鲮微卫星DNA分子标记的筛选与遗传多样性分析     

刘佳瑶  赵建  郑光明  朱新平 《广西农业生物科学》2012,(4):374-380

采用磁珠富集法对已建立的生长较快的西江段野生浅色鲮群体的极大、极小群体各31尾基因组DNA进行了微卫星序列的筛选,128个阳性克隆成功测序93个,其中80个为的微卫星序列,微卫星序列完美型占85％,非完美型占6．25％,混合型占8．75％。利用微卫星序列合成了23对微卫星引物,扩增结果表明,等位基因数为1～10个,扩增片段大小为92～283bp,其中14对引物扩增条带清晰,为中度或高度多态位点,极大、极小群体的平均有效等位基因数和平均多态信息含量分别为3．0784、3．2079和0．5675、0．5974,反映出2个群体遗传多样性均较丰富;高度多态性引物4的位点b,片段大小为119bp,在极大群体中出现频率为61．3％,在极小群体占22．6％,出现频率极大群体高于极小群体近3倍,初步可作为候选差异性分子标记。  相似文献   

用鲤鱼EST-SSRs分子标记分析长江黑龙江鲤种群结构   总被引：4，自引：0，他引：4  

鲁翠云  全迎春  李大宇  孙效文  梁利群 《农业生物技术学报》2007,15(6):947-952

从鲤鱼ESTs的数据库（10691个）中进行微卫星序列筛选，共发现微卫星序列127个，占整个ESTs数据库的1.19%，另外从本研究室构建的鲤鱼脑组织cDNA文库中筛选到微卫星序列20个。根据筛选得到的微卫星序列设计引物68对，合成引物40对，其中27对引物能够获得预期的目的片段，20对引物在所检测的群体内及群体间表现出多态性。用此20个多态性标记分析了长江鲤和黑龙江鲤的群体遗传结构，结果表明：长江鲤和黑龙江鲤在多数位点表现出较高的遗传多样性，20个位点的平均有效等位基因数分别为3.9135、3.4820；平均观察杂合度为0.6067、0.5667；平均期望杂合度为0.6737、0.6194；平均多态信息含量为0.6308、0.5714。长江鲤的遗传结构好于黑龙江鲤，两个群体的Hardy-Weinberg偏离指数较小，群体基本保持平衡，群体结构较合理；其中HLJE1、HLJE10位点在长江鲤和黑龙江鲤的扩增结果相差较大，长江鲤的多态性明显高于黑龙江鲤，位点多态信息含量相差一倍以上，可用于群体的鉴别。  相似文献   

三种笛鲷的野生群体和养殖群体遗传多样性的微卫星分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

彭银辉  刘楚吾  郭昱嵩  刘丽  王中铎 《农业生物技术学报》2008,16(5)

摘要：利用微卫星标记技术,采用10对微卫星引物对南海海域红鳍笛鲷、星点笛鲷、紫红笛鲷3种笛鲷鱼的野生种群（HYE、XYE、ZYE）和养殖种群（HYA、XYA、ZYA）进行了遗传多样性分析。10对微卫星引物在6个群体中共检测到78个等位基因,每个位点的等位基因数目在1~8个之间。6个群体的观测杂合度(Ho)为0.2500~1.0000,平均观测杂合度为：ZYE(0.9550)> ZYA(0.8900),HYE(0.8950)> HYA(0.8400),XYE(0.8450)>XYA(0.8100) ;平均多态信息含量(PIC) 为0.3648~0.7964,各野生群体均大于养殖群体;三种笛鲷鱼的野生群体和养殖群体遗传距离HYE与HYA,XYE与XYA,ZYE与ZYA分别为0.1029,0.0371,0.0135,基因分化系数分别为0.0371,0.0211,0.0352。群体遗传结构分析结果表明：红鳍笛鲷、星点笛鲷和紫红笛鲷的遗传多样性较丰富,养殖群体的遗传多样性较野生群体均有一定程度的降低,野生群体和养殖群体分化较弱。  相似文献   

华南鲤选育品种与地方品种的遗传多样性比较分析     

朱华平  苏换换  马冬梅  黄樟翰 《农业生物技术学报》2018,(8)

