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为了验证来自益母草Leonums japonicusHoutt种子的抗菌蛋白基因LjAMP1和LjAMP2对植物病害的广谱抗性,用根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导法,将其分别转入台湾圣女番茄品种。结果显示,利用黄萎病菌毒素浸泡番茄离体枝条,处理24h,空载转基因对照和非转基因再生植株枝条全部萎蔫,而LjAMP1和LjAMP2转基因番茄T0代枝条未出现萎蔫的株系比率分别为11.11%和6.25%;用离体叶片接种菌块,分别对T0代抗或耐黄萎病菌毒素的T1代株系接种早疫病菌,接种10天,空载转基因对照和非转基因再生植株的病情指数达到100,而LjAMP1和LjAMP2转基因番茄病情指数最低的株系分别为17.5和10.0,表明转基因番茄能同时提高对黄萎病菌毒素和早疫病的抗性;进而用叶盘法检测转基因植株对番茄青枯病菌的抑制作用,结果显示对真菌病害抗性强的转基因植株叶片对青枯病菌的抑菌圈更大。转基因番茄抗病鉴定结果表明,来自益母草种子的LjAMP1和LjAMP2基因对植物病害具有广谱抗性。 相似文献
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应用组织培养技术离体筛选枸杞抗根腐病变异体的研究 总被引：12，自引：0，他引：12
用宁夏枸杞-宁杞1号的髓组织进行离体培养,诱导产生胚性愈伤组织,并用60Co-γ射线进行诱变,以枸杞根腐菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlecht)菌株产生的培养滤液为选择剂,筛选抗性变异体,在含毒素60%的条件下,一次性获得抗根腐病毒素的愈伤组织,抗性愈伤组织经稳定性分析,其抗性稳定。抗性愈伤组织在含30%的毒素培养基中可分化成再生植株,共获得25株,其叶片经用根腐菌分生孢子液接种鉴定,有6株抗病;再生植株经过脯氨酸、叶绿素含量分析,二者含量都有所提高;经过过氧化物同工酶酶谱分析,抗性再生植株酶谱带数有增加;说明经筛选得到的抗性再生植株是抗根腐病的变异体。 相似文献
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用游动孢子浸根接种法对我国主产烟区的117个烟草黑胫病菌(Phyto-phythora parasitica var.nicotianae)致病性测定结果表明，黑胫病菌茵株问致病性存在明显差异，病情指数范围4．66—84．30，强、中和弱致病性菌株各占11．1l％、58．97％和29．91％。对国内主要的59个烟草品种经室内和大田的抗病性鉴定表明，目前尚没有抗黑胫病菌的免疫品种，但不同烟草品种抗性差异明显，其中Coker371G、NC82、K346和单育三号等品种有较强的抗病性，且室内鉴定与大田鉴定结果基本一致。 相似文献
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枸杞炭疽病菌毒素的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
枸杞炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz)可产生有致病力的外毒素,其毒素可引起枸杞叶片形成黑色坏死斑,类似于病原菌侵染形成的症状。Czapek-Dox培养液适于枸杞炭疽病菌的生长和产毒,其适宜温度为25～28℃,初始pH为6,通气条件促进其生长和产生毒素。试验结果表明该毒素为多聚糖类物质,毒素液对不同品种枸杞的致病作用存在明显差异,与品种对枸杞炭疽病的抗性有关。 相似文献
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核基质结合区对马铃薯Y病毒全长非翻译CP基因介导抗病性的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
为探索核基质结合区(matrix attachment regions,MARs)对RNA介导的病毒抗性的影响,我们将从烟草中克隆到的核基质结合区TM2构建在包含马铃薯Y病毒全长非翻译CP基因的植物表达载体pRPVYCPN的表达盒的两侧,构建了植物表达载体pRTM2CPNTM2。采用农杆菌介导基因转化法,将表达载体pRPVYCPN和pRTM2CPNTM2转入烟草品种NC89中,分别获得了144株和344株转基因烟草。抗病性检测发现,核基质结合区的存在能明显提高RNA介导抗性的产生效率。在含MARs转基因植株中,抗病植株的比率为15.1%,而不含核基质结合区的转基因植株的抗病比率则为8.3%。这一研究结果对抗病毒植物的分子育种和转基因表达调控有指导意义。 相似文献
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玉米大斑病菌HT-毒素组分Ⅱ的化学结构 总被引：2，自引：0，他引：2
玉米大斑病(Exserohilum turcicum)是世界各玉米产区的重要病害之一,常造成极其严重的经济损失。Yoka等早在1975年就曾报道,玉米大斑病菌在活体外培养可以产生果胶甲酯酶等酶类物质,并可产生热稳定的对玉米具致毒作用的致病毒素(HT-毒素)。Peptiprez等(1984)报道玉米大斑病菌培养滤液经氯仿提取获得了一种含有-OH的低分子量化合物,它对玉米具有很强的生物活性。 相似文献
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大豆灰斑病菌毒素生物活性分析 总被引：11，自引：1，他引：10
