小鼠半胚冷冻的研究     

张涌  王建辰 《西北农业大学学报》1991,19(4):1-7

对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究，证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解决半胚的成活率：①在含10%甘油的磷酸缓冲液中平衡35-40min；②在-6.5℃7或-7℃诱发结晶；③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min；④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮；⑤在30-35℃的水浴中解冻；⑥在含不同浓度（6.6%,3.3%,0%)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35-40min，却除甘油。将按上述程序冷冻-解冻的16对半胚移植后，获半胚鼠12只，其中5对为同卵双生。  相似文献   

山羊半胚冷冻试验   总被引：4，自引：0，他引：4  

张涌  王建辰 《中国农业科学》1991,24(1):11-16

 试验研究了诱发结晶温度、缓慢降温速度、冷冻速度、解冻温度和冷冻前短暂体外培养对半胚冷冻效果的影响，证明在下述条件下对琼脂包被半胚进行冷冻和解冻可显著提高山羊半胚冷冻效果：①在-7℃诱发结晶；②以约0.05℃/分的速度缓慢降温15分钟；③以0.3℃/分的速度降温至-35℃投入液氮；④在30-50℃的水浴中解冻；⑤在冷冻前对半胚进行2小时短暂体外培养。将按上述条件冷冻一解冻的12枚半胚移植于6只受体，结果有4只妊娠（66.7%），共产半胚羔5只（41.7%），其中包括1对异龄同卵双生羔和1对同龄同卵双生羔（33.3%）。  相似文献   

用RPE冷冻器冷冻小鼠胚胎试验     

芮荣  王建辰  钱菊汾  王光亚 《四川农业大学学报》1988,(4)

用RPE冷冻器冷冻42枚桑椹胚和13枚囊胚。冷冻液为1M甘油杜氏磷酸盐缓冲液,胚胎采用0.25ml细管包装。0℃时置入冷冻器。以1℃/分降温,-6.5～-7℃诱发结晶,再以0.5℃/分(0.3～0.8℃/分)降温至-30℃,然后投入液氮。35℃水浴解冻。桑椹胚与囊胚的冻后存活率分别为71.4％(30/42)和53.8％(7/13),差异不显著(P>0.05)。胚胎冻后发育步调很不一致。  相似文献   

自制简易胚胎冷冻器冷冻奶牛胚胎试验     

窦忠英  王新庄  樊敬庄 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1993,21(Z2):69-72

用FSH+PGF_(2)超排黑白花奶牛,以非手术方法采得7日龄早期胚胎。应用含10％甘油卵细胞培养液作为胚胎冷冻保护液,采用自制简易胚胎冷冻器冷冻,在-196℃液氮中保存。冻胚在35℃水浴中解冻,应用92.1g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS,46g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS和171.2g/L蔗糖PBSS三步脱去甘油,用含20％犊牛血清PBS将胚胎清洗2遍后装管移植。共解冻18枝冻胚,16枚可用。可用胚率为84.2％(16/18)。采用非手术方法移植16头受体牛,5头妊娠产犊,移植妊娠率为31.5％(5/16)。  相似文献   

小鼠胚胎冷冻保存条件研究     

张立苹  曹辉  刘西梅  毕延震  肖红卫  李莉  华再东  华文君 《湖北农业科学》2014,53(20):4915-4916,4930

为探索在实验室条件下最佳的小鼠胚胎冷冻保存条件.对不同发育阶段小鼠胚胎按照同一个冷冻程序进行冷冻;两个不同的冷冻程序对同一个发育阶段的小鼠胚胎进行冷冻.结果表明,-7℃平衡10 min,然后以0.3℃/min的速率迅速降至-35℃,-35℃平衡5min后投入液氮中,此冷冻程序比较适合小鼠胚胎冷冻;冷冻保存对16细胞以上的小鼠胚胎影响较小.  相似文献   

