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相似文献
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1.
苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia lyase,PAL)是苯丙烷类代谢的关键酶,催化苯丙氨酸转化为肉桂酸,促进黄酮、木质素等次生代谢产物的合成。根据其他植物PAL基因的DNA保守序列设计的简并引物,经过PCR扩增,得到1条864 bp的特异性片段,编码288个氨基酸。通过分析其序列和编码的氨基酸序列,发现其与其他物种的PAL基因高度同源,证实为马尾松PAL基因的核心序列。所得序列已经登陆在NCBI的Genbank中,序列号为GQ142010。  相似文献   

2.
为了解决诺丽实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成c DNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到p MD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序。序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96%)和相似性(98%)。q RT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在诺丽基因表达研究中作为内参基因。  相似文献   

3.
松材线虫病双基因检测方法的建立   总被引:1,自引:1,他引:0  
采用松材线虫的核糖体DNA的内转录区序列及cathepsin L-like cysteine proteinase为目的片段设计2对引物,建立了可特异性检测松材线虫的双基因PCR检测法.利用这2对引物,松材线虫可扩增出大小分别为490 bp及264 bp的产物,而其他对照组均无扩增.此检测方法经过实际应用检验,灵敏度与...  相似文献   

4.
桐油是制备生物柴油的优势原料。delta 8脱饱和酶基因与植物膜脂、鞘磷脂的生物合成及细胞信号传递途径有关。通过简并PCR扩增、3’RACE、5’RACE及编码区扩增获得了油桐delta 8脱饱和酶的全长c DNA序列。该基因全长1 787 bp,ORF的长度为1 344 bp,编码447个氨基酸。经过网上比对分析,发现油桐delta 8脱饱和酶与其它植物的此基因具有较高同源性,其中与蓖麻脂肪酸去饱和酶相似度达83%。研究结果为揭示油桐油脂合成途径及分子定向育种奠定基础。  相似文献   

5.
以宇佐美曲霉E001总RNA为模板,采用RT- PCR等技术扩增了木聚糖酶基因(xyn I)的cDNA全序列(GenBank登录号DQ302412).该cDNA全长 881 bp,其中5′和3′端非编码区分别为97和 106 bp,信号肽编码区 111 bp,成熟肽编码区 567 bp 编码188个氨基酸组成的木聚糖酶Xyn I.以E001基因组DNA为模板,采用单侧PCR等技术扩增了xyn I的DNA全序列(GenBank登录号DQ302413).该DNA全长 1 098 bp,含启动子序列、内含子和外显子等核苷酸序列.将xyn I cDNA所推导的Xyn I一级结构与GenBank中报道的其它相关序列进行了同源性比较.结果表明,E001 Xyn I是一种新的木聚糖酶,且具有第G/11家族木聚糖酶的共同特征.  相似文献   

6.
根据其它植物PAL基因的保守区域,设计一对兼并引物,采用RT-PCR方法从国槐中克隆了一个长866 bp的PAL基因片段,命名为SjPAL.序列分析发现SjPAL多肽与其它植物的PAL氨基酸序列高度同源(87%以上),且包含与水稻和拟南芥的PAL类似的活性位点.系统进化树分析表明SjPAL与豆科植物的PAL亲缘关系较近.RT-PCR结果显示,SjPAL在根和茎的表达量约为叶中的3倍.利用反义RNA技术将SjPAL基因克隆至植物表达载体pBI121,构建了SjPAL反义RNA植物表达载体pBI121-PAL,通过根癌农杆菌EHA105将其导入拟南芥基因组,对获得的抗性植株进行PCR鉴定、Northern杂交分析、PAL活性分析以及总多酚含量和类黄酮含量分析.结果表明,该反义RNA已整合到拟南芥基因组中,转基因拟南芥的PAL基因表达量、单位材料PAL活性、总多酚含量和类黄酮含量均显著低于野生型对照.本研究为下一步利用该基因反义表达载体转化国槐,通过调节酚类物质含量提高其在再生体系中的生根能力提供了试验依据.  相似文献   

