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1.
抑肌素(GDF8)是骨骼肌细胞生长的重要负调控因子.抑肌素基因突变是牛"双肌"性状形成的分子遗传基础,在不同牛品种中存在着不同的抑肌素基因突变类型,在利木赞品种中,"双肌"性状主要是抑肌素基因第2外显子的Q204X型突变及第3外显子nt821突变.本研究报道一种新的检测该突变的简便方法.应用突变型与正常型引物在一次PCR反应中同时检测出不同的等位基因.对Q204X突变型PCR产物克隆测序分析表明,该片段确实含有一个能导致抑肌素功能缺陷的Q204X突变. 相似文献
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为了确定猪TLR3基因A1116T错义突变的生物学效应,研究其与猪疾病抗性/易感性的关系,本研究采用重叠延伸PCR和定点突变技术构建不同等位基因的真核表达载体,采用双荧光素酶检测分析系统及Real-timePCR方法在体外培养的细胞中研究不同等位基因在信号转导中的作用。成功地构建了野生型和突变型TLR3的真核表达载体,双荧光素酶检测分析表明突变型活化转录因子NF-κB、激活ISRE的能力都减弱;Real-time PCR分析表明突变型诱导转录IL-6的能力下降。结果表明该点突变影响猪TLR3的信号转导能力。 相似文献
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《中国畜牧兽医文摘》2012,(4)
肌肉生长抑制素(Myostatin)或生长和分化因子-8(GDF8),已经被证实是能引起双肌表型的因子,一系列的变异使其基因失活导致其不能调节肌纤维的沉积。这种现象高频率的发生在一些品种的牛身上,比如比利时兰和皮爱蒙特牛。迄今为止,报道了在myostatin基因编码区9个变异能够引起非同源变异。其中,3个是错义突变包括外显子1的2个突变和外显子2的1个突变。其余的6个变异存在于外显子2和3,结果导致过早的出现终止密码子。这些都能引起双肌表型,虽然双肌表型牛存在饲养管理问题,比如分娩困难。但这种问题是可以通过遗传控制的育种程序所克服的。 相似文献
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牛双肌性状的研究进展及其应用 总被引：1，自引：0，他引：1
肉牛双肌基因(double muscle gene)是可使产肉性能大大提高，但同时也使母牛难产率有所提高。该基因位于第2号染色体上，是由生长抑素(myostatin)基因在第3外显子处核甘酸突变造成的，为不完全显性遗传。牛的双肌性状是一个综合性状。作者论述了牛双肌性状的遗传特征、基因定位、多形性及双肌牛的生理、繁殖、胴体特性，并对双肌牛在牛肉生产中的利用方式及在我国肉牛生产中的应用前景进行阐述。 相似文献
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牛肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)主要是骨骼肌生长发育的负调节因子,能够限制肌纤维的增粗增大,其前两个外显子共同编码N-端前肽,第三外显子编码C-端多肽。突变其前肽编码序列会阻止牛MSTN基因表达蛋白与相应受体的结合,导致MSTN功能失活,促进肌肉增值,但具体突变位点仍未确定。本研究设计特定的引物对牛MSTN基因编码区进行PCR扩增并进行了克隆及测序,并假定牛MSTN基因编码序列发生E1-224-A>C点突变,通过生物信息学的方法,对牛MSTN基因突变前后编码产物的理化性质、结构与功能进行了对比分析,为MSTN基因结构与功能的研究奠定了基础。 相似文献
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牛肌肉生长抑制素（Myostatin,MSTN）主要是骨骼肌生长发育的负调节因子,能够限制肌纤维的增粗增大,其前两个外显子共同编码N-端前肽,第三外显子编码C-端多肽。突变其前肽编码序列会阻止牛MSTN基因表达蛋白与相应受体的结合,导致MSTN功能失活,促进肌肉增值,但具体突变位点仍未确定。本研究设计特定的引物对牛MSTN基因编码区进行PCR扩增并进行了克隆及测序,并假定牛MSTN基因编码序列发生E1-224-A〉C点突变,通过生物信息学的方法,对牛MSTN基因突变前后编码产物的理化性质、结构与功能进行了对比分析,为MSTN基因结构与功能的研究奠定了基础。 相似文献
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比利时蓝白花肉牛肌肉生长抑制素基因11 bp的缺失被确认为是引起其双肌表型的原因,近年来,这一突变在南德牛品种中也被发现,也引起了肌肉重量的普遍升高。本研究结果发现,在苏格兰阿伯丁安格斯肉牛商品系也分离到这一突变等位基因,并发现在536个样本的群体中这个突变位点的基因型频率很低(0.04),并且没有发现纯合子。随后检测了此突变位点对不同经济类型牛的胴体品质的影响,结果发现,此突变显著提高了牛胴体重、腰肉重、后腿肉重、肌肉形态评分和眼肌面积,但对脂肪性状没有影响。 相似文献
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瘦肉率是猪育种中重要的目标性状之一,其高低与骨骼肌的含量密切相关。抑肌素(MSTN)基因是与瘦肉率有关的基因。本研究运用PCR-SSCP技术对山西地方品种马身猪MSTN基因启动区上游383位点处的突变进行了SNP多态性分析,并分析该基因5′调控区的不同基因型与初生重(WB)、断奶重(WW)的关系。结果表明:马身猪MSTN基因启动区存在2个等位基因(A、B),3个基因型AA、BB、AB;不同MSTN基因型对WB影响差异显著(P<0.05),BB型的初生重显著高于AA型和AB型的。MSTN基因在该位置的突变所产生的3种基因型与猪的断奶重关系不大,最小二乘均值AA>BB>AB(P>0.05)。 相似文献
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用PCR—RFLPs方法对南阳牛、秦川牛、郏县红牛3个品种共411个个体的myostatin 5′调控区的单核苷酸多态性（SNPs）进行分析。结果表明，3个品种在myostatin 5′调控区T→A突变以等位基因T为主，仅在郏县红牛中发现1个AA型纯合体，郏县红牛品种显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P〈0．05），其它品种处于Hardy-Weinberg平衡状态（P〉0．05）。对黄牛myostatin 5′调控区T→A突变与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状进行相关分析，结果显示，TT型南阳牛6月龄的胸围和胸围指数显著低于TA型个体，TT型南阳牛18月龄的体高显著高于TA型个体（P〈0．05），但基因型对秦川牛和郏县红牛生长性状的效应不显著（P〉0．05）。提示在南阳牛的育种实践中应该综合考虑南阳牛生长阶段和所要选择的性状。 相似文献
