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1.
为探讨急性操作胁迫对银鲳生长的影响,首次克隆了3种生长调控相关基因-生长激素受体1(ghr1)、生长激素受体2(ghr2)和胰岛素样受体1(igfbp1),并对3种基因在银鲳肝脏、心脏、性腺、肌肉和肾脏等不同组织中的表达进行了比较。定量表达结果表明3种基因均广泛分布于所研究的各个组织中,而其中肾脏、性腺和心脏中的表达量较其它组织低。在银鲳受到外界操作胁迫刺激后,3种基因呈现不同的表达模式:其中ghr2和igfbp1的表达下调,而ghr2的表达量与对照组无显著性差异。结果表明,ghr2和igfbp1在银鲳生长调节中起到重要的作用;在胁迫环境中,外界刺激可通过下调生长相关基因表达以影响鱼体的生长。 相似文献
2.
用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性 总被引：13，自引：0，他引：13
根据激素一受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的Ａ昌鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体，采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ－ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３￣０．１２５ｕｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５ｕｇ 相似文献
3.
黄颡鱼生长激素cDNA序列克隆及其序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
采用RT-PCR方法,首次从黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)脑垂体总RNA中克隆出生长激素(growth hormone,GH)cDNA的开放阅读框ORF(open reading frame)序列,长603nt,推导的GH前体由200个氨基酸组成。以生长激素氨基酸序列为分子标记,比较了包括黄颡鱼在内的鲇形目6科9种鱼类的生长激素氨基酸序列同源性,并用PHYLIP软件构建了鲇形目6科9种鱼类的系统发育树,可识别3个大的单系类群,即类群Ⅰ:鲇科Siluridae;类群Ⅱ:芒鲇科Pangasiidae (鱼尝科Bagridae 异囊鲇科Heteropneustidae);类群Ⅲ:鱼回科Ictaluridae 胡子鲇科Clariidae。 相似文献
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5.
《水产科学》2021,(5)
钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)为参与细胞内pH及细胞增殖调控的关键因子。用RACE末端PCR方法得到黑鲷CHP2(AsCHP2)基因全长cDNA,并利用生物信息学方法分析该基因的序列特征与同源性;同时利用实时荧光定量PCR方法检测AsCHP2的mRNA在黑鲷整体仔鱼,90 d、180 d黑鲷,杂交F_2(真鲷♂×黑鲷♀)及回交F_1(黑鲷♂×杂交F_1♀)的脑、心脏、肌肉、肝脏和性腺等组织中的表达。研究结果表明:(1)AsCHP2 cDNA序列全长1722 bp, 5′-非编码区(UTR)长度69 bp, 3′-UTR长度1069 bp,开放阅读框长度为585 bp,编码194个氨基酸;其结构域包含2个EF-hand结构及1个核输出信号;其蛋白分子质量为21.87 ku,理论等电点为4.89;同源建模获得了CHP2的二级与三维结构。AsCHP2基因的核苷酸序列与其他鱼类的相似性为86%～81%,编码的氨基酸序列与其他鱼类的相似性为80%～72%。邻接系统树显示了黑鲷CHP2氨基酸序列与其他鱼类的进化关系。序列比对与结构分析表明,AsCHP2基因具有典型的CHP2基因结构。(2)AsCHP2的mRNA在黑鲷的仔鱼期(5～35 d)及大规格个体的脑、肝脏及肌肉组织中均有表达,在90 d个体各组织中的表达量均高于在180 d个体各组织中的表达量;在180 d黑鲷、杂交F_2及回交F_1的个体中,基因在脑、肝脏、肌肉及性腺等不同组织中均有表达,且均在心脏中高表达、在性腺中低表达。这些结果显示,CHP2基因在海水鱼类的生长、发育过程中发挥功能。 相似文献
6.
鲮生长激素基因cDNA的分子克隆和序列分析 总被引：3，自引：2，他引：3
根据生长激素(growth hormone,GH)基因的保守性序列设计1对引物,利用RT—PCR技术从鲮(Cirrhina molitorella)脑垂体组织中克隆出经生长激素成熟肽cDNA片段,将纯化的DNA片段克隆到pUCm—T载体上。克隆的鲮GH cDNA开放阅读框全长567bp,编码由188氨基酸残基组成的生长激素成熟肽。序列分析结果表明,鲮GH成熟肽氨基酸序列与另2种鲮—印鲮(Cirrhina mrigal)和南亚野鲮(Labeo rohita)的成熟肽氨基酸序列同源性分别为87％和83％,与鲤的成熟肽氨基酸序列同源性为96％,并对9个科的17种鱼进行了分子系统进化树分析,结果与根据传统的形态学和生化特征分类进化地位基本一致。本研究所克隆的基因序列和推测的蛋白质序列已登录入GeoBank、EMBL和DDBJ基因库,序列号分别为AF458105和从AAL151107．1。 相似文献
7.