7.
以宇佐美曲霉E001总RNA为模板,采用RT-PCR等技术扩增了木聚糖酶基因(xynI)的cDNA全序列(GenBank登录号DQ302412)。该cDNA全长881 bp,其中5′和3′端非编码区分别为97和106 bp,信号肽编码区111 bp,成熟肽编码区567 bp编码188个氨基酸组成的木聚糖酶Xyn I。以E001基因组DNA为模板,采用单侧PCR等技术扩增了xynI的DNA全序列(GenBank登录号DQ302413)。该DNA全长1 098 bp,含启动子序列、内含子和外显子等核苷酸序列。将xynI cDNA所推导的Xyn I一级结构与GenBank中报道的其它相关序列进行了同源性比较。结果表明,E001 Xyn I是一种新的木聚糖酶,且具有第G/11家族木聚糖酶的共同特征。  相似文献   

8.
版纳龙竹CONSTANS同源基因的克隆与序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
以版纳龙竹基因组DNA为模板,采用前人基于水稻CO同源基因Hd1序列的保守区所设计的特异引物COS1和COA1,运用PCR方法扩增出一条1 520 bp的DNA片段,并克隆到pGEM-T载体。测序和序列分析结果显示:该片段含有1个590 bp的内含子,编码区930 bp共编码310个氨基酸;该基因被命名为DxCO1,其DNA序列在G enB ank中的注册号为GQ358925。在G enB ank中进行同源性检索的结果显示:其核苷酸序列与其它禾本科植物CO同源基因的氨基酸序列同源性高达81%~91%;推测的DxCO1蛋白质序列与其它种子植物CO同源基因蛋白质序列的系统发育分析结果显示:DxCO1与小麦Hd1-like等5个基因聚成了一个强烈支持的分支;另外,在该片段推测的蛋白质序列的氨基端含有一个类似锌指蛋白的B-box(Cx2Cx8Cx7Cx2Cx4Hx8H)结构域,羧基端含有一个CCT(CO,CO-like,TOC1)结构域。序列和结构的高度同源性表明:DxCO1是版纳龙竹的1个CO-like基因,可能对其开花调控有着重要作用。  相似文献   

9.
7个杏李品种S基因型的鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
为给杏李的品种配置和遗传育种提供了理论基础,利用特异性PCR扩增、DNA测序和生物信息学方法鉴定了恐龙蛋等7个杏李品种的S基因型.S基因的PCR扩增结果表明,Ph引物对风味皇后、味帝、味王、风味玫瑰、味厚、恐龙蛋6个品种扩增出1条850bp左右片段;Pe引物对风味皇后、味王、风味玫瑰、味厚、味馨5个品种扩增出1条1100bp左右片段;Pb引物对味帝和恐龙蛋扩增出900bp左右片段;P2引物对味馨扩增出850bp左右的片段.对PCR产物克隆后测序,并通过BLAST比对和生物信息学分析表明,风味皇后、味王、风味玫瑰和味厚4个品种的2个PCR产物分别与Se-RNase和Sh-RNase基因的相似性达100%,味帝和恐龙蛋的2个产物分别与Sb-RNase和Sh-RNase基因的相似性达100%,味馨的2个PCR产物与Se-RNase和S2-RNase基因的相似性达100%;结合PCR分析和序列生物信息学分析确定了味王等7个杏李品种的S基因型:风味皇后、味王、风味玫瑰和味厚等4个品种的S基因型相同,为SeSh;味帝和恐龙蛋的S基因型相同,为SbSh;味馨的S基因型为SeS2.  相似文献   

