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1.
为了解析植物生长调节剂与水曲柳体细胞胚胎发生普遍伴随外植体褐化现象的关系,本研究以水曲柳未成熟合子胚子叶为外植体进行体胚发生,对细胞分裂素BA和生长素NAA的影响效应进行了探讨。结果表明,(1)当培养基中添加0.5mg/LBA和1.5mg/LNAA时,产生体胚的外植体褐化率达到91.5%;褐化外植体的体胚发生率达50.8%,而未褐化外植体的体胚发生率仅为9.6%;(2)添加NAA是水曲柳未成熟合子胚子叶外植体褐化的充分必要条件,即:无NAA存在时,未成熟合子胚子叶外植体不发生褐化,有NAA存在时才会发生褐化;只添加NAA外植体会产生褐化,但褐化程度低于同时添加BA,说明BA是促进褐化的条件;(3)添加NAA与BA是水曲柳未成熟合子胚外植体发生体胚的必要条件,即不添加生长素和细胞分裂素时无体胚发生;(4)NAA与BA的交互作用对褐化率的影响差异显著,但对体胚发生率的影响差异不显著,说明BA和NAA处理对外植体褐化的作用与对体胚发生的作用不同。由此可知:水曲柳未成熟合子胚子叶外植体的褐化和体细胞胚胎发生均受细胞分裂素BA和生长素NAA的影响,但BA和NAA分别调控了外植体的褐化和体胚的发生,与二者伴随的现象没有关系。本研究结果对进一步深入解析水曲柳体胚发生伴随外植体褐化的生物学机理提供了科学依据。 相似文献
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水曲柳子叶和下胚轴愈伤组织和体胚的诱导 总被引：2，自引：0，他引：2
《分子植物育种》2015,(7)
为了建立水曲柳愈伤组织诱导和体胚发生体系,并为体胚发生分子机理研究提供有效培养系统,本研究以水曲柳成熟合子胚和未成熟合子胚的子叶和下胚轴为外植体,探讨了灭菌剂及其处理时间对外植体灭菌效果的影响和激素浓度对愈伤组织诱导和体胚发生的影响。结果表明:外植体处理试剂和消毒时间是10%Na Cl O处理1 min最为适宜;以MS1/2(MS所有成分均减半)为基本培养基,NAA 3 mg/L+BA1.5 mg/L为水曲柳未成熟合子胚子叶和下胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为6.5%和9.7%;NAA 5 mg/L+BA 2 mg/L为水曲柳成熟合子胚子叶与胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为29.3%和19.5%。研究结果补充和突破了前人研究只从水曲柳合子胚子叶获得体胚发生和只从叶柄获得有效愈伤组织增殖的结果,并为揭示体胚发生机理有效愈伤组织和体胚发生系统的建立奠定了基础。 相似文献
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降低玉米成熟胚愈伤组织褐化的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究以k12、137等2个骨干自交系的成熟胚为外植体,以N6培养基为基本培养基,研究培养基中附加甘露醇、Vc、活性炭并辅以生长调节物质6-BA、2,4-D对玉米成熟胚愈伤组织褐化的影响。结果表明:培养基中附加甘露醇、Vc、活性炭对愈伤组织的褐化影响不同,其抗褐化能力为:甘露醇(20g/L)Vc(2mg/L)活性炭(2g/L)空白。辅助添加6-BA、2,4-D时防治褐化作用更加明显,且添加的浓度不同,防治效果也不同,其中N6培养基+20g/L甘露醇+0.2mg/L6-BA+4mg/L2,4-D效果最佳。另外,暗培养能显著减轻褐化的发生,有利于愈伤组织的形成。 相似文献
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本研究以樟子松无性系(GS1)为研究对象,探讨合子胚不同发育时期愈伤组织的诱导情况,探索不同培养基类型及不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响,初步建立体胚发生技术体系,为樟子松(GS1)体胚发生技术建立和获得植株再生提供一定基础。本研究对樟子松无性系(GS1)合子胚不同发育时期进行观察并进行不同时期、不同激素体胚诱导。樟子松无性系(GS1)合子胚形态变化可划分为9个阶段,将这9个阶段的合子胚分别接种到不同培养基上进行诱导。结果显示,DCR培养基比MS和LM培养基更适合GS1愈伤组织的诱导和生长。第7阶段的合子胚在DCR+2,4-D 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,在DCR+2,4-D 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基上胚性愈伤组织诱导率最高。诱导过程会产生两种类型的愈伤组织,分别为白色透明状的愈伤组织和淡黄褐色愈伤组织。经显微观察有两种结构愈伤组织,一种是近球形的薄壁细胞结构,为非胚性愈伤组织;另一类是由胚性细胞和胚柄细胞组成的胚性细胞团。樟子松无性系(GS1)合子胚第7阶段的合... 相似文献