《河北渔业》2013,(3)
鱼类的生长主要靠生长激素/胰岛素样生长因子轴(growth hormone/insulin-like growth factors,GH/IGFs)所调控,而生长激素(Growth hormone,GH)和类胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)是GH/IGFs中两种最重要生长调控因子。体外重组表达的GH和IGF-Ⅰ蛋白都具有增强食欲、提高饲料转化率,加速鱼体生长的活性,可以作为高效生物饲料添加剂,在水产养殖具有广泛的适用性。本文从重组表达鱼类促生长因子蛋白研制的必要性、作用机理、表达情况以及在水产养殖应用情况方面进行总结,以期为重组表达鱼类促生长因子蛋白的工厂化制备提供参考。 相似文献
8.
大鳞大马哈鱼生长激素抗体的制备与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
本文用大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）免疫日本大耳白兔制备了特异抗血清。应用常规酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）对抗血清效价和特异性进行了测定，结果表明ｓＧＨ抗血清只与ｓＧＨ特异反应，与草鱼ＧＨ、草鱼催乳素（ＰＲＬ）、牛ＧＨ及大群大马哈鱼促性腺激素（ｓＧｔＨ）等基本上没有交叉反应，该抗血清的效价约为１：７００００左右。应用ｓＧＨ抗血清，初步建立了ｓＧＨＥＬＩＳＡ检测方法。 相似文献
9.
IPTG诱导含有鲮（Cirrhinus molitorella）生长激素基因（growth hormone,GH）的工程菌M15（pQE30-GH）重组表达鲮生长激素蛋白。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,在24.5kDa处有1条重组表达鲮生长激素条带,经分离纯化、复性和浓缩后得到有活性的重组鲮生长激素蛋白。以复性浓缩后的重组鲮生长激素蛋白为抗原,采用改进的方法对新西兰大白兔进行皮下多点免疫注射,获得兔抗鲮生长激素多克隆抗体。经ELISA检测该免疫血清的滴度为12800。以该多抗为一抗,Western blotting可以检测到10ng的抗原量;并且在鲮垂体组织提取液中和血清中检测到一种能与该血清作用的大小约为21.5kDa的蛋白条带。说明该试验所制备的兔抗鲮生长激素多克隆抗体具有较好的免疫活性。 相似文献
10.
瓦氏黄颡鱼生长激素基因克隆及其组织特异性表达分析 总被引：1，自引：1，他引：0
生长激素(growth hormone,GH)对脊椎动物的生长发育及代谢具有重要作用。采用RT-PCR和RACE技术,克隆了瓦氏黄颡鱼垂体GH cDNA全长序列,应用real-time qPCR法对不同组织中GH mRNA的表达进行检测。序列分析表明,GH cDNA(GenBank登录号:GU395549)序列全长1 203 bp,其5’端非编码区77 bp、3’端非编码区523 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)603 bp,由此推导GH前体蛋白由200个氨基酸组成。同源性比较结果表明,瓦氏黄颡鱼与同目鱼类的GH编码序列同源性较高,与哺乳类和鸟类的同源性较低。Real-time qPCR结果显示,GH mRNA在垂体中的表达量最高,其次是脑、肌肉、肝脏、脂肪组织、胃、脾脏、卵巢或精巢,而在肾脏、心脏、鳃和肠中没有明显的表达。实验结果表明,GH基因在瓦氏黄颡鱼组织中广泛表达,提示GH可能以旁分泌或自分泌的方式对其生长和繁殖发挥重要作用。 相似文献
11.
家蚕多角体病毒表达系统在家蚕体内表达基因重组的草鱼生长激素(r-gGH)，具有与天然草鱼生长激素(GH)相似的免疫原性和生物活性。为了节省基因工程研究中的下游工作 (基因产物的分离和提纯)，本研究将含有r-gGH的家蚕直接作为饵料源，冻干并磨碎后拌在饵料中投喂草鱼鱼种，通过养殖实验及生化测定分析对比r-gGH促进草鱼鱼种生长的剂量依存关系，筛选活性强的处理剂量和处理时间，期望为鱼类养殖生产提供一种较为经济、来源容易、方法简易而又切实可行的促进鱼种生长并且可以大规模应用的方式。实验结果表明，投喂含有r-gGH的家蚕，有相当一部分被鱼体消化道吸收，进入血液循环。投喂2 h和6 h 后，草鱼鱼种的血清GH水平均显著高于对照组(投喂基本饲料)和投喂正常家蚕组；每天投喂和隔2天投喂，均使草鱼鱼种的血清GH水平显著升高，并对草鱼鱼种生长都有明显的促进作用。短期(3 d)和长期(42 d)投喂含有r-gGH 的家蚕，无论是低剂量(10 mg·g-1饲料)还是高剂量(20 mg·g-1饲料)，均极其显著地提高草鱼鱼种的血清GH水平；长期(42 d)投喂亦对草鱼鱼种的生长有显著的促进作用，鱼体的相对体重增长率、相对体长增长率、食物转化率和肥满度显著增加。 相似文献
12.