10.
根据植物肌动蛋白(Actin)基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属植物荔波连蕊茶幼嫩茎段为材料,提取总RNA,进行RT-PCR。采用RACE技术扩增获得1 631 bp的Actin基因全长cDNA序列,命名为ClActin1(GenBank登录号KF366912)。序列分析表明,ClActin1开放阅读框(ORF)为1 134 bp,编码377个氨基酸,5’非编码区90 bp,3’非编码区407 bp。预测的ClActin1蛋白分子量为41.69 kD,理论等电点为5.31,具有Actin超基因家族的保守结构域和肌动蛋白家族特有的特征信号序列。ClActin1与GenBank中收录的其它植物肌动蛋白核苷酸序列的相似性在82%以上,氨基酸序列的相似性在97%以上。与其它植物肌动蛋白比较并构建系统进化树,结果显示山茶肌动蛋白与茶树和杨树的肌动蛋白的亲缘关系最为密切。实时荧光定量PCR结果显示,该基因在荔波边蕊茶不同组织器官及不同发育时期的表达量稳定,表明ClActin1基因可作为内参基因。  相似文献   

11.
银杏LEAFY同源基因的分离与克隆   总被引:11,自引:0,他引:11  
银杏 (GinkgobilobaL .) ,又名白果 ,公孙树 ,著名的孑遗植物 ,是珍贵的药用、材用、观赏用树种。但银杏的童期很长 ,实生树开花需要 2 0a以上。为缩短银杏童期 ,果树工作者从栽培方式、传统育种进行了大量的研究 ,但成效不大。近年来应用分子生物学研究植物上的  相似文献   

12.
用定位研究的方法,在丹东不同区域建立生态因子观测场,测定不同土层厚度、pH值、土壤养分含量、空气温湿度、光照强度、降雨、蒸发量等各因子对银杏生长的影响,结果表明:在不同的温度条件下,银杏种子萌发和幼苗生长状况不同,经20 d后,种子发芽率恒温比变温高6.2个百分点,幼苗根系生长、苗高、地径恒温比变温分别提高36.7%和16%。经过遮阴处理,银杏幼苗生长好于对照区。生长在壤土和沙壤土上的银杏其生长表现优于生长在沙土和黏土上的,土壤含盐量以0.03%~0.043%,银杏生长良好。银杏对pH值适应范围很宽,在pH值4~8.5的土壤上均能生长。  相似文献   

13.
辽宁省是我国银杏分布的最北界。银杏不但是丹东的市树,也是该地区经济林发展的主要树种。丹东的银杏采种母树90%局限于市区内行道树,每年采种量仅为2000kg左右,满足不了当地育苗需要。由于种源匮乏,不得不从山东、江苏等地引进苗木。但由于引进苗木长势明显不如当地苗木,且冻害严重,造成引种失败。从1997年由纬度相近,地理环境、气候条件相似的朝鲜新义州引进银杏种子,进行育苗试验获得成功。文章对银杏的引种育苗及苗木生长情况进行了报道。经试验看出,朝鲜种源培育出的苗民当地苗木长势无明显差异,为引种朝鲜银杏种源提供了科学依据。  相似文献   

14.
以16个银杏栽培品种的单倍体胚乳DNA为材料,用筛选出了高效引物进行RAPD分析,确定了各品种的标记基因型.在此基础上,可利用单倍体种子胚乳或二倍体叶片等材料实现对银杏无性系品种的有效分子鉴别,为银杏的良种鉴别、保护和登录提供了科学依据.  相似文献   