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为探索杜仲胚性愈伤组织诱导的条件,建立杜仲体细胞胚胎发生初步体系,以杜仲幼嫩叶片和未成熟合子胚为外植体、MS为基本培养基,探究外源激素配比、未成熟合子胚发育阶段与基因型对愈伤组织诱导的影响,并从形态学和细胞学对愈伤组织进行胚性的判断。试验结果表明：4种不同激素配比的培养基诱导出的叶片愈伤组织在形态上具有差异,MS+ 2,4-D 2 mg/L+ 6-BA 1 mg/L和MS+ 2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L有利于叶片胚性愈伤组织诱导;在培养基MS+ 2,4-D 2 mg/L+ 6-BA 1 mg/L上,以未成熟合子胚为外植体诱导出4种类型愈伤组织,其中圆球形和颗粒型突起的愈伤组织具有胚性;未成熟合子胚采集时间对愈伤组织诱导率具有显著差异,6月14日采集的外植体愈伤诱导率最高,不同基因型差异不显著。 相似文献
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石刁柏幼胚胚状体发生与细胞学研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以3个来自国外的石刁柏品种(C.IL,PURPLE和APOLLO)为试材,研究不同基因型以及培养基中添加2,4-D、KT、6-BA和NAA等生长物质对石刁柏幼胚胚状体发生的影响.结果表明,幼胚在MS 2,4-D 1.0 mg/L KT 0.5 mg/L 6-BA 2.0 mg/L培养基中可直接诱导产生体细胞胚.降低2,4-D的浓度,将诱导产生的体细胞胚组织块继代培养2～3次可诱导产生出米黄色颗粒状的胚性愈伤组织,继而有胚状体的发生.胚性细胞继续分裂形成多细胞原胚,经球形胚、梨形胚、长形胚、子叶分化期到成熟胚,其发生的胚状体与单子叶合子胚形成具有相似的过程. 相似文献
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《分子植物育种》2020,(12)
为研究ABA、KNO_3和NH_4NO_3两种氮源比例及凝固剂对白刺花体细胞胚胎发育、成熟及萌发的影响。本研究利用白刺花下胚轴诱导的增殖良好的胚性愈伤组织为材料,通过ABA、氮源种类及比例和凝固剂对其体胚发生、成熟的对比试验研究,筛选最优的白刺花体细胞胚胎发育、成熟和萌发的培养基。结果表明:白刺花下胚轴诱导的愈伤组织经增殖培养得到增殖率为170%的胚性愈伤组织;添加ABA 15.0 mg/L的培养基上可使体细胞胚发生率达到85.21%,体细胞胚产生数量达112个/g,总胚数与对照相比为486.96%;氮源比例中,KNO3增加1倍,NH_4NO_3减半的培养基上体细胞胚发生率最高,达92.33%,体细胞胚产生数量最多,为139个/g,形成的体胚数是对照的124.11%;以琼脂和植物凝胶作为凝固剂的试验中,琼脂7.0 mg/L和植物凝胶为3.0 mg/L时,体细胞胚发育良好,从畸形胚及子叶胚的多少和愈伤褐化综合考虑,植物凝胶比琼脂好。不同发育期的体细胞胚萌发培养时,鱼雷胚转接最为合适,体胚萌发能力最高,为91.55%;体胚苗壮苗培养可使植株转化率高达93%,植株移栽成活率为92.92%。本研究可为白刺花体细胞胚胎发生技术和快速成苗体系提供基础资料。 相似文献
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《分子植物育种》2021,(17)
以牡丹品种‘凤丹白’的胚轴为外植体,诱导体细胞胚发生,研究不同生长调节剂以及低温预处理对牡丹体细胞胚发生的影响,并对体胚发生过程进行组织细胞学观察。结果表明,体细胞胚在MS+IAA1 mg/L+TDZ 3 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基上诱导效果最好,诱导率为40.48%,体胚在MS培养基上萌发率为39.04%,在培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+CH (水解酪蛋白) 1.0 g/L+活性炭0.5 g/L上的进一步萌发率为35.55%,在MS+IAA 2 mg/L+GA32 mg/L上4℃低温预处理5 d,可以有效提高体胚发生,体胚诱导率提高11.42%。组织切片可以清晰观察到体胚内起源,胚性愈伤组织历经球形、心形、鱼雷形胚后发育成子叶胚。 相似文献