华南鲤(Cyprinus carpio rubrofuscus)作为优质的地方鲤鱼品种禾花鲤在广东省粤北地区有着悠久的稻田养殖历史。为了解人工养殖和选育对华南鲤群体的遗传多样性和遗传结构的影响,为华南鲤的种质资源保存和育种利用等提供依据,本研究采用16对微卫星引物对华南鲤第5代选育群体(F5)和2个地方品种(乳源群体,乐昌群体)的遗传多样性进行了比较分析。结果显示,在3个群体中,16对微卫星引物均表现为多态性,共扩增得到119个等位基因,每个微卫星座位检测到的等位基因数为3~10个,平均每对引物7.44个。3个群体的平均期望杂合度(He)分别为0.636 0、0.698 9和0.775 1,Shannon多样性指数(I)分别为1.206 3、1.402 0和1.612 2,平均多态信息含量(PIC)分别为0.570 1、0.645 8和0.720 7,表明3个群体都具有较高的遗传多态性(PIC0.5000),但地方品种的遗传多样性水平高于选育品种。3个群体各个微卫星位点上的遗传分化指数(Fst)值介于0.044 0~0.246 8,平均值为0.102 8,表明群体间的遗传变异水平中等。群体间遗传分化指数(Fst)配对比较结果显示,选育群体F5与乐昌群体的遗传分化指数值最大(0.182),乳源群体和乐昌群体2个地方群体间则最小(0.058)。实验结果表明,人工选育加快了华南鲤选育品种与地方品种的遗传分化,也导致了选育品种遗传多样性下降,但选育品种遗传多样性水平依然较高,还具有进一步选育的潜力。本研究结果为下一步制定华南鲤新品种选育计划提供基础遗传数据。  相似文献   

致病疫霉基因组微卫星标记开发     

张宏磊  杨志辉  胡珍珠  朱杰华  张奥川 《农业生物技术学报》2013,21(9)

致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的马铃薯晚疫病是影响马铃薯生产的第一大真菌病害.通过致病疫霉基因组开发微卫星标记,旨为致病疫霉群体遗传结构研究提供更系统、有效的标记.利用软件SciRoKo和ClustalX对致病疫霉基因组中微卫星序列长度≥25 bp的适合标记开发的位点及两端序列进行筛选.然后在这些位点的两端序列上设计专一性PCR扩增引物,选择9株致病疫霉菌对引物的专一性和微卫星的多态性进行检测.最后利用40株不同年份和地理来源的致病疫霉菌株对可行性微卫星标记进行等位基因数的确定及其多态性评估,然后选取部分标记对40株致病疫霉群体进行遗传多样性分析.共获得了33个具多态性的微卫星标记,占开发总数的28.7％,其多态信息含量(PIC)值都在0.164～0.614之间,其中PIC≥0.5的标记有7个,0.25 ＜PIC＜0.5的标记有25个,PIC≤0.25的有1个.发现致病疫霉微卫星基因型与其交配型及地理来源有一定相关性,与甲霜灵敏感性不相关.本研究开发出一批具有多态性微卫星标记,为致病疫霉群体遗传学研究机理提供更多多态性高,稳定性强的分子标记.  相似文献   

江西青岚湖五种淡水蚌遗传多样性的微卫星DNA分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

姬伟  魏开建  张桂蓉  史则超 《农业生物技术学报》2007,15(3):429-433

利用北美Epioblasma capsaeformis（蚌科）和中欧Margaritifera margaritifera L.（珍珠蚌科）两种淡水双壳类的20对微卫星引物对江西青岚湖五种淡水蚌群体进行了PCR扩增，筛选出8对多态性较高的引物，并用这8个微卫星座位分别对三角帆蚌、褶纹冠蚌、洞穴丽蚌、射线裂脊蚌和中国尖嵴蚌五种蚌类群体进行了遗传多样性分析。结果表明：不同蚌类群体的平均等位基因数为2.8750～4.000，平均观测杂合度（HO）为0.4417～0.6333，平均期望杂合度（HE）为0.4430～0.5706，平均多态信息含量（PIC）为0.368～0.498，五个群体表现出较高的遗传多样性。有多个座位在不同蚌类群体中偏离哈代－温伯格平衡。五种蚌类群体间的遗传距离在0.6228与1.4724之间，三角帆蚌和褶纹冠蚌之间的遗传距离最大，射线裂脊蚌和洞穴丽蚌之间的遗传距离最小。  相似文献   