15.
The flavonoids content and its composition in Ginkgo (Ginkgo biloba L.) leaves are affected by environmental factors such as temperature and soil moisture. Here we performed experiments in phytotron using 2-year-old Ginkgo seedlings to explore the effects of temperature and soil moisture on flavonoids content, enzymes related to flavonoids biosynthesis such as phenylalanine ammonia-lyase (PAL), cinnamate-4-hydroxylase (C4H) and p-coumarate CoA ligase (4CL), soluble sugar and protein content. We found that temperature and lower soil moisture had significant effects on these parameters. The effects of temperature on flavonoids content, the activity of C4H and 4CL and soluble sugar content were greater than that of soil moisture. The total flavonoid content, the activity of PAL, C4H and 4CL, soluble sugar content were higher in lower temperature regime 15 °C (daytime)/5 °C (nighttime) and lower soil moisture (30–35 % of field capacity), but higher temperature was beneficial to the accumulation of soluble protein. This indicates that increasing of soluble sugar content and the activity of PAL, C4H and 4CL are beneficial to flavonoids biosynthesis and accumulation in the Ginkgo leaves, while increasing of soluble protein is adverse to flavonoids biosynthesis. Because lower temperature and soil moisture are favorable to flavonoids biosynthesis, we can take some silvicultural steps to increase flavonoids production in Ginkgo plantation, such as establishing leaf-harvest plantation at lower temperature zone, reducing irrigating before harvesting leaves.  相似文献   

16.
文章对来自日本和中国的8株叶籽银杏亲缘关系进行了评价,从64对EcoRI/MseI引物中筛选出7对清晰、多态性高的引物,对8个叶籽银杏种质的亲缘关系进行了AFLP分析。7对引物共产生841条谱带、240个特异位点和749条多态带,多态带的比例平均为89.06%,每对引物鉴别效率达到100%,所有种质之间相似系数(SC)在0.48~0.78之间,表明叶籽银杏单株问存有较大的遗传变异,中国的叶籽银杏具有较丰富的遗传变异。  相似文献   

17.
黑银杏优良无性系选育研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
在对全县银杏种质资源普查的基础上,通过初选、复选和高接栽培对比试验,从297株雌银杏古树中发现并选育出了两个具有药用价值高、结实早、丰产稳产、抗逆性强等特点的黑银杏优良无性系———中银黑1号和中银黑2号。黑银杏种仁中总黄酮含量09mg/kg,叶片中总黄酮含量85g/kg,分别比普通银杏高50%和417%。文中还介绍了黑银杏的优良经济性状、生物学特性和生态学特性。  相似文献   

18.
本文从分布状况、立地条件、形态特征、年龄结构、性别比例、生长状况和保护现状等方面对湖北省巴东县的古银杏资源进行了系统研究。结果表明:全县共有银杏古树274株,其中一级古树37株,二级古树70株,三级古树167株。这些银杏古树分布在该县所辖12个乡(镇)的10个,其中野三关镇139株,清太坪镇70株,其他乡(镇)共65株。  相似文献   

19.
银杏叶黄酮含量变化规律及其干燥方式的研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
对不同部位,不同条件下的银杏叶黄酮含量,银杏叶的干燥变化等进行了比较分析,结果表明:不同品种及雌雄株的成年银杏叶黄酮含量无显著差异;实生苗叶比嫁接苗叶黄酮含量高;5年生以下幼树叶含量高;  相似文献   

20.
银杏不同家系和无性系叶片黄酮与内酯含量变异   总被引:1,自引:0,他引:1  
该试验以银杏20个半同胞家系和19个无性系为材料,对其叶片黄酮与内酯含量、光合速率、PAL活性及主枝生长量进行测定,同时对它们的广义遗传力及相互关系进行了研究,结果表明:不同家系和无性系间的银杏叶黄酮和内酯含量有显著的差异.家系叶片黄酮和内酯含量的广义遗传力为0.42和0.53,无性系叶片黄酮和内酯含量的广义遗传力为0.80和0.65,无性系叶片黄酮和内酯含量的广义遗传力显著高于家系.不同家系间和无性系间的银杏叶光合速率、PAL活性、相对生长量有显著差异,也具有较高的遗传力.叶用银杏家系黄酮含量、无性系黄酮含量的大小与叶片光合速率、PAL活性、相对生长量有显著的相关性,相关系数分别达0.76、0.58、0.61和0.69、0.78、0.95.  相似文献   

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