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西门塔尔牛肌肉生成抑制素基因编码序列的克隆与序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究根据Genbank中牛肌肉生成抑制素基因序列设计引物，在设计的引物两端分别加上限制性内切酶BarnHI和EcoRI的识别位点序列。利用RT—PCR技术从西门塔尔牛肌肉组织的总RNA中扩增出MSTN基因的CDNA序列，扩增出1125bp片段，该片段与pMD18-T载体连接，转化JM109感受态细胞，所得阳性克隆进行酶切和PCR鉴定，并进行了测序分析，得到的克隆序列与设计的序列基本一致，表明成功地克隆了西门塔尔牛的肌肉生成抑制素基因的蛋白编码序列。 相似文献
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试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。提取秦川牛的骨骼肌总RNA,根据基因库中海福特牛肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上Bam HⅠ和Xho Ⅰ酶切位点及保护碱基,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经Bam HⅠ和Xho Ⅰ双酶切,将目的片段插入到PGEX-4T-1中,构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,将重组表达质粒转化至Rosetta(DE3)中诱导表达。结果表明,扩增的秦川牛肌肉生长抑制素全长基因1 128 bp,克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与GenBank上发表的一致;成功构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,经IPTG诱导,表达出了GST-M融合蛋白,用GST标签抗体做Western blotting印记证明产物大约69 ku,与预期大小相符,并在Rosetta（DE3）菌中成功的进行融合蛋白表达。 相似文献
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Zheng YL Ma HM Zheng YM Wang YS Zhang BW He XY He XN Liu J Zhang Y 《Research in veterinary science》2012,93(2):763-769
Myostatin is an important negative regulator of muscle growth and development. Natural mutations of the myostatin gene cause a double muscling phenotype in beef cattle, pigs and sheep. Therefore, it is feasible to produce a high growth domestic breed by generating a transgenic animal with a mutation, deletion or knockout of the myostatin gene. Our objective was to introduce a subtle mutation of G to A 281-bp upstream of the 3' untranslated region (3'UTR) end of the myostatin gene in Poll Dorset fetal myoblast cells in vitro. Fetal myoblast cells were isolated from fetuses at day 50 of gestation from Poll Dorset sheep and transfected with linear gene-targeting vector pMSTN-A using electroporation. We obtained seven gene-targeted cell colonies with homologous recombination, which were positive as confirmed by PCR, Southern blot. The Western blot analysis result demonstrated that the myostatin protein expression in positive colonies is lower than that of negative ones. These results strongly suggest that we successfully mutated the myostatin gene of Poll Dorset ovine fetal myoblast cells and the mutation can effectively downregulate the myostatin protein expression. 相似文献
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肌生成抑制素是 1 997年发现的骨骼肌生长发育负调控因子 ,肌生成抑制素不仅在骨骼肌中表达 ,还可在心肌和浦肯野纤维等多种组织中表达。研究表明 ,大鼠骨骼肌在体内的再生 ,对 MSTN m RNA的表达表现出明显的时间依赖性 ,并且 m RNA的表达不必由功能性神经支配。通过对不同品种双肌表型牛 MSTN基因的研究 ,发现其骨胳肌增大的共同特点是肌生成抑制素基因发生了突变 ,如布鲁牛 MSTN基因在编码区外显子 3发生 1 1 bp的缺失 ,导致MSTN此位点后的阅读框架改变 ,并在此点后的 1 4个密码子处终止了阅读框架 ,从而使MSTN被截短 ,MSTN蛋白活性区域消失 ,活性丧失 ,结果肌肉大量增加。目前 ,已分别对人、牛和猪的 MSTN基因进行了定位研究 ,猪肌生成抑制素基因定位研究表明 ,猪 MSTN基因位于1 5号染色体上。 相似文献
