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相似文献
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1.
卵母细胞及其紧密连接的卵泡细胞之间的精细调节,促使卵母细胞成熟、受精和胚胎发育.在卵泡发育过程中,除了下丘脑-垂体-性腺轴间的内分泌调节外,卵母细胞源旁分泌或自分泌因子维持发育卵泡内微环境稳态,调节卵母细胞成熟和颗粒细胞增殖.目前发现,这些关键的调控因子主要是TGFβ超家族成员中的生长分化因子-9 (GDF9)和骨形态发生蛋白(BMP15).GDF9/BMP15主要表达于卵母细胞,是卵泡发育必需的细胞因子.论文综述了GDF9/BMP15的结构特点、表达特性、信号通路及其在卵巢中的生物学作用等研究进展.  相似文献   

2.
为了探讨小鼠卵巢组织玻璃化冷冻时适宜的平衡时间和冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)的适宜浓度,试验采用不同平衡时间(10 min、15 min、20 min)及不同浓度(15%、20%、25%)的DMSO作为冷冻保护剂对2月龄昆明小白鼠的卵巢组织进行处理,处理后的卵巢组织采用玻璃化冷冻法进行冷冻,用解剖法采集冷冻解冻后的卵巢卵母细胞,通过对卵母细胞染色及体外成熟培养判定卵巢的冷冻效果。结果表明:以平衡时间为20 min的试验组小鼠卵巢冷冻效果较好,其卵母细胞存活率为65.0%,卵母细胞成熟率为27.4%;DMSO浓度则以20.0%为宜,冷冻解冻后卵巢内卵母细胞染色后存活率为66.7%,体外培养后卵母细胞成熟率为38.3%。  相似文献   

3.
本研究探讨卵巢保存温度、激素及体外培养时间对延边黄牛卵母细胞体外成熟的影响.研究结果表明,将卵巢分别保存在25~29℃、30~35℃、36~40℃的生理盐水中运输时,卵母细胞体外成熟率分别为55.3%、70.1%、60.7%,各组间无显著性差异(P>0.05);当将卵母细胞分别培养在无激素的对照组(TCM199 10?S)、添加雌二醇(estradiol)-17β组、LH 雌二醇-17β组时,卵子的成熟率分别为57.8%、64.3%、70.1%,对照组与LH 雌二醇-17β组差异显著(P<0.05);卵母细胞各自培养22~25 h、26~30 h、31~34 h时,卵子体外成熟率分别为56.3%、65.4%、68.4%,3组间无显著差异(P>0.05).  相似文献   

4.
为研究卵巢质量和保存液对牛卵母细胞孤雌发育能力的影响,本实验将采集卵巢按其质量分为A、B 2组,于生理盐水中运输到实验室,利用切割法采集卵巢表面卵泡中的卵母细胞培养,成熟后孤雌激活;将采集牛卵巢随机分到D-PBS保存液与生理盐水中,运送到实验室后采集卵母细胞培养。以卵母细胞的成熟率、孤雌胚的卵裂率、囊胚率来评价卵巢质量、保存液对卵母细胞发育能力的影响。结果表明:A组卵巢平均获得的卵母细胞数(2.1枚)显著低于B组卵巢获得的卵母细胞数(5.5枚),从A组卵巢上获得的卵母细胞成熟率(56.98%)、卵裂率(42.86%)及囊胚率(9.52%)显著低于B组卵巢上获得的卵母细胞成熟率(84.38%)、卵裂率(70.17%)及囊胚率(31.50%)(P<0.05);使用含离子丰富的D-PBS溶液,较对照组保存液生理盐水,其卵母细胞的成熟率、卵裂率及囊胚率均没有显著差异(P>0.05)  相似文献   