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以3个来自国外的石刁柏品种（C.IL,PURPLE和APOLLO）为试材,研究不同基因型以及培养基中添加2,4-D、KT、6-BA和NAA等生长物质对石刁柏幼胚胚状体发生的影响。结果表明,幼胚在MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋KT 0.5mg/L＋6-BA 2.0 mg/L培养基中可直接诱导产生体细胞胚。降低2,4-D的浓度,将诱导产生的体细胞胚组织块继代培养2-3次可诱导产生出米黄色颗粒状的胚性愈伤组织,继而有胚状体的发生。胚性细胞继续分裂形成多细胞原胚,经球形胚、梨形胚、长形胚、子叶分化期到成熟胚,其发生的胚状体与单子叶合子胚形成具有相似的过程。 相似文献
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《分子植物育种》2021,19(15):5083-5091
为建立稳定高效的落叶松体细胞胚再生体系,本研究以长白落叶松未成熟合子胚作为外植体材料,选择生长良好的胚性愈伤组织,依次通过液体培养基A,半固体培养基B,固体培养基C三种成熟培养基诱导体细胞胚形成。其中,愈伤诱导培养基为S培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.3 mg/L,蔗糖20 g/L,琼脂3 g/L;继代培养基为S培养基+2,4-D 0.15 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.05 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂6 g/L;成熟培养基A为S培养基+PEG-4000 100 g/L+ABA 15 mg/L+Ag NO310 mg/L,蔗糖45 g/L的液体培养基;成熟培养基B和C分别为添加了2 g/L和10 g/L琼脂的成熟培养基A。该方法体胚成熟时间为32 d左右,同步率为78.0%,正常形态体胚比例为83.0%。正常形态体胚形成效率可达223.0个/g胚性愈伤,体细胞胚萌发率可达47.2%。相较于单一成熟培养基,缩短成熟时间,使体胚生成更同步,并提高了体胚产量和质量。为落叶松体胚再生的商业化提供了途径,为大规模化育种繁殖、生理生化研究和转基因改良带来极大的方便,具有较大实际应用价值。 相似文献
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为探究白檀种子贮藏及愈伤组织诱导过程中种子胚组织褐化的影响因子,以白檀种子为材料,测定其贮藏过程中的生理变化,并研究不同处理对白檀种胚组织培养褐化率、转化率及污染率的影响。结果表明,白檀种子采收后,4℃贮藏14 d多酚氧化酶(PPO)活性与丙二醛(MDA)含量均最低,此时进行组织培养种胚褐化率低。白檀种子组织培养在高pH(6.3)和低pH(4.8)下的褐化率高,在pH值5.8时褐化率最低。组织培养接种时去除胚乳,培养基pH值5.3,使用M蔗糖∶M葡萄糖=1∶1混合,碳源浓度为30 g/L,NAA浓度为0.10 mg/L,能获得大量生长状况良好、分化能力较强的愈伤组织。 相似文献
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杉木子叶和下胚轴的器官发生与体胚发生 总被引：6，自引：0，他引：6
以杉木实生苗的子叶和下胚轴为起始外植体,研究了基本培养基、6-BA、TDZ、苗龄等因素对器官发生和体胚发生的影响.研究结果表明：基本培养基、6-BA、TDZ及苗龄对子叶和下胚轴不定芽发生和体胚发生均产生显著影响.DCR＋6-BA 1.0mg/L＋TDZ 0.003mg/L＋NAA 0.1mg/L是子叶和下胚轴诱导不定芽发生及下胚轴诱导体胚发生的最佳培养基;DCR＋6-BA 1.0mg/L＋TDZ 0.002mg/L＋NAA 0.1mg/L对子叶诱导体胚最有效;不定芽在DCR基本培养基中可有效伸长;1/4MS＋IBA 0.2mg/L＋NAA 0.1mg/L可有效诱导不定芽生根. 相似文献
