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1.
牛乳中超氧化物歧化酶（SOD）的提纯与鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
新鲜牛乳经超速离心,氯仿－乙醇处理,丙酮沉淀、透析、ＤＥＡＥ纤维素柱层析等步骤使其中Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ得到了纯化,提纯后酶的比活为１４９．５Ｖ／ｍｇ。该酶对Ｈ２Ｏ２敏感,并且在２７２ｎｍ和６７５ｎｍ处各有一吸附锋,证明被纯化的酶是Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ。 相似文献
2.
利用ＴＭＯＰＰ－Ｚｎ、Ｃｕ显色体系,对二阶导数光谱同时测定锌、铜进行了研究。在日立５５７型双光束双波长分光光度讦上,取ｎ＝２,Δλ＝９ｎｍ,Ｓｐｅｅｄ＝１２０ｎｍ／ｍｉｎ,Ｓｌｉｔ＝２ｎｍ,于４２９．５ｎｍ处测Ｚｎ,４１９ｎｍ处测Ｃｕ,二者互不干扰。 相似文献
3.
羊血铜锌超氧化物歧化酶的提取 总被引：3，自引：0，他引：3
用低深度氯化钠与羊血浆匀浆，采用７５℃加热，硫酸铵分级沉淀、透析，柱层析等方法，从羊血中提取铜锌超氧化物歧化酶（Ｃｕ．Ｚｎ－ＳＯＤ）其比活性为４６３２Ｕ／ｍｇｐｒ，紫外吸收峰在２６０ｎｍ。实验还表明，硫酸钾缓冲液浓度对Ｃｕ．Ｚｎ－ＳＯＤ活性有显著影响。 相似文献
4.
豌豆种子超氧化物歧化酶的纯化及性质 总被引：8，自引：0，他引：8
从豌豆种子提纯了超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），纯酶比活性为７８４４×１０３Ｕ／ｇ。该酶受ＫＣＮ和Ｈ２ｐ２的强烈抑制，不受乙醇一氯仿混合液影响，说明为Ｃｕ、Ｚｎ－ＳＯＤ。酶分子量和亚基分子量分别为３２１００×和１４４００，表明该酶是由两个相同亚基组成。该酶在７０℃以下和ｐＨ５．０～１１．０范围内较稳定，紫外区最大吸收波长为２５９ｎｍ。 相似文献
5.
以３０％ ～６０％ 硫酸铵饱和度分级沉淀、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００、Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－４Ｂ 和羟基磷灰石层析纯化了小麦５－氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ）,其在ｐＨ ８．５ 时比活为３１ Ｕ·ｍ ｇ－ １蛋白;酶纯化了９１ 倍,得率５％ ,酶亚基分子质量约５２ ｋｕ,全酶分子质量约３３０ ｋｕ,表明酶由６ 个亚基组成;酶的等电点为４．８,在４００ ｎｍ有吸收峰,最适反应温度４５℃,Ｍｇ２＋ 激活酶,Ｚｎ２＋ 和磷酸吡哆醛抑制酶。纯化的ＡＬＡＤ浓缩后,－ ２０℃下在０．１ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １,ｐＨ ８．５ 的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ,内含５０％ 的甘油,５ ｍ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １的巯基乙醇和ＭｇＣｌ２ 中黑暗贮藏３０ ｄ 酶活不损失 相似文献
6.
SOD的化学特性及其应用 总被引：12，自引：0，他引：12
ＳＯＤ属酸性蛋白酶,对ｐＨ、热和蛋白酶水解等特性比一般酶稳定。Ｃｕ／Ｚｎ—ＳＯＤ,Ｍｎ—ＳＯＤ,Ｆｅ—ＳＯＤ三类ＳＯＤ分子结构均为二聚体或四聚体,其活性中心都含有金属离子,金属离子的存在与否直接影响酶活,ＣＮ－可以使Ｃｕ／Ｚｎ－ＳＯＤ失活,而Ｍｎ—ＳＯＤ和Ｆｅ—ＳＯＤ具有抗ＣＮ－能力。ＳＯＤ作为药用酶使用存在半衰期短、分子量大,抗原性,易被蛋白酶水解等问题,因此,对ＳＯＤ分子进行改造就显得十分重要。对ＳＯＤ进行化学修饰,可以明显地提高ＳＯＤ的稳定性。修饰后的ＳＯＤ不仅完全保留了天然酶的活性,而且在耐热、耐酸、耐碱和抗胃蛋白酶水解能力方面都明显地优于天然ＳＯＤ。鉴于ＳＯＤ是一类重要的氧自由基清除剂,具有抗炎、抗衰老和抗辐射的作用,作为一类新型的治疗酶制剂已广泛应用在医疗、保健、食品等方面。 相似文献
7.