5.
表皮生长因子 (EGF)是表皮生长因子家族成员之一 ,在哺乳动物生殖过程中具有重要的调节作用。在哺乳动物卵巢内有 EGF的表达并调节卵巢的功能活动 ;EGF可促进哺乳动物卵泡发育 ,加速卵母细胞的成熟 ;EGF可促进卵母细胞受精和受精卵发育的能力 ,促进胚泡腔的形成 ;EGF在许多哺乳动物的子宫内均有表达 ,并参与胚胎着床过程的调节。 EGF可能以自分泌或旁分泌的形式参与卵泡发育、卵母细胞成熟、子宫内膜增殖、早期胚胎发育及胚胎着床等过程的调节。文章对 EGF在雌性哺乳动物卵泡发育、卵母细胞成熟、早期胚胎发育、囊胚腔扩展、胚胎着床等过程中的作用进行了概述  相似文献   

6.
从屠宰场收集黄牛卵巢,取皮质深层卵母细胞进行体外成熟、体外受精和早期胚胎体外培养,分析了影响其效果的因素。结果表明,在成熟培养液中添加FSH(10IU/mL)、HCG(20IU/mL)和17β-E2(1mg/L)对卵母细胞受精后早期胚胎发育能力有极显著促进作用;等量牛卵泡液(BFF)与新生牛血清(NCS)对体外受精胚胎发育效果影响不显著,以15?F为宜;颗粒细胞与输卵管上皮细胞均能显著提高卵母细胞体外成熟受精后早期胚胎的发育率,颗粒细胞 输卵管上皮细胞对克服胚胎阻滞现象效果显著。  相似文献   

7.
为研究表皮生长因子(EGF)、β-巯基乙醇(β-ME)、亚硫磺酸(HTAU)对牛卵母细胞体外成熟(IVM)及孤雌激活胚胎体外发育(IVC)效果的影响,实验采集牛卵巢采用切割法收集卵丘-卵母细胞复合体(COCs)随机处于不同浓度EGF、β-ME培养液成熟培养24 h后孤雌激活,研究其在不同胚胎培养液中的后续发育,以期筛选出最好的牛卵母细胞IVM-IVC条件。结果表明:添加25、50、100 ng/mL EGF组的成熟率、卵裂率均高于对照组,其中50 ng/mL EGF组的成熟率、卵裂率与对照组差异显著(P<0.05);50、100、500μmol/L的β-ME对牛卵母细胞体外成熟没有促进作用;50 ng/mL EGF与50、100μmol/Lβ-ME组合并无协同作用;胚胎培养基中添加不同浓度EGF对早期胚胎的体外发育无显著影响;而添加100μmol/Lβ-ME组的囊胚率、囊胚细胞数均极显著高于对照组(P<0.01);在成熟液中添加50 ng/mL EGF和100μmol/Lβ-ME、胚胎培养液中添加0.5 mmol/L HTAU孤雌胚发育最好。  相似文献   

8.
低温长时间保存的绵羊卵巢对卵母细胞发育潜力的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
本试验比较了绵羊卵巢不同的保存温度、时间与保存液对其卵母细胞孤雌发育能力的影响。结果表明,将绵羊卵巢在14~18℃保存15~17h,对卵母细胞的成熟率(80.9%vs82.2%)、孤雌激活后囊胚的发育率(21.0%vs22.0%)均无显著影响,采用生理盐水或D-PBS保存对卵母细胞的发育亦无显著差异;而将卵巢保存在4℃或25~30℃却显著降低了卵母细胞的成熟率(61.9%vs19%)与卵裂率(8.6%vs9.1%),没有发育到囊胚。从而得出,卵巢在14~18℃保存过夜,不影响卵母细胞的发育能力。  相似文献   