转生长激素基因鲤的快速生长效应及传代 总被引：3，自引：0，他引：3
报道了转生长激素基因鲤阳性群体的建立科“超级鲤”的获得。给出了“超级鲤”和对照组连续4年的生长实验结果及“超级鲤”子代连续3年的生长对照的体重数据。结果显示,外源生长激素基因对受体鲤具有快速生长效应,但具有这种超速生长作用的个体在转基因鲤群体中占极少数。此效应能传递给子代,子代中快速生长个体的比例大大高于转基因实验群体。 相似文献
13.
T. T. Chen L. B. Agellon C. M. Lin H. J. Tsai Peijun Zhang L. I. González-Villasénor D. A. Powers 《Fish physiology and biochemistry》1989,7(1-6):381-385
The primary structures of two rainbow trout growth hormone mRNAs (GH1 and GH2) have been deduced by direct sequencing of their
respective cDNA clones and portions of the mRNA. Both GH1 and GH2 mRNA contain open reading frames comprised of 630 nucleotides
and encode 210 amino acid residues of which 11 are variant. The translated regions of both mRNA are flanked by a short but
rather conserved 5′-end, and a relatively long but highly diverged 3′-end. The differences at translated and 3′-untranslated
regions suggest that the GH1 and GH2 mRNA originate from different loci. The GH1 and GH2 mRNA are likely transcribed from
two distinct loci which were duplicated during tetraploidization of salmonid genome between 50 to 100 million years ago.
The GH2 gene has been isolated and sequenced from a rainbow trout genomic library. This gene spans a region of approximately
4 kilobases. The trout GH gene is comprised of 6 exons and 5 introns, in contrast to 5 exons and 4 introns in mammals. The
additional intron in the trout gene interrupts the translated regions that are analogous to the last exon of the mammalian
counterpart. The alleged internally repeating sequences in mammalian GH, prolactin (Pr1) and placental lactogen (PL) are not
observed in the predicted polypeptide sequence of trout GH. In addition, direct repeats that flank exons I, III and V of mammalian
GH, Pr1 and PL genes are absent in trout gene. These findings indicate that the rainbow trout GH gene structure does not support
the current hypothesis that internally repeated regions in GH, Pr1 and PL arose from a small primordial gene. 相似文献
14.
约10000余尾注射牛和羊生长激素基因的鲤鱼已被生产出来，并从中筛选出生长速度快且整合了外源基因的个体143尾，也证明外源基因可传递给子代同时子代也具有快速生长的特征。建立了把外源基因直接注入受精卵的方法，确定了注入外源基因的最佳时期。 相似文献
15.
Shunsuke Moriyama Katsuo Tashiro Suehiro Furukawa Hiroshi Kawauchi 《Fisheries Science》2008,74(4):860-866
ABSTRACT: The ability of salmon growth hormone (sGH) to accelerate the somatic growth of juvenile abalone Haliotis discus hannai by immersion was examined. After immersion for one hour into a sGH-rich solution at a concentration of 30 mg/L, the sGH immunoreactivity in the body fluid of abalone was maximal after one day, and levels were still detectable at two days. No immunoreactivity was observed in the control group. Following immersion for one hour at one or two-week intervals for 120 weeks into the sGH-rich solution at 30 mg/L, the sGH-immersed abalone exhibited a significant increase in shell length and body weight. On the other hand, abalone immersed into a salmon prolactin (sPRL)-rich solution at 30 mg/L for one hour showed a lower increase in both shell length and body weight than the sGH-immersed abalone. No increases in shell length and body weight were observed in either the bovine serum albumin-immersed abalone or untreated controls. These results provide evidence that sGH can be transported from ambient water into the circulatory system of abalone, and can subsequently improve the somatic growth of juveniles. 相似文献
16.
17.
蓝太阳鱼生长激素全长cDNA的克隆与序列分析 总被引：7，自引：1，他引：7
The full length cDNA encoding growth hormone of a freshwater fish, Lepomis cyanellus, (LcGH) was cloned from pituitary RNA with RT-PCR, 3‘ and 5‘ RACE (rapid amplification of cDNA ends). The LcGH cDNA (Genbank No. AY530822), about 989nt (nucleotide) long, consisted of a open reading frame with 615nt long, 5‘and 3‘untranslated regions with 93nt and 224nt long respectively, and a 57nt poly (A) tail. The DNA sequence analysis showed that there are typical Kozak sequence and polyadenylation signal. The pregrowth hormone peptide of 204aa deduced from LcGH cDNA included a putative signal peptide (17aa) locating in its Nterminal. There exist a Asn-Cys-Thr glycosylation site at amino acid 201, and 4 cysteine residues (No. 69, 177, 194, 202) that are essential to construct two S-S bonds in this pregrowth hormone peptide. Homological comparision among LcGH and other species growth hormones showed that There is high homology (more than 85%) between growth hormone of Lepomis cyanellus and that of most perciformes fish, but low homology (less than 70%) in comparison with other species such as Siluriformes and Cypriniformes fish. 相似文献