波尔山羊胚胎冷冻和移植试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

李键  马保华  张红  邓小东  曹冶  周洪群  李红 《西南农业学报》2003,16(4):116-118

用含1．5M乙二醇,0．1M蔗糖、20％NCS(V／V)的PBS液,或含1．5M乙二醇,20％NCS的PBS为冷冻保护液,将42枚A级胚胎(致密桑葚胚16枚,早期囊胚26枚)一并移入冷冻保护液,并进行快速冷冻,在降温至-36℃时将胚胎投入液氮保存。解冻时,胚胎细管先在室温(20～22℃)空气中停留15s后进入水浴快速解冻,解冻后一步除去保护剂,移入含20％NCS的PBS液中保存,手术移植入受体子宫角内。结果表明,解冻后形态质量完好的A级冻胚达88,1％(37／42),移植受体妊娠率达42,9％,说明本试验采用的胚胎冷冻-解冻程序,能有效地进行波尔山羊致密桑葚胚和囊胚的冷冻保存。  相似文献   

山羊半胚体外培养试验     

张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1992,20(Z1)

研究了培养基、血清浓度和培养温度对山羊半胚体外发育的影响。结果表明:与杜氏磷酸缓冲液和TCM—199相比,在改良Whitten氏液中进行体外培养可显著提高半胚体外发育率(P<0.05);用改良Whitten氏液进行体外培养,含10％和15％犊牛血清组的半胚发育率显著高于5％血清组(P<0.05),极显著地高于无犊牛血清组(P<0.01);在38～39℃的条件下培养半胚的效果显著优于36℃(P<0.05),但在37～39℃的范围内,温度对半胚体外发育率无显著影响(P>0.05)。  相似文献   

山羊精液冷冻保存技术研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨素芳  邹知明  黎江  潘红平  石德顺 《安徽农业科学》2008,36(11):4532-4534

[目的]探索山羊精液的冷冻方法。[方法]以甘油为冷冻保护剂,采用细管法冷冻保存山羊精液,探讨甘油浓度和添加时间、冻结方法和解冻温度对山羊精液冷冻效果的影响。[结果]在稀释液中添加6%和7%甘油的处理组中,冻后精子活率与复苏率均显著高于添加3%、5%甘油的处理组。配液时添加6%甘油的处理组中冻后精子活率与复苏率均显著低于在4℃平衡后添加的处理组。把平衡的山羊精液分别在离液氮面3 cm处熏蒸9 min和-80℃冰箱中冻结9 min,前者的精子复苏率显著低于后者。在解冻温度分别为40、45和50℃的处理组中精子冻后活率与复苏率显著高于解冻温度为55和60℃的处理组,说明解冻温度以40～50℃为宜。[结论]在山羊精液冷冻保存中,甘油的最佳添加时间为4℃平衡后冻结前。  相似文献   

灵芝菌种液氮保藏工艺分析     

谢航  林娟 《浙江农业科学》2021,62(4):705-708

为优化灵芝菌种的液氮保藏工艺,从降温程序、培养基、菌饼大小、甘油浓度和解冻方式等方面对菌种保藏影响进行分析。结果表明,灵芝菌种的降温程序为从常温降至4 ℃时,以每分钟4 ℃或9 ℃速率降温,后以每分钟1 ℃降温至-40 ℃。保藏菌种采用添加木屑浸出液的PDA作为培养基,取菌饼8 mm大小,以10%~15%甘油作为保护剂,保藏后在35 ℃水浴快速解冻后的菌种活力较好。本研究可为灵芝菌种进行液氮保藏提供技术依据。  相似文献   

乳牛胚胎冷冻保存技术和受胎率的研究     

杨廷位  黄依明  黄志坚  曹以享  林藩平  邱承亮  吴移山  刘前进 《福建农林大学学报(自然科学版)》1990,(3)

51枚可用胚胎,依次通过含有3.3%,6.7%,10%甘油的抗冻剂处理后,装入26支塑料细管,置于冷冻仪上,以每分钟降低1℃的速率从室温降-6.5℃,平衡5 min 后进行诱发植冰,又平衡5 min,再以每分钟降低0.3℃的速率降至-36℃,平衡10 min 后直接投入-196℃的液氮中保存。先后从液氮中取出16支冷冻保存不同时间(1,8,9,10,28,29,31,32,62天)的冷冻胚胎塑料细管,用30℃温水进行快速解冻,分3步脱除甘油,回收32枚胚胎,其中可用胚胎22枚分别移植给11头受体牛,结果4头妊娠(妊娠率为36.3%)并顺利生下4头发育正常的犊牛。  相似文献