鸭微卫星标记的筛选及其遗传多样性分析     

黄守婷  叶炎  何桂娟  杨建敏  张金耀  雷祖建  肖天放 《广西农业生物科学》2014,(5):986-991

采用磁珠富集法从AFLP片段中筛选微卫星标记,并对5个福建地方鸭品种的遗传多样性进行检测。基因组DNA用EcoRⅠ/MseⅠ内切酶酶切的同时与接头连接,酶切连接产物与用生物素标记的探针杂交,应用磁珠捕获100~2000bp含有微卫星序列的DNA片段并通过pGEM-T载体转化到大肠杆菌DH5a感受态细胞中,构建富集微卫星序列的基因组文库。随机挑选46个阳性克隆,测序获得14条含有微卫星的DNA序列并递交到GenBank（登录号：FJ599499~FJ599512）。设计合成14对微卫星引物,通过PCR优化从中选择5对引物用于5个福建地方鸭品种的遗传多样性分析。结果显示,5对微卫星引物共检测到31个等位基因,各微卫星基因座的有效等位基因数为1.969 7~2.834 4,多态信息含量和杂合度的平均值分别为0.5133和0.7480,遗传多样性丰富,说明磁珠富集法适合用于鸭微卫星标记的分离与筛选,筛选得到的5个微卫星位点可作为有效的遗传标记用于福建省地方鸭品种遗传多样性的研究。  相似文献   

磁珠富集法制备翘嘴红鲌微卫星分子标记   总被引：2，自引：0，他引：2  

张义凤  孙效文  鲁翠云  梁利群  徐伟  李勇  刘晓锋 《农业生物技术学报》2008,16(4)

根据生物素与链霉亲和素的强亲和性原理,采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法与传统的放射性同位素杂交法相结合的方式开发翘嘴红鲌基因组微卫星资源。结果表明,从1400个菌落中筛选出613个阳性克隆,占38.31%。将288个进行测序,得到262个（94.44%）含有微卫星序列的克隆, 其中含有微卫星座位280个。完美型204个,占72.86%;非完美型49个,占17.5%;复合型27个,占9.64%。设计获得243对微卫星引物,合成50对经PCR筛选,结果30对引物可扩增出特异性条带。12对具有多态性。  相似文献   

黄颡鱼微卫星标记筛选及特征分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘臻  鲁双庆  张建社  刘红玉  张林达  谢帝芝 《农业生物技术学报》2008,16(4)

通过磁珠富集法首次筛选黄颡鱼微卫星标记并对其特征进行分析。用生物素标记的寡核苷酸探针(AC)8、(CT)8、(AT)7、(GATA)8、(GATT)7进行微卫星片断的富集,挑选部分阳性克隆测序获得38个含有微卫星的DNA序列,总计设计并合成了22对微卫星引物。以普通黄颡鱼基因组DNA为模板,进行PCR扩增,结果筛选出18个多态性微卫星标记,每对引物等位基因数2-8个（平均3.78）,遗传杂合度0.2225-0.8101（平均0.5755）,多态信息含量0.3425-0.7900（平均0.5336）。此外18对多态性微卫星引物中有16对在黄颡鱼属其它4种鱼类具有通用性,13对在鲇形目中的3种鱼类具有通用性。因此,可以推断筛选的多态性微卫星标记可用于黄颡鱼属和鲇形目鱼类的遗传分析。  相似文献   

微卫星标记分析广西水牛遗传多样性     

崔奎青  刘庆友  李秀林  黄银花  王志强  石德顺  李宁 《广西农业生物科学》2008,27(1):1-6

为研究广西沼泽型水牛(Bubalus bubalis)核基因组的多态性,采用23对荧光标记微卫星引物,对随机抽取的60个广西本地水牛样本进行了PCR检测。结果表明,23对引物中,有19对可以获得特异性产物且存在多态,平均有效等位基因数为4.0189,基因座ILSTS086含有13个等位基因;各微卫星基因座的平均杂合度变化范围为0.1852~0.4722,ILSTS019基因座平均杂合度最高(0.4722),而ILSTS017平均杂合度最低(0.1852);群体基因平均多态信息含量(PIC)为0.6639,19个标记中有18个PIC大于0.5,属高度多态位点。  相似文献   

Structure of genetic diversity among common bean (<Emphasis Type="Italic">Phaseolus vulgaris</Emphasis> L.) varieties of Mesoamerican and Andean origins using new developed microsatellite markers     

Luciana Lasry Benchimol  Tatiana de Campos  Sérgio Augusto Morais Carbonell  Carlos Augusto Colombo  Alisson Fernando Chioratto  Eduardo Fernandes Formighieri  Lígia Regina Lima Gouvêa  Anete Pereira de Souza 《Genetic Resources and Crop Evolution》2007,54(8):1747-1762