大豆灰斑病菌[Cercosporium sojina(Hara) Liu&Guo]可以产生有毒代谢物。滤液透析及热稳定性测试结果表明:该毒素可以穿过半透膜,为较小分子化合物并具有很强的热稳定性。该菌培养物浸提液经浓缩,硅胶柱层析可得粗毒素。生物测定结果表明:该毒素对大豆幼苗及叶片具有致萎作用。针刺叶片可产生类似真菌感染的病斑。浸渍处理后,可使叶组织失绿、萎蔫最后坏死,同时毒素对抗性不同的品种有鉴别作用。 相似文献
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烟草花叶病普遍率与严重度的关系及感病品种与转基因抗病品系间的比较 总被引：2，自引：1，他引：2
利用田间调查取得的数据,分析了烟草花叶病在转基因抗病品系上和感病对照品种上的普遍率与严重度的关系(I-S)。结果表明感病品种的I-S关系以指数函数拟合较好;在普遍率小于35%左右时可以用直线方程(b1)拟合。在转基因抗病品系上I-S关系呈现为直线方程(b2)。b1、b2两直线方程的斜率不同,感病品种的斜率显著大于转基因抗病品系的。根据两品种(系)间的I-S关系的显著差异,从流行学角度探讨了转基因抗病品系对压低流行强度的作用、并分别用抗感品种(系)建模以外的另一种数据对利用普遍率估测严重度的可行性进行验证,抗感品种(系)预测的平均准确度分别为85.9%和83.3%。 相似文献
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β-氨基丁酸诱导烟草产生PR蛋白及对TMV的抑制作用 总被引：1，自引：0，他引：1
本文研究了β-氨基丁酸(BABA)诱导系统侵染寄主烟草NC89产生PR蛋白及其对TMV的抑制作用。用5mmol/LBABA对抗性烟和非抗性烟进行叶面喷施处理均可以抑制烟草叶片中TMV的产生,平均抑制率分别达到59%和49%。BABA和SA处理均可以诱导2种烟草叶片中PR1、PR2和PR5基因的表达,其中对PR1的诱导作用相对较强。分别用BABA和SA处理非抗性烟草,在处理后的不同时间内2种药剂对PR1基因的诱导规律基本相同。用BABA和SA分别预处理非抗性烟草2d后接种TMV,2种药剂对烟草叶片中PR1基因的影响是完全不同的,其中,BABA处理后接种TMV抑制PR1基因的表达,在接种后第72h已经检测不到PR1基因的存在,SA处理后接种TMV对PR1基因的影响呈现弱-强-弱的变化趋势,在接种后第24hPR1的表达量达到最强,以后逐渐减弱。试验结果表明:BABA能够提高非抗性烟草对TMV的抗性,但是BABA诱导烟草产生抗TMV的作用机制可能是一种不同于目前普遍公认的SA的作用机制。 相似文献
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本文研究了赤星菌(Alternaria alternata)弱毒株TBA16的灭活孢子制剂PCF1对烟草抗赤星病的诱导作用,及在田间控制赤星病的效果和对烟叶产量、品质等性状的影响。在温室内幼苗上,PCF1可明显诱导烟草对赤星病的系统抗性,抗性诱导效应为57％—89％。在山东5个主要产烟县进行的田间试验表明,PCF1有3种作用:①可以明显控制赤星病的发生程度,效果与用作对比的化学农药菌核净相当或略低,在烟草生长后期防治效果可达76％;②增强烟株生长和叶片扩展能力,使烟叶(烘烤后)产量提高7％—38％;③明显改善烟叶内在品质、增加上中等烟叶的比例,使产值提高17％。 相似文献
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hpRNA的茎环比例对RNA介导的病毒抗性产生的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
以马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因3'端50bp片段为hpRNA的茎,以pUC19不同长度的序列为hpRNA的环,构建了茎环比例分别为4:1、2:1、1:1、1:2、1:4和1:8的植物表达载体。利用农杆菌介导法转化烟草品种NC89,获得了多种转基因植株。室内抗病性检测发现:不同茎环比例的hpRNA介导的病毒抗性效率不同;茎环比例为4:1、2:1和1:1时效率较高,抗性植株的比例达60%左右;随着环长度的逐渐增加,抗性植株的比例逐渐降低;当茎环比例为1:8时,抗性植株的比例仅为9.52%。Southern blot分析结果表明:外源基因已整合于烟草的基因组中,且转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性。Northern blot分析结果表明:目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的。 相似文献
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马铃薯Y病毒复制酶基因不同位置cDNA区段介导对PVY的不同抗性 总被引：2，自引：2，他引：0
为探究靶序列位置对RNA介导的病毒抗性产生的影响,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)复制酶基因(nuclear inclusion b,NIb)不同位置的cDNA区段,反向插入双元载体pROKII中,构建了发夹RNA(hairpin RNA,hpR-NA)结构的植物表达载体。将构建的植物表达载体采用冻融法转入农杆菌LBA4404,叶盘法转化烟草NC89,获得转基因植株。攻毒试验表明:PVYNIb基因不同位置cDNA区段介导的对PVY的抗性存在显著差异;3′端1/2处和中间位置的序列可介导高水平的病毒抗性,抗性植株的比例在50%以上,而5′端、5′端1/2处和3′端的序列介导的抗性效率较低,抗性植株的比例仅为10%~30%。Northern杂交显示:抗病植株中RNA的积累量明显低于同类型的感病植株,抗性与RNA积累量呈负相关;抗病转基因植株中有siRNA存在,表明病毒抗性是由RNA介导的。 相似文献
