,且其ALT、AST、MDA的检测结果均呈极显著差异。[结论]KGM对镉染毒后的L02细胞有一定的保护作用。  相似文献   

18.
为探讨姬松茸多糖诱导HepG2细胞凋亡过程中线粒体膜电位和细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化.以人肝癌细胞系HepG2细胞为对象,使用流式细胞仪检测姬松茸多糖对HepG2细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,激光共聚焦显微镜检测HepG2细胞[Ca2+]i的变化.结果表明姬松茸多糖能显著诱导HePG2细胞凋亡,并不同程度降低HepG2细胞线粒体跨膜电位,升高细胞[Ca2+]i,造成钙稳态失衡.姬松茸多糖诱导HepG2细胞凋亡的机制与降低线粒体膜电位,造成细胞内Ca2+超载有关.  相似文献   

19.
[目的]研究环氧丙烯酰胺( GA)对体外培养的 R2C细胞生长及孕酮合成的影响。[方法]用0.25、0.5、0.75、1、2、4、6 mmol/L 浓度的GA作用于细胞48 h,MTT法获得 GA作用浓度的IC25,IC50及 IC75。用以上3种浓度的GA刺激细胞48 h,观察细胞形态。GA作用于细胞4 h后,通过彗星试验(Comet Assay)检测细胞 DNA的损伤程度;放射免疫法( RIA)测定 GA刺激细胞24 h后的孕酮合成量。[结果] GA能抑制 R2C细胞活性,其 IC25、IC50、IC75分别为0.635、0.872及1.198 mmol/L;3种浓度的 GA能不同程度的影响细胞生长形态;作用4 h对 R2C细胞 DNA有损伤作用;各浓度组作用24 h后均能降低孕酮的合成量。[结论] GA能抑制 R2C细胞增长及孕酮合成能力。  相似文献   

20.
通过L_9(3~4)正交试验,通过MTT法选取桦褐孔菌多糖对HepG2细胞的安全浓度,检测不同浓度的桦褐孔菌多糖对胞内TG蛋白的影响,及桦褐孔菌多糖减轻细胞内脂质堆积的作用。结果表明,桦褐孔菌多糖最佳条件为1 g∶15 mL的料液比,在温度30℃下提取30 min,超声功率为480 W。桦褐孔菌多糖可明显减轻HepG2细胞内脂质堆积,显著降低细胞中TG的含量,其中600 mg/L桦褐孔菌多糖对TG的清除率达24.57%,脂滴数量明显减少。说明桦褐孔菌多糖具有良好的体外降脂活性,对脂肪肝有较好的预防效果。  相似文献   

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