9.
本研究旨在阐明荣昌猪BMP15基因在荣昌猪性成熟前不同发育期的表达特性及其与SMADs信号相关基因的表达关系。采集1月龄、3月龄及5月龄荣昌猪卵巢组织,利用qRT-PCR及石蜡切片免疫荧光染色法分析荣昌猪不同月龄卵巢组织内BMP15基因表达及细胞定位特征;利用5月龄卵巢活组织添加重组人BMP15蛋白及TGF-β受体抑制剂(LY215799和LY2109761),应用qRT-PCR及Western blot方法分析BMP15及SMADs信号通路相关基因SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD7、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ表达特征及BMP15/SMADs信号通路。结果表明:从1月龄至5月龄,随着荣昌猪生长发育,卵巢组织内BMP15基因mRNA表达量呈上调表达(P0.05);石蜡切片免疫荧光试验表明,5月龄卵巢组织卵母细胞周围颗粒细胞内存在BMP15蛋白荧光信号;从3月龄至5月龄的卵巢组织内BMP15、SMAD4、TGF-β1及TGF-βRⅡ基因在mRNA水平呈上调表达(P0.05),而SMAD2、TGF-β2及TGF-βRⅠ呈下调表达(P0.05);通过5月龄卵巢活组织添加重组人BMP15蛋白、TGF-βRⅠ/Ⅱ及TGF-βRⅠ受体抑制剂培养,发现TGF-βRⅠ/Ⅱ抑制剂(LY2109761)明显抑制TGF-βRⅡ受体蛋白的表达,TGF-βRⅠ抑制剂(LY2157299)不能抑制TGF-βRⅡ受体蛋白的表达。上述结果表明,荣昌猪BMP15基因在荣昌猪性成熟前的卵巢组织内呈上调表达,SMAD4、TGF-β1及TGF-β RⅡ也呈上调表达。本试验研究表明BMP15基因通过TGF-βRⅡ介导SMAD4信号分子调控下游基因的表达,为进一步研究荣昌猪BMP15基因在卵泡发育中发挥的作用提供理论依据。  相似文献   

10.
抗苗勒管激素(AMH)是转化生长因子β超家族成员之一,在雌性动物卵巢颗粒细胞中表达,通过自分泌或旁分泌作用调控卵泡发育及卵母细胞的成熟,并作为有效的内分泌标记物用于预测牛超数排卵效率及体外胚胎产量。本文综述了AMH的表达模式、转导途径、生理功能,以及其在不同雌性动物中的研究进展,为促进其在动物繁殖领域中的深入研究与应用提供参考。  相似文献   

11.
Bmp/Smad信号通路及其在哺乳动物卵巢发育中的作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
开展绵羊多羔性状基因的研究对于揭示其分子调控机制和提高绵羊繁殖力具有重要意义。骨形态发生蛋白(BMPs)为转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员,与哺乳动物繁殖活动密切相关。研究表明,BMPs可促使原始卵泡向次级卵泡转化,对哺乳动物卵巢颗粒细胞增殖、生殖激素的合成和分泌以及卵母细胞成熟和排卵等方面起重要调节作用,而BMPs发挥功能主要依赖于经典的Bmp/Smad信号通路。本文就Bmp/Smad信号通路成员的表达、对早期胚胎发育的影响以及在哺乳动物卵巢发育中的作用等方面的研究进行总结,以期为进一步研究BMPs及其信号通路的调控机制提供参考。  相似文献   

12.
为研究屠体羊卵巢保存时间对其卵母细胞体外受精发育能力的影响,将采集的卵巢随机分为3个试验组和1个对照组,在15~20℃含双抗的生理盐水中分别保存0 h、6 h、12 h、18 h进行成熟培养和体外受精。结果表明:羊屠体卵巢在15~20℃含双抗的生理盐水中,保存6 h和12 h卵母细胞成熟率(72.03%、70.87%)、卵裂率(74.12%、72.60%)、囊胚率(22.22%、20.75%)与0 h卵母细胞成熟率(73.68%)、卵裂率(74.49%)、囊胚率(23.29%)间无显性著差异(P0.05),保存18 h卵母细胞成熟率(67.39%)、卵裂率(29.35%)、囊胚率(16.30%)与0 h间差异也不显著(P0.05)。说明羊屠体卵巢在15~20℃含双抗的生理盐水中,保存6、12和18 h,不影响卵母细胞继续发育。  相似文献   