A common bean genomic library was constructed using the ‘IAC-UNA’ variety enriched for (CT) and (GT) for microsatellite motifs. From 1,209 sequenced clones, 714 showed microsatellites distributed over 471 simple and 243 compound motifs. GA/CT and GT/CA were the most frequent motifs found among these sequences. A total of 123 microsatellites has been characterized. Out of these, 87 were polymorphic (73.7%), 33 monomorphic (26.8%), and 3 (2.4%) did not amplify at all. In a sample of 20 common bean materials selected from the Agronomic Institute Germplasm Bank, the number of alleles per locus varied 2–9, with an average of 2.82. The polymorphic information content (PIC) of each marker varied from 0.05 to 0.83, with a 0.45 average value. Cluster and principal coordinate analysis of the microsatellite data were consistent with the original assignment of the germplasm accessions into the Andean and Mesoamerican gene pools of common bean. Low polymorphism levels detected could be associated with the domestication process. These microsatellites could be a valuable resource for the bean community because of their use as new markers for genetic studies.  相似文献   

Structure of genetic diversity among common bean (<Emphasis Type="Italic">Phaseolus vulgaris</Emphasis> L.) varieties of mesoamerican and andean origins using new developed microsatellite markers     

Luciana Lasry Benchimol  Tatiana de Campos  Sérgio Augusto Morais Carbonell  Carlos Augusto Colombo  Alisson Fernando Chioratto  Eduardo Fernandes Formighieri  Lígia Regina Lima Gouvêa  Anete Pereira de Souza 《Genetic Resources and Crop Evolution》2007,54(8):1861-1762

A common bean genomic library was constructed using the ‘IAC-UNA’ variety enriched for (CT) and (GT) for microsatellite motifs. From 1,209 sequenced clones, 714 showed microsatellites distributed over 471 simple and 243 compound motifs. GA/CT and GT/CA were the most frequent motifs found among these sequences. A total of 123 microsatellites has been characterized. Out of these, 87 were polymorphic (73.7%), 33 monomorphic (26.8%), and 3 (2.4%) did not amplify at all. In a sample of 20 common bean materials selected from the Agronomic Institute Germplasm Bank, the number of alleles per locus varied 2–9, with an average of 2.82. The polymorphic information content (PIC) of each marker varied from 0.05 to 0.83, with a 0.45 average value. Cluster and principal coordinate analysis of the microsatellite data were consistent with the original assignment of the germplasm accessions into the Andean and Mesoamerican gene pools of common bean. Low polymorphism levels detected could be associated with the domestication process. These microsatellites could be a valuable resource for the bean community because of their use as new markers for genetic studies. Electronic supplementary material The online version of this article (doi: ) contains supplementary material, which is available to authorized users. An erratum to this article can be found at  相似文献   

用ISSR分析四川苎麻品种(系)间的遗传关系及雄性不育分子标记的建立   总被引：6，自引：0，他引：6  

丁明忠  潘光堂  张中华  杨燕  李立安 《核农学报》2008,22(2):183-187

本文从100条ISSR引物中筛选出21条引物,对8个四川苎麻品种(系)间的遗传关系进行了分析。PCR扩增结果表明,21条引物在8份材料中共扩增出86条带,平均每条引物扩增出4.1条,其中多态性位点71个,各引物扩增出的位点数3~8个不等,平均每条引物可以检测到3.4个多态性位点。聚类分析和遗传距离分析结果表明,供试品种川7、川8与其亲本遗传距离较远。3个杂交品种(川7、川8、川9)均表现特有的偏父本遗传现象。此外,本研究用ISSR引物U835筛选到了1个雄性不育分子标记,并将其扩增产物克隆测序,结果表明该序列大小为658bp。根据该序列,此标记被转化成稳定的SCAR标记,可用于苎麻雄性不育分子标记辅助育种。  相似文献   

白孔雀微卫星DNA遗传多样性及其分类地位     

包文斌  吴信生  徐琪  张红霞  胡飞  陈国宏 《农业生物技术学报》2008,16(6)

利用14对蓝孔雀(Pavo cristatus)和绿孔雀(P.muticus)的微卫星标记对白孔雀基因组DNA进行扩增,发现都能扩增出特异性条带,每对引物扩增的平均等位基因数为1.71,有7对引物具有较丰富的多态性,其中MCW0080和MCW0098标记期望杂合度分别为0.7207和0.7571,多态信息含量分别为0.658和0.695,表现出丰富的遗传多样性和较高的选择潜力。白孔雀×蓝孔雀和绿孔雀群体的遗传多样性分析结果表明,白孔雀、绿孔雀和蓝孔雀3个群体的杂合度和遗传多样性水平都很低,期望杂合度分别为0.2579、0.2482和0.2744,群体间的遗传分化系数为9.7%,群体间分化极显著(P<0.001),白孔雀与蓝孔雀的亲缘关系最近,Reynolds'遗传距离和基因流分别为0.0295和8.6112,表明白孔雀不是蓝孔雀一个亚种。  相似文献