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利用RNA介导的抗病性获得抗2种病毒的转基因烟草 总被引：11，自引：0，他引：11
RNA介导的病毒抗性(RMVR)是近年发展起来的一种新的植物抗病毒基因工程策略,具有抗病性强、抗性持久、生物安全性高等特点。利用该策略培育多抗病毒植株具有广阔的应用前景和重要的实践意义。本研究将非翻译的马铃薯X病毒的衣壳蛋白(PVX-CP)基因和非翻译的马铃薯Y病毒的衣壳蛋白(PVY-CP)基因组成嵌合基因,构建植物表达载体pROKXY,利用农杆菌介导法转化烟草NC89,获得6株对PVX和PVY的混合侵染表现为免疫的转基因植株。分子分析表明,这种抗性为RNA介导的病毒抗性。这一研究结果为利用RMVR进行植物多抗病毒育种提供了重要数据和资料。 相似文献
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烟草品种对烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒的抗性鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
2010-2011年采用大田人工接种鉴定的方法,对生产中大面积推广使用的24份烟草品种进行了烟草花叶病毒（TMV）和黄瓜花叶病毒（CMV）的抗性鉴定。结果表明,供试品种对TMV和CMV的抗病性存在较大差异,对TMV表现抗病的有Coker86、吉烟5号、Coker176、CV87、辽烟8号、CV91、中烟90等7份材料;表现中抗的有秦烟98、双抗70、C151等3份材料;表现中感的有秦烟96、G80、金星6007、龙江981、K326、秦烟201、NC89等7份材料;表现感病的有G28、云烟97、净叶黄、红花大金元、RG11、云烟85、云烟87等7份材料。对CMV表现抗病的有Coker86、龙江981、C151、秦烟201、云烟87等5份材料;表现中抗的材料是金星6007;表现中感的有CV91、RG11、Coker176、中烟90、K326、红花大金元、净叶黄、G80、G28等9份材料;表现感病的有秦烟98、云烟85、秦烟96、NC89、双抗70、云烟97、CV87、辽烟8号、吉烟5号等9份材料。其中兼抗TMV和CMV两种病毒病的材料有2份,分别是Coker86和C151。同时研究还发现,抗病性不同的烟草品种在受到病毒危害以后,对烟叶的产量和品质的影响也不同。明确了中国24个烟草品种的抗病性水平,为抗病品种的利用与品种合理布局提供科学依据,同时为烟草抗病毒病育种的亲本选择提供抗源信息。 相似文献
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马铃薯Y病毒CP基因5'端和3'端反向重复结构介导的抗病性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究克隆了来源于马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)外壳蛋白(CP)基因(PVYN CP)5'端和3'端的反向重复cDNA序列,并构建了植物表达载体pROKⅡ-5'IR和pROKⅡ-3'IR,利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草NC89,分别获得166和126株转基因烟草。抗病性试验表明,转化PVYN CP基因3'端茎50 bp(环50 bp) hpRNA(hairpin RNA)的烟草抗病率达69%,而转化PVYN CP基因5'端相同片段长度的hpRNA的烟草却全部发病。Southern blot结果表明,转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性;Northern blot结果表明,目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的抗病性。研究结果证明PVYN CP基因的3'端比5'端更能有效地诱发基因沉默,并且hpRNA茎部的长度可减少到50 bp。该结果为探索利用CP基因的最短长度和有效部位的基因片段来培育多抗病毒转基因植物提供了依据。 相似文献
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C. Colella C. Miacola M. Amenduni M. D'Amico G. Bubici M. Cirulli 《Plant pathology》2008,57(3):533-539
Fifty-seven wild olive accessions collected from the Mediterranean basin were screened under greenhouse conditions for their resistance to verticillium wilt. Plants were root-dip inoculated. One defoliating and one non-defoliating isolate of Verticillium dahliae , both obtained from diseased plants in southern Italy, were used. Plants of the highly susceptible cv. Cima di Mola, frequently