共查询到20条相似文献，搜索用时 265 毫秒
1.
为建立一种快速的新城疫病毒病原检测方法。本研究以原核表达的重组HN蛋白免疫7周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA方法筛选,成功获得了1株能稳定分泌抗新城疫病毒HN蛋白的McAb杂交瘤细胞,命名为4E8,4E8亚类鉴定为重链属于IgG2a,轻链属于κ链。以多克隆抗体作为包被抗体、单克隆抗体4E8作为检测抗体,通过双抗夹心ELISA各个反应条件的优化,建立检测新城疫病毒抗原捕捉ELISA方法。该方法对EDSV、ITLV、IBV、IBDV不发生交叉反应,其敏感性比HA试验要高4倍以上,与RT-PCR相比较,符合率、敏感性和特异性分别为95.6%、93.3%、96.1%。本研究建立的NDV AC-ELISA有良好的重复性、敏感性和特异性,可应用于新城疫病毒感染的早期诊断。 相似文献
2.
3.
【目的】建立一种便于检测副猪嗜血杆菌抗体的方法。【方法】将分离纯化的副猪嗜血杆菌5型超声裂解后,致敏双醛处理的健康绵羊红细胞,制成副猪嗜血杆菌5型间接血凝诊断液,检测该诊断液的活力及特异性。【结果】该诊断液特异性强,仅与副猪嗜血杆菌5型阳性血清发生凝集反应。活力也比较高,达到1:512以上,可以用其进行副猪嗜血杆菌疫苗免疫后抗体检测。【结论】该间接血凝诊断液成功制备为广大兽医化验人员提供一种简单、快速、经济的检测副猪嗜血杆菌抗体的方法,为副猪嗜血杆菌病的诊断和防治提供一种有效的手段 相似文献
4.
奶牛妊娠的早期诊断至关重要,妊娠相关糖蛋白6(PAG6)是母体胎盘组织分泌至外周循环中的特异蛋白质,因此,本研究致力于制备牛妊娠相关糖蛋白6快速检测试纸条。制备牛妊娠相关糖蛋白6多克隆抗体,将其稀释后加样至NC膜上,通过固定和封闭制备出一种可检测boPAG6的快速检测试纸条,在试纸条上加入待检血清进行孵育后洗涤,再加入二抗孵育后洗涤,最后加入显色液显色后进行快速检测。标准化快速检测试纸条是将抗体用PBS稀释成10μg/mL点样至NC膜上,在37℃温箱中固定抗体30 min,经5%的脱脂奶粉封闭后制成。待检血清滴加至试纸条后,在37℃温箱中孵育1 h后,进行洗涤和二抗孵育,最后在DAB显色试剂盒作用下显色3 min即可判定。临床检测的初步应用表明,在未孕与怀孕奶牛的混合血清中仍然可以判定是否怀孕,快速检测试纸条特异性强;血清在稀释3200倍的最低检测限时,快速检测试纸条的敏感性良好;而且该结果与ELISA的符合率在80%之上。试验重复性良好,并能在4℃和-20℃条件下保存2周。建立了一种奶牛早期妊娠诊断的快速检测试纸条并应用于初步的妊娠诊断。 相似文献
5.
应用PCR方法检测鸡传染性贫血病毒 总被引：1，自引：1，他引：1
根据鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列，设计一对引物扩增基因组上nt358～nt1042之间684bp DNA片段。在CIAV感染MDCC-MSBl细胞系中提取核酸为模板可扩增出相应DNA片段，且以感染细胞核酸为模板反应敏感性可达1fg，而以其他病原核酸为模板扩增结果均为阴性。应用该PCR方法对实验感染鸡肝脏、脾脏、胸腺、肾脏、法氏囊、骨髓、白细胞、泄殖腔棉拭子等不同样品进行检测，均可扩增出相应DNA片段。证明我们建立的PCR方法敏感性特异性强，可用于临床感染不同组织CIAV的检测。 相似文献
6.