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Growth factors controlling muscle development. 总被引：9，自引：0，他引：9
The enlarged muscles of certain breeds of cattle, such as the Belgian Blue, have been shown to result from a marked increase in the number of normal sized muscle fibers. Originally insulin-like growth factors (IGFs) were implicated in this myofiber hyperplasia, as IGFs have been shown to stimulate myoblast proliferation as well as maintain fiber differentiation. Recently it has been reported that mice lacking a myostatin gene, a member of the TGFbeta superfamily, have enhanced skeletal mass resulting from increased muscle fiber number and size. Mutations in this gene have been found in double-muscled cattle, indicating that myostatin is an inhibitor of muscle growth. Myostatin is expressed early in gestation and then maintained to adulthood in certain muscles. Myostatin expression in bovine muscle is highest during gestation when muscle fibers are forming and some of the myogenic regulatory factors have elevated expression over the same period as myostatin. Molecular expression of the IGF axis does not differ between Belgian Blue and normal muscled cattle, and IGF-II mRNA is increased throughout formation of secondary fibers in both breeds. However, myostatin and MyoD expression in muscle differ between normal and hypertrophied muscle cattle breeds. This evidence strongly suggests that lack of myostatin is associated with an increase in fiber number which then results in a marked increase in potential muscle mass in double-muscled cattle. 相似文献
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Myostatin (also known as growth/differentiation factor-8) is a recently identified member of the transforming growth factor-β family of secreted regulatory factors. Mice having targeted disruption of the myostatin gene displayed a marked increase in muscle mass, up to three times normal size. Additionally, a myostatin mutation has been linked to double muscled cattle breeds characterized by a visible, generalized increase in muscle mass. Therefore, it is suggested that myostatin in muscle may be one of the long sought inhibitors that specifically control the growth of individual tissues or organs. In the present paper, we review involvement of myostatin in muscle growth of different species. 相似文献
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猪肌生成抑制素（MSTN）cDNA的克隆 总被引：1，自引：0，他引：1
从猪的肌生成抑制素（MSTN）编码序列中设计引物，以军牧一号猪肌细胞总PNA为模板，利用RT－PCR和嵌套PCR技术，扩增出MSTN cDNA片段。该片段全长1277bp，包含猪MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与pMD18-T载体连接，转化到JM109大肠杆菌中，成功地筛选到阳性克隆，其质粒测序结果与文献报道的一致。经EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ酶解分析，cDNA片段与pMD18-T载本之间既有正向插入的克隆，也有反向插入的克隆，所得到的MSTN cDNA可用于原核和真核表达载体的构建。 相似文献