13.
TGF-β/SMAD信号转导通路是典型的跨膜转导通路,该通路通过一组配体与受体结合,将细胞外的信号转导入细胞内,激活下游的SMAD蛋白、转录调节靶基因,从而介导配体对细胞的生物学作用。在卵母细胞成熟过程受到多种因子调控,其中一些细胞外信号通过TGF-β/SMAD信号通路发挥调控作用。TGF-β/SMAD信号通路主要通过不同的下游信号分子SMADs以自分泌/旁分泌途径方式发出信号,调控颗粒细胞增殖和卵母细胞生长,影响着卵巢发育。近年来,TGF-β/SMAD信号通路对卵巢发育的调控机制已成为生殖生理学领域研究热点之一,本文综述了TGF-β/SMAD蛋白的受体、TGF-β/SMAD信号通路,并分别从配体、调控因子以及与其他通路的作用关系的角度阐述了不同家畜TGF-β/SMAD通路在卵巢发育中的调控作用,为卵巢发育的调控机制研究提供思路,同时为畜牧业生产提供理论基础。  相似文献   

14.
为探索骨形态发生蛋白4(BMP-4)在兔卵巢中的表达模式,揭示其在卵母细胞成熟和卵泡发育以及黄体化等过程中的作用,本研究采用原位杂交方法测定BMP-4mRNA在兔卵巢中的表达定位,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测BMP-4mRNA在卵母细胞体外成熟培养过程中的表达变化。结果表明:BMP-4 mRNA在各级非闭锁卵泡均有低水平表达,在闭锁的初级卵泡、次级卵泡、近成熟卵泡中有极强或较强的表达。兔卵母细胞在体外成熟过程中有BMP-4 mRNA的微量表达,但是与0 h相比较,成熟培养4、8、24 h卵母细胞中BMP-4mRNA表达量没有明显变化,而16 h的表达量明显降低,且与0、4、8、24 h存在极显著差异(P<0.01)。由此推测,兔BMP-4在卵巢卵泡生长发育过程中微量表达可能起黄体化抑制因子作用,并且与BMP-15相互关联对卵丘扩展发挥重要作用。另外,可能高活力的BMP-4以卵母细胞的自分泌方式参与了兔卵巢卵泡的闭锁机制。  相似文献   

15.
水牛分离精子与不同来源卵母细胞体外受精的效果研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
本研究的目的是探讨水牛分离精子与不同来源(活体采卵或屠宰场卵巢采卵)卵母细胞体外受精的效果。活体采卵是选用20头空怀河流型母水牛(其中摩拉母牛12头,尼里-拉菲母水牛8头)每间隔3 d采卵1次,连续采卵5~6周,活体采集卵母细胞;屠宰场卵巢采卵是收集屠宰场水牛卵巢,用10 mL注射器连接18 G针头吸取水牛卵巢上可视的卵泡来收集卵母细胞。将收集的AB级水牛卵母细胞在相同的条件下进行体外成熟、然后用分离或未分离精子进行体外受精以及体外培养至囊胚。结果发现:活体采卵组和屠宰场收集的水牛卵母细胞组用分离精子受精分裂率和囊胚率没有差异(P>0.05);分离精子和未分离精子的体外受精分裂率和囊胚率也没有差异(P>0.05)。由此说明,水牛分离精子可以用于体外生产性控胚胎。  相似文献   

16.
试验从屠宰场收集了 4 8头青年黄牛、34头青年水牛的卵巢共 16 4个 ,共回收可用卵母细胞 86 4枚。水牛平均每个卵巢可回收 3.2 2枚可用卵母细胞 ,相当于黄牛 (6 .72枚 )的一半。试验结果表明 :水牛卵巢生长卵泡少 ,卵母细胞产量少、质量差 ;3种采集黄牛卵泡卵母细胞的方法 ,用抽吸加切割法平均从每个卵巢回收的可用卵数 (7.71枚 )都极显著高于抽吸法 (6 .19枚 )和切割法 (6 .4 4枚 ) (P <0 .0 1) ,但是该法手续繁杂 ,适于一次且只能收集少量卵巢时使用 ;在黄牛和水牛卵母细胞成熟培养液中用 0 .3%PVP代替 10 %FBS ,牛卵母细胞的体外成熟率无显著差异 (P >0 .0 5 )。  相似文献   