3种中药复方提取液对肉鸡生理、免疫指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为探讨复方中药提取液对肉鸡生理机能的影响,验证中药改善肉鸡生产性能的功效,研究以党参、黄芪、六神曲、麦芽、山楂等组方,设计3个中药复方(方Ⅰ、方Ⅱ和方Ⅲ),水提后浓缩,1日龄开始混饮健康肉鸡(0.5%),并进行免疫器官指数、血清蛋白、血清酶、新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)血清抗体滴度、白介素2(Interleukin-2,IL-2)、白介素3(Interleukin-3,IL-3)及平均日增重、料肉比、死亡率测定。结果显示,3个复方中药提取液对肉鸡免疫器官发育、血清蛋白及天冬氨酸转移酶(AST)、丙氨酸转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)含量没有影响(P0.05),方Ⅱ组肉鸡21、28日龄血清碱性磷酸酶(ALP)含量显著高于对照(P0.05);试验鸡21日龄时,3个复方中药组NDV抗体滴度显著高于对照(P0.05),28日龄时方Ⅰ组抗体滴度极显著高于对照(P0.01),方Ⅲ组抗体滴度显著高于对照(P0.05);方Ⅰ组IL-2活性在21日龄、28日龄时显著高于对照(P0.05),方Ⅲ组IL-2活性在21日龄时显著高于对照(P0.05),方Ⅰ组IL-3活性在28日龄时显著高于对照(P0.05);试验鸡28日龄时,方Ⅰ、方Ⅱ2组平均日增重高于对照,最高为方Ⅱ组72.72g/天,方Ⅰ、方Ⅱ2组料肉比低于对照,最低为方Ⅱ组2.08;死亡率最低为方Ⅰ组1%。上述结果表明,3个复方中药提取液安全性较高,对肉鸡生理机能均有一定改善作用,其中方Ⅰ在延缓血清抗体滴度降低速度,促进细胞因子分泌方面效果明显,而方Ⅱ在提高肉鸡生产性能方面效果较好。 相似文献
7.
旋毛虫基因重组抗原快速ELISA诊断试剂盒的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
用旋毛虫基因重组抗原（TSRA）建立了诊断猪旋毛虫病的快速ELISA诊断试剂盒，用TSRA和旋毛虫肌幼虫排泄－分泌抗原（ES）分别对12份人工感染旋毛虫病猪血清进行快速ELISA检测，阳性率为100％。在猪旋行虫病发病区随机采集103份血清和肉样，分别用TSRA和ES作抗原对血清进行快速ELISA检测，结果显示，它们与肌肉消化法的诊断符合率分别为95．12％和96．3％，研究证明，用TSRA组装的诊断试剂盒具有良好的灵敏性，特异性和重复性。 相似文献
8.
9.
目的检测细菌多糖对草鱼的免疫调节作用。方法用酚水法分别从大肠杆菌和根癌农杆菌细胞壁中提取出粗多糖,注射草鱼,测定受试草鱼血液中白细胞数量,血清中抗体效价,肝脏、肾脏、脾脏、血清和粘液中过氧化物酶的活力。结果受试草鱼中的白细胞数量、血清抗体效价及过氧化物酶活力均具有明显提高。结论大肠杆菌和根癌农杆菌粗多糖对草鱼有免疫促进作用。 相似文献
10.
淘汰猪瘟抗体不合格种猪对母猪繁殖性能和仔猪生长性能的影响研究 总被引：3，自引：2，他引：1
应用Herdchek猪瘟抗体检测试剂盒对3个规模化猪场送检的1865份血清样品进行猪瘟抗体的测定,淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格（阻断率＜50%）的种猪,观察并记录淘汰猪瘟抗体不合格种猪后猪场种猪繁殖性能和小猪生产性能指标的变化情况。结果显示：3个猪场（A、B、C）淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格种猪后,平均窝产仔数分别提高了0.29头（P<0.05）、0.40头（P<0.01）、0.39头（P<0.01）;平均窝产活仔数分别提高了0.54头（P<0.01）、0.35头（P<0.01）、0.62头（P<0.01）;平均窝产断奶仔猪数分别增加了0.65头（P<0.01）、0.71头（P<0.01）、0.81头（P<0.01）;3个猪场（A、B、C ）30-60日龄小猪增重差异均极显著（P<0.01）;3个猪场（A、B、C）的母猪受胎率、仔猪断奶成活率和30-60日龄小猪成活率均有不同程度的提高,但差异均不显著（P＞0.05）。由此表明：淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格种猪后可以显著提高猪场母猪繁殖性能和小猪的生产性能。 相似文献
11.
比较3种提取猪血清中免疫球蛋白IgG方法的提取效果。分别用辛酸沉淀法,硫酸铵分步沉淀法,辛酸-硫酸铵沉淀法粗提猪血清免疫球蛋白IgG,并通过SDS-PAGE凝胶电泳、AlphaEaseFC凝胶成像分析软件、Bradford蛋白浓度测定法等比较3种方法的提取纯度和得率,同时比较3种方法的时效性和经济性。辛酸沉淀法提取IgG所用时间最短,只需1h,得率较高但纯度不高;硫酸铵盐析法提取的IgG纯度较高、得率也高,但时间较长;辛酸-硫酸铵分步沉淀法所得IgG纯度很高,但所用时间较长,得率也较低。3种提取方法各有特点,可根据不同的实验条件和目的选择不同的提取方法。 相似文献
12.