纤维素酶制备工艺的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
将绿色木霉变异菌株４１３１的发酵液通过（ＮＨ４）２ＳＯ４盐析等一系列工艺步骤制得纤维粗酶,其比活力为０．２８ｕ／ｍｇ。粗酶经过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５柱层析纯化,纯化后酶比活力为１．３６ｕ／ｍｇ,回收率为４１．６％。将上述纯化的纤维素酶再经过ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５柱层析分离,得到了纤维素酶纯化组合组分,其比活力为７．２８ｕ／ｍｇ,回收率为３２．８％。 相似文献
8.
人工感染ＲＨＤＶ－ＮＪ株病死兔肝经－５０℃反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、差速离心,Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒,纯化ＲＨＤＶ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＣｕＣｌ２负染色后,切取主要结构多肽ＶＰ１（６４．５ＫＤ）凝胶带,除去ＣｕＣｌ２和ＳＤＳ获得ＶＰ１,高效液相色谱鉴定只有一个蛋白峰,Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔｔｉｎｇ,ＨＡ和ＨＩ结果显示纯化ＶＰ１具有良好的抗原表位稳定性。无母源抗体的３月龄兔１ 相似文献
9.
桑叶超氧化物歧化酶的提纯和性质的研究 总被引：8，自引：0，他引：8
桑叶超氧化物歧化酶能抑制肾上腺素的自动氧化和三氯硝基四氮唑蓝的光化还原,可以根据ＳＯＤ对肾上腺素的自动氧化的抑制作用为酶活性的定量测定。桑叶ＳＯＤ活性能被ＫＣＮ抑制但不受氯仿－乙醇影响,在表明桑叶ＳＯＤ为Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ。它的粗提液经聚丙烯酰胺凝胶电泳及ＮＢＴ的酶活性染色,在蓝色背景上有两条无色透明的同工酶谱带。桑叶粗提液经纯化比活提高２．７倍,其分子量为３５０００,纯化后的桑叶ＳＯＤ有同样的光吸 相似文献
10.
烟叶超氧物歧化酶的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
从烟叶中提取的超氧物歧化酶（ＳＯＤ），经ＰＡＧＥ垂直板电泳后，用氮蓝四唑（ＮＢＴ）法活性染色，并经凝胶薄层扫描（λ＝５９５ｎｍ），结果显示粗酶液有６条同工酶谱带，经纯化后的酶只有一条谱带。此纯酶液置冰箱３６ｈ后，可获得长方形结晶。结晶酶液用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析（１．５ｃｍ×１００ｃｍ）和ＳＤＳ－和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为２４８３０和２８９００。用等电聚焦电泳测得该酶等电点为６．８０。该酶在ｐＨ５～９范围内活性较稳定，在７５℃保温１５ｍｉｎ活性尚保留５４％。此酶对ＫＣＮ、氯仿－乙醇不敏感，但受到ＥＤＴＡ，Ｈ_２Ｏ_２的强烈抑制，表明烟叶中分离纯化得到的ＳＯＤ为酶分子中结合Ｆｅ的Ｆｅ－ＳＯＤ。 相似文献
11.
铜锌离子对超氧化物歧化酶构象及催化活性的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
用ＣＤ光谱、紫外吸收光谱和荧光发射光谱监测了铜锌离子对超氧化物歧化酶构象的影响，结果表明脱铜锌后酶的二级结构有序度降低，三级结构发生去折叠，而且酶失活程度明显大于铜锌丢失程度。提示铜锌离子对于维持酶分子特定构象及对构象的稳定性具有重要作用。 相似文献
12.