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为提高橡胶树循环培养的次生体细胞胚再生植株频率,建立完善的橡胶树高频次生体细胞胚再生体系,以长期离体培养的未成熟次生体细胞胚为材料,研究了不同激素（ABA、NAA、GA3、6-BA, KT）及浓度对次生体细胞胚成熟的影响。结果表明,0.05 mg/L NAA促进次生体细胞胚成熟的效果较为明显,平均获得了27.33个成熟胚状体。ABA最佳处理浓度为1.0 mg/L,平均获得24.33个成熟胚状体,升高或降低ABA的浓度均会导致成熟体细胞胚数的降低或生根体细胞胚数的增加。GA3处理浓度较低时(0.2~0.4 mg/L),次生体细胞胚未能进一步发育成熟,成熟体细胞胚的数量为0个, GA3最佳处理浓度为1.0mg/L。高浓度的6-BA和KT皆不利于次生体细胞胚的成熟,以0.5 mg/L 6-BA和1.0 mg/L KT组合效果最佳。 相似文献
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以甘农1号杂花苜蓿下胚轴为材料诱导愈伤组织,愈伤组织在添加不同PEG6000浓度的UM+0.1mg/L NAA+0.5mg/L KT培养基上发生体胚,研究PEG6000对体胚发生的影响,并观察了体胚的细胞学结构。结果表明,适量的PEG6000对体胚的发生有促进作用,其中添加6% PEG6000体胚的发生率最高;石蜡切片观察得出体胚的发育经过球形胚、心形胚、鱼雷胚及子叶胚4个阶段形成一个完整的体胚。 相似文献
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本研究以华北落叶松成熟合子胚为外植体,进行华北落叶松离体器官发生的初步探究。试验采用不同消毒方法对华北落叶松成熟合子胚进行消毒,设计了以6-BA、NAA及蔗糖为试验因素的L934正交试验进行华北落叶松不定芽的诱导研究,并且在不定芽伸长试验中添加了少量活性炭。试验结果表明,（1）将种子在用流水冲洗12 h,75%酒精消毒3 min,再转入0.1%升汞消毒10 min所获得的综合效果较好;（2）光照条件下（约2000 lx）,DCR培养基+4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖为诱导不定芽的最佳组合,其中6-BA影响作用显著,NAA、蔗糖则无显著影响;（3）1.0 g/L活性炭对不定芽伸长有显著的促进作用,平均伸长达0.43 cm。以上研究为华北落叶松组培器官发生及进一步的遗传转化研究奠定了良好的理论与实践基础。 相似文献
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《分子植物育种》2020,(16)
褐变是制约木本果树离体培养成功的重要因素,探讨苹果离体再生过程中经常遇到的外植体褐化问题,对苹果高效再生和遗传转化体系建立具有重要意义。本研究以柱状苹果‘润太一号’为试材,研究了遮光时间(0, 7 d, 14 d)、消毒时间(6 min, 7 min, 8 min, 9 min)、茎段长度和防褐化剂对外植体褐化率的影响,并用不同激素配比对不定芽进行诱导。结果表明,外植体的褐化率随遮光时间增加而有所降低,但外植体的生长势变弱,以遮光7 d的材料为宜,褐化率为25%。不同腋芽个数对褐化率的影响差异不显著。褐化率随着消毒时间的增加而增加,最佳的消毒时间为8 min,褐化率为23.33%。不同防褐化剂处理的结果发现以培养基中加入100 mg/L Cef褐化率最低。不定芽诱导的结果发现,不定芽诱导率随诱导天数增加而增加,以诱导50 d效果较好,最适宜的不定芽诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA。本研究结果可为柱状苹果高效再生体系提供理论依据。 相似文献
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《分子植物育种》2016,(7)
本研究以尾巨桉无性系(32-29)无菌苗茎段作为外植体,进行组织培养及植株再生研究,通过优化不同浓度的植物生长调节剂组合以及LM、1/2LM以及MS不同培养基和不同浓度蔗糖溶液、不同温度的预处理,探讨尾巨桉胚性愈伤组织诱导的适宜培养基和培养条件。结果表明,在添加了1.5 mg/L 2,4-D与1.0 mg/L6-BA的改良1/2LM培养基上,茎段外植体培养6 d后愈伤组织诱导率达96%以上。将愈伤组织接种在0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA激素组合的培养基中体胚诱导率最高可达到19.5%。本研究为尾巨桉胚状体诱导及植株再生提供了借鉴与参考。 相似文献