制备了一种特异性强的抗对位红的多克隆抗体。采用混合酸酐法将活化的对位红半抗原与阳离子化牛血清白蛋白（cBSA）偶联成免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体,利用紫外分光光度计分析结合物的结合情况,间接ELISA和间接竞争ELISA分析抗体特性。紫外扫描分析的免疫原对位红与蛋白结合的偶联率为14:1,间接竞争ELISA法分析多克隆抗体效价达到1×106,50%抑制率检测限为7.43 ng/mL,检测的对位红线性范围在0.1 ng/mL～1μg/mL,抗体与对位红和苏丹红I交叉反应率分别为100%和97.8%,与苏丹红II、III、IV和甲苯胺红的交叉反应率很低,与罗丹明类色素无交叉反应。制备的对位红多克隆抗体具有很高的特异性,与其他色素交叉反应率低,可用于对位红在食品中残留的检测。 相似文献
13.
14.
板蓝根粗多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用 总被引：1，自引：0，他引：1
将试验小鼠分为对照、模型和剂量(低、中、高)组,建立免疫抑制模型。对照组、模型组饲喂基础饲料,剂量组分别饲喂含不同板蓝根粗多糖的饲料。6周后测小鼠血常规指标、脏/体比、血清白介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果表明,免疫抑制小鼠的白/红细胞数、血小板数和血红蛋白值均随粗多糖剂量的增加而增大;体增质量对照组最大,低、中、高剂量组和模型组依次递减;各剂量组脏/体比均明显小于对照组;各剂量组小鼠血清中IL-2和TNF-α水平均显著上升。说明板蓝根粗多糖能提升小鼠免疫功能,但对小鼠的发育有一定影响。 相似文献
15.
研究旨在从分子生物学角度研究新城疫病原F基因,探究NDV F基因的遗传变异情况及其蛋白结构。提取新城疫病毒基因组RNA,根据GenBank中已知的NDV La Sota株序列设计引物扩增F基因,将其克隆到pMD18-T载体后进行鉴定,对鉴定正确的重组质粒pMD-NDV-F进行测序分析。应用生物信息学软件对新城疫病毒F基因进行系统进化树分析、氨基酸序列同源性分析、蛋白结构跨膜区分析及F蛋白三级结构的预测。核苷酸序列测定结果表明：F基因为1792 bp,共编码553个氨基酸;生物信息学分析结果表明：F基因在种属间具有较高的保守性,试验获得的F基因与NDV La Sota、Clone30、V4、B1等弱毒株的一致性较高,具有典型的弱毒株特性,F基因的氨基酸序列与新城疫病毒La Sota株F基因的序列同源性最高可达100%;F蛋白的三级结构预测结果显示：F蛋白部分片段与新城疫病毒F蛋白融合片段的相似性为96%。研究为新城疫病毒的分子病毒学研究奠定了基础。 相似文献
16.
本文研究普洱茶对被动吸烟小鼠生长性能和血液指标的影响。180只小鼠分为3组，空白组不吸烟、灌服生理盐水；试验Ⅰ组吸烟、灌服生理盐水；试验Ⅱ组吸烟、灌服普洱茶。饲养周期35d。试验Ⅰ组小鼠末体重和平均日增重显著低于（P < 0.05）试验II组，试验II组低于（P < 0.05）空白组。血红蛋白浓度和碳氧血红蛋白浓度，空白组和试验II组差异不显著，显著小于（P < 0.05）试验I组；红细胞平均血红蛋白浓度，试验组Ⅰ和II差异不显著，显著高于（P < 0.05）空白组。本试验结果证明，普洱茶可以显著改善被动吸烟小鼠生长性能和红细胞载氧功能，缓解烟毒危害。 相似文献
17.
18.
为了探讨新城疫病毒(NDV)对雏鸵鸟肾脏超微结构的影响。以45天雏鸵鸟为试验动物,分正常组和攻毒组（皮下注射鸡新城疫标准毒株F48E9）;利用透射电镜(TEM)技术,观察攻毒组鸵鸟肾脏的超微结构。结果表明：攻毒组鸵鸟肾脏肾小体和肾小管均有明显变化,肾小体内皮细胞肿胀,囊腔缩小,滤过屏障受损;肾小管以空泡变性为主,上皮细胞肿胀,微绒毛减少或断裂,胞核固缩、染色质呈块状边集于核膜下或溶解减少,胞浆内可见大量溶酶体,线粒体嵴断裂、空泡化。结果提示,鸡源NDV对雏鸵鸟肾脏高度敏感,可引起肾脏组织明显的病理组织学变化。 相似文献
19.
20.
为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星(Sarafloxacin,SARA)单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1∶128 000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1∶512 000,IC_(50)为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×10~8L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。 相似文献