HU Gen-hai YU Shu-xun FAN Shu-li SONG Mei-zhen 《中国农业科学(英文版)》2007,6(5):536-544
In this study, a gene encoding a superoxide dismutase （SOD） was cloned from senescent leaves of cotton （Gossypium hirsutum）, and its expressing profile was analyzed. The gene was cloned by rapid amplification of cDNA ends （RACE） method. Northern blotting was used to show the profile of the gene expression, and the enzyme activity was mensurated by NBT deoxidization method in different growth periods. The full length of a gene of cytosolic copper/zinc superoxide dismutase （Cu/Zn-SOD） was isolated from cotton （GenBank Accession Number： DQ445093）. The sequence of cDNA contained 682 bp, the opening reading frame 456 bp, and encoded polypeptide 152 amino acids with the predicted molecular mass of 15.03 kD and theoretical pI of 6.09. The amino acid sequence was similar with the other plants from 82 to 87%. Southern blotting showed that the gene had different number of copies in different cotton species. Northern blotting suggested that the gene had different expression in different tissues and development stages. The enzyme activity was the highest in peak flowering stage. The cotton cytosolic （Cu/Zn-SOD） had lower copies in the upland cotton. The copper/zinc superoxide dismutase mRNA expressing level showed regular changing in the whole development stages; it was lower in the former stages, higher in latter stages and the highest at the peak flowering stage. The curve of the copper/zinc superoxide dismutase mRNA expressing level was consistent with that of the Cu/Zn-SOD enzyme activity. The copper/zinc superoxide dismutase mRNA expressing levels of different organs showed that the gene was higher in the root, leaf, and lower in the flower. 相似文献
13.
在玉米——豆饼型基础饲料中添加过量铜(300ppm)和/或锌(3000ppm),饲予315日龄(满45周龄)产蛋鸡(来航),研究了饲料中过量的铜、锌对产蛋鸡的肝脏、胫骨及输卵管中矿物元素含量的影响,结果如下:①饲料中过量锌使肝脏和胫骨中锌含量显著升高(P<0.01),铜和锰含量显著下降(P<0.01)。②饲料中过量的铜使肝脏和胫骨中铜含量最著升高(P<0.01),使胫骨中锌和肝脏中锰和镁的含量显著升高(P<0.05)。③饲料中过量的铜和锌对输卵管中的锌、铜、钙、镁、钾、钠、铁的含量无显著影响(P>0.05)。 相似文献
14.
摘要：研究饲料中铜对草鱼生长性能、肝胰脏和肌肉中铜铁锌含量的影响,为饲料中铜的安全添加提供理论依据。用铜含量分别为9.38(对照),28.17,46.21,80.07,208.54,439.50,679.72,873.37,1 365.42mg/kg的试验饲料,饲喂初始体重（25.57 ± 0.47）g的草鱼56d,每14d取样1次。结果表明：饲料铜含量对草鱼的成活率、特定生长率、饲料系数、鱼体水分、鱼体粗脂肪和鱼体粗灰分无显著影响(P＞0.05);而饲料铜含量≥87337mg/kg时,鱼体粗蛋白含量显著低于对照组(P＜0.05)。随着饲料铜含量的升高,草鱼肌肉铜含量无显著变化(其含量为1.52~1.65mg/kg),铁含量显著升高,锌含量则仅在14d时显著降低;肝胰脏铜含量显著升高,56d时,在铜含量1 365.42mg/kg的试验组达到22.97mg/kg;肝胰脏铁含量14d时显著升高,但在56d时呈先升高后降低趋势;肝胰脏锌含量在14d时显著降低,而在56d时,饲料铜含量≥439.50mg/kg的试验组显著高于对照组(P＜0.05)。在本试验条件下,草鱼肝胰脏和肌肉中铜含量均低于我国水产品相关标准中规定的铜的限量。 相似文献
15.
浏阳大围山土壤铜锌含量的剖面分布规律 总被引：1，自引：0，他引：1
以湖南浏阳大围山花岗岩风化物发育的5种类型山地土壤为研究对象,按土壤发生学划分土壤层次采集剖面土样,分析测定了土壤中铜、锌总量及其有效态含量,研究山地土壤及剖面层次中铜、锌含量的分布规律及其与土壤理化性质间的关系。结果表明,大围山山地土壤中,全铜平均含量为34.5 mg/kg,其中A层29.2 mg/kg,各剖面层次间全铜含量变化较小,分布相对均匀;而全锌平均含量为104.4 mg/kg,其中A层土壤97.2 mg/kg,小于B层或AB层全锌的含量。A层土壤中有效铜和有效锌含量分别为1.85 mg/kg和4.82 mg/kg,多数土壤有效铜低于临界值(2.0 mg/kg),而有效锌高于临界值(1.5 mg/kg)。有效铜含量随剖面变化出现表聚或淀积特征,而有效锌含量大多以A层大于AB层或B层。土壤有效铜、锌含量与土壤有机质含量之间呈正相关。总体来看,浏阳大围山多数山地土壤锌较丰富,而铜较缺乏。 相似文献
16.