used as a rootstock in Apulia, were also included in this test. Disease reactions were evaluated on the basis of external symptoms, vascular browning and by calculating areas under disease progress curves ( audpc ). On the basis of audpc values and external symptom severity, accessions were grouped into four phenotypic groups: highly resistant, moderately resistant, susceptible and highly susceptible. Three accessions showed high resistance to both V. dahliae pathotypes. Forty resistant plants were selected from accessions that had shown the highest levels of resistance. Clones were obtained from each of these plants by in vitro micropropagation for further testing. Ten clones showed the resistance characteristics of their original mother plants, while others suffered greater levels of disease severity than their mother plants. Several new olive rootstocks were identified that were highly resistant to verticillium wilt and could be included in breeding programmes for resistance of olive to V. dahliae . 相似文献
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Expression of Endochitinase from Trichoderma harzianum in Transgenic Apple Increases Resistance to Apple Scab and Reduces Vigor 总被引：1，自引：0，他引：1
ABSTRACT The goal of this research was to improve scab resistance of apple by transformation with genes encoding chitinolytic enzymes from the bio-control organism Trichoderma harzianum. The endochitinase gene, as cDNA and genomic clones, was transferred into apple cv. Marshall McIntosh by Agrobacterium-transformation. A total of 15 lines were identified as transgenic by NPTII enzyme-linked immunosorbent assay and polymerase chain reaction and confirmed by Southern analysis. Substantial differences in endochitinase activity were detected among different lines by enzymatic assay and western analysis. Eight lines propagated as grafted and own-rooted plants were inoculated with Venturia inaequalis. Six of these transgenic lines expressing endochitinase were more resistant than nontransformed cv. Marshall McIntosh. Disease severity compared with cv. Marshall McIntosh was reduced by 0 to 99.7% (number of lesions), 0 to 90% (percentage of leaf area infected), and 1 to 56% (conidia recovered) in the transgenic lines tested. Endochitinase also had negative effects on the growth of both inoculated and uninoculated plants. There was a significant negative correlation between the level of endochitinase production and both the amount of disease and plant growth. 相似文献