17.
TGF-β超家族(transforming growth factor-β,TGF-β)是一类在结构上相对保守的生长因子,参与细胞增殖与分化等多种细胞生理活动。近来发现卵巢体细胞和卵母细胞能够表达多种属于TGF-β超家族的生长因子。这些生长因子参与调节卵泡的生长发育,并且其表达和功能的发挥随卵泡生长发育表现出阶段特异性。 其中BMP15和GDF9等基因的突变会影响卵泡正常的生长发育和功能发挥,甚至不育。  相似文献   

18.
为了探讨脱氢表雄酮(DHEA)对大鼠原代卵巢颗粒细胞激素生成及相关甾体生成酶的影响,采用机械法分离培养大鼠原代卵巢颗粒细胞,放射免疫分析法检测培养液中雌二醇、孕酮和睾酮的含量;Real-time PCR法检测类固醇代谢途径中3β-羟基固醇脱氢酶(3β-HSD)、17β-羟基固醇脱氢酶(17β-HSD)、CYP450 mRNA的表达变化。结果显示:10μmol/L DHEA处理48 h后可显著促进大鼠原代卵巢颗粒细胞雌二醇(P<0.05)、孕酮(P<0.01)和睾酮的分泌量(P<0.01);显著促进3β-HSD(P<0.01)和17β-HSD(P<0.05)mRNA的表达,CYP450 mRNA表达略有降低,但无统计学意义。说明外源性DHEA处理可能通过调节3β-HSD、17β-HSD和CYP450等相关酶的基因表达,进而影响大鼠原代卵巢颗粒细胞雌激素和雄激素的分泌。  相似文献   

19.
<正>卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)是指在体外人工设定的条件下,卵母细胞经过一系列的生长发育最终形成具有受精能力的成熟卵母细胞的过程。哺乳动物卵母细胞的体外成熟培养是胚胎体外生产的基础环节。1卵巢获取通常卵巢从屠宰场获取,用含双抗的磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐水在尽可能短的时间内运回实验室。卵巢的保存温度及贮存时间影响卵母细胞的体外成熟。E.M.Walters等[1]研究了不同保存温度及不同贮存时间对猪卵母细胞体外成熟的影响,结果发  相似文献   

20.
蓝狐卵母细胞的体内外成熟   总被引:1,自引:0,他引:1  
对蓝狐卵母细胞成熟时间和超数排卵后卵母细胞的发育阶段进行了研究。采集间情期 (11~ 12月份 )蓝狐卵巢 ,用切割法回收卵泡中的卵母细胞 ,每个卵巢平均获得 8个卵丘卵母细胞复合体 (COCs:cumulus oocyte complexes,480个卵 / 6 0个卵巢 )。COCs在成熟液 (TCMI99+10 %FCS+10 μg/ L EGF+10 IU/ m L PMSG+10 IU/ m L h CG)培养 ,并在不同时间将卵母细胞固定、染色观察其成熟阶段。结果表明 ,核网期卵母细胞在培养前的比例为 80 .70 %(P<0 .0 1) ;GV期卵母细胞在培养 2 4h比例最高 (34 .0 4%,P<0 .0 1) ;GVBD期卵母细胞也是在培养 2 4h比例较高(4 4.6 8%,P<0 .0 5 ) ;M 期卵母细胞在培养 48~ 12 0 h比例较高 (P<0 .0 5 ) ,48h最高 (30 .0 0 %) ;M 期卵细胞在培养 72~ 96 h比例较高 (P<0 .0 5 ) ,72 h比例最高 (2 9.41%) ;卵母细胞在培养 12 0 h退化比例最高 (2 2 .2 2 %,P<0 .0 1)。因此 ,间情期卵母细胞体外培养 72~ 96 h为最佳。对繁殖季节 (3月份 )蓝狐进行超排处理 ,回收卵巢卵泡中卵母细胞及输卵管、子宫角的卵母细胞 ,固定、染色 ,观察其所处的发育阶段。母狐皮下注射 5 0 0 IU PMSG,48h后皮下注射 2 5 0 IU h CG,一组在 72 h后屠宰 ,结果表明 ,母狐卵巢体积虽然有所增大 ,但没有排卵 ,将卵泡中  相似文献   

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