[目的]评定原子吸收法测定土壤中铜和锌含量的不确定度。[方法]对原子吸收法测定土壤中铜和锌含量的取样量、体积(容器和温度)、样品质量浓度、样品的质量含水量等不确定度分量进行量化,计算出原子吸收法测定土壤中铜和锌含量的不确定度。[结果]被测样品中铜含量为39.22 mg/kg,扩展不确定度U(WCu)为5.14 mg/kg,它是由标准不确定度(2.57 mg/kg)乘以包含因子(2)得到的;被测样品中锌含量为51.12 mg/kg,扩展不确定度U(WZn)为3.18 mg/kg,它是由标准不确定度(1.59 mg/kg)乘以包含因子(2)得到的。[结论]测定样品质量浓度引入的不确定度占较大比例,包括标准曲线和测定次数引入的不确定度,在测定中应给予足够重视。 相似文献
17.
[目的]考查培养基中铜元素和锌元素的含量对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累的影响。[方法]通过建立维生素E积累和细胞生长的数学模型,描述小麦胚芽愈伤组织的维生素E积累和细胞增长。以次生代谢产物维生素E积累最多为目标,通过试验优化确定铜锌含量的最佳组合。[结果]结果表明,当B5培养基中ZnSO4.7H2O为2.0mg/ml;CuSO4.5H2O为0.1mg/ml时,有利于维生素E积累。维生素E积累的动力学模型的拟合度为97.53%,细胞干重的动力学模型拟合度为95.60%,非线性关系良好。[结论]微量元素铜和锌对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累有影响,铜元素较锌元素的影响显著,且低浓度的铜锌之间有协同作用;随着浓度增大,抑制作用逐渐增强。 相似文献
18.
冀东地区产奶期奶牛日粮中微量元素盈缺分析 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研究冀东地区产奶期奶牛微量元素铁、铜、锰、锌的营养状况。[方法]利用原子吸收光谱法对冀东地区奶牛场中国荷斯坦奶牛产奶期基础混合日粮和配合混合日粮中铁、铜、锰、锌4种微量元素的含量进行测定和盈缺分析。[结果]配合混合日粮中铁、铜、锰、锌4种微量元素含量分别为415.54、25.65、59.59和63.93 mg/kg,其中铁含量为文献报道产奶牛营养需要值的4倍,其他3种元素达到文献报道产奶牛营养需要值;基础混合日粮中铁、铜、锰和锌含量分别为363.91、14.21、35.64和33.00 mg/kg,铁含量为文献报道奶牛营养需要值的3倍,铜含量达到文献报道产奶牛营养需要值。[结论]在冀东地区进行日粮配制时铁和铜2种元素含量已满足奶牛生长和产奶的需要;而锰和锌2种元素应适量的补充。 相似文献
19.
利用原子吸收分光光度计，监测了我省部分县（市）土壤、饲料、饮水、猪体组织锌、铜含量；并通过增加日粮中锌含量或增加日粮中钙含量，进一步检测其组织中锌、铜含量及其分布。结果表明猪体组织中锌含量和日粮中锌含量在一定条件下呈正相关；饲料中锌含量又取决于土壤中锌合量。猪体组织中锌含量主要决定于土壤、饲料、饮水中锌含量。结果还表明，我省大部分地区土壤中有效锌含量偏低，平均为０．９１±０．５μｇ／ｋｇ；铜含量属中等平均为０．８４±０．２４μｇ／ｋｇ。饲料、饮水中锌、铜含量都比较低。锌、铜广泛存在于猪体内各种组织，且含量较高。锌、铜含量随地区、饲料、品种的不同而有明显差异。 相似文献
20.
曲亚玲 《甘肃农业大学学报》1998,33(3):256-259
用原子吸收光谱法测定了双峰驼羔全血和被毛Ｓｅ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｍｎ等６种微量元素的含量并计算出Ｆｅ／Ｚｎ、Ｆｅ／Ｃｕ和Ｃｕ／Ｚｎ的比值。结果表明被毛中元素含量均极显著高于全血,当地驼羔处于低Ｍｎ营养状况。 相似文献