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1.
《新疆农业大学学报》2017,(1)
为比较金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)重组质粒ClfA、FnBPA-A以不同组合方式和不同剂量免疫昆明小鼠的免疫效果。提取构建的ClfA、FnBPA-A重组质粒,分别以不同组合和不同剂量免疫昆明小鼠。通过ELISA法检测血清中抗体水平、效价以及对S.aurues的识别能力;通过攻毒后的免疫保护力、脏器菌体含量以及病理组织学观察评价不同免疫策略的免疫效果。结果显示ClfA、FnBPA-A以及联合组免疫后均能产生有效免疫应答和免疫保护力。各项免疫指标的检测均显示联合免疫组的免疫效果优于ClfA、FnBPA-A单独免疫组,高剂量免疫组的免疫效果优于低剂量免疫组。高剂量联合免疫组抗体效价可达1∶12 800,高于其他免疫组,免疫保护力可达100%。脏器菌体含量以及病理组织学观察结果也表明高剂量联合免疫组(ClfA+FnBPA-A)有较强抵抗S.aurues感染的能力。 相似文献
2.
采用小鼠碳粒廓清试验和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验研究苦荆茶多糖对小鼠免疫功能的影响.将试验小鼠分为3组,即空白对照组、阳性药物对照组(盐酸左旋咪唑按22.5 mg/kg体重给药)和苦荆茶多糖给药组(苦荆茶多糖按4 g/kg体重给药),给药方式为灌胃给药.7d后,测定小鼠脾脏指数、碳粒廓清指数、吞噬指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能.结果表明,苦荆茶多糖给药组和左旋咪唑给药组小鼠的碳粒廓清指数、脾脏指数和吞噬指数均显著(P＜0.01或P＜0.05)高于空白对照组,腹腔巨噬细胞吞噬功能显著(P＜0.05)高于空白对照组.说明苦荆茶多糖具有增强小鼠机体免疫力的作用. 相似文献
3.
以鞭毛蛋白(flagellin)作为载体蛋白,通过化学偶联至金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖(CP5),并在小鼠模型上检验多糖疫苗对小鼠存活及其乳腺的保护作用.将小鼠分为4组:生理盐水组、CP5单独免疫组、牛血清白蛋白(BSA)-CP5偶联组和flagellinCP5偶联组,每组10只,分别进行皮下免疫,均含CP5 10 μg;共免疫两次,两次免疫间隔3周.第2次免疫两周后,用金黄色葡萄球菌分别对小鼠腹腔、乳腺进行攻毒,并通过实时定量PCR对乳腺组织细胞因子IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-12的表达进行检测.结果表明,CP5偶联鞭毛蛋白疫苗对小鼠乳腺具有显著的保护效果,并在乳腺组织部位诱导了Th1型细胞因子表达,说明鞭毛蛋白是CP5的理想载体蛋白. 相似文献
4.
[目的]在实验室成功构建了含有对虾抗菌肽基因Pen-2的重组乳杆菌L.casei 393/pen的基础上,研究重组乳杆菌L.casei 393/pen经口服小鼠后的抗感染和免疫促进作用.[方法]将昆明系小鼠和balb/c系小鼠随机分为生理盐水组、乳杆菌L.casei 393组和重组乳杆菌L.casei 393/pen组,口服灌胃小鼠.每隔7d测量小鼠体重,28 d后检测小鼠的免疫器官指数和细胞因子IL-6的浓度,并用金黄色葡萄球菌对其进行腹腔注射攻毒.[结果]灌胃28 d后,重组乳杆菌L.casei 393/pen组的体重、免疫器官指数和细胞因子IL-6浓度均明显高于其他2个试验组;用金黄色葡萄球菌攻毒后,重组乳杆菌L.casei 393/pen组的死亡率比乳杆菌L.casei 393低50％,比生理盐水组低83.3％.[结论]重组乳杆菌L.casei 393/pen经口服小鼠后,具有显著的抗金黄色葡萄球菌感染和较好的免疫促进作用. 相似文献
5.
为研究黑蒜提取液对抗原诱导机体产生的特异性免疫应答和免疫保护作用的影响,将小鼠随机分为佐剂对照组、Trap(Target of RNAIII Activating Protein)对照组、黑蒜高剂量组、黑蒜低剂量组、生蒜高剂量组、生蒜低剂量组。持续灌胃给药4周后免疫注射金黄色葡萄球菌Trap蛋白,2周后加强免疫。二免1周后收集小鼠脾淋巴细胞,用Trap蛋白体外刺激,检测淋巴细胞增殖及其分泌的细胞因子水平。二免两周后采集血清,间接ELISA法检测Trap特异性IgG及其亚类,并用金黄色葡萄球菌Newman菌株攻毒。结果显示:黑蒜提取物高剂量组和低剂量组能显著提高血清抗Trap IgG和IgG2a,上调IFN-γ、IL~(-1)7a分泌水平,促进淋巴细胞增殖,提高攻毒保护率,且明显优于生蒜高剂量组、低剂量组和Trap对照组。为Trap的增强疫苗免疫效果提供了实验依据。 相似文献
6.
[目的]研究四味藏木香软胶囊对环磷酰胺致小鼠免疫低下模型免疫功能的影响。[方法]以昆明种小鼠为动物模型,分为空白组、模型组、四味藏木香软胶囊（大、小剂量）组和阳性药（盐酸左旋咪唑片）组,观察环磷酰胺致小鼠免疫低下模型腹腔巨噬细胞得吞噬率和吞噬指数,采用溶血素抗体测定法观察小鼠溶血素抗体生成和药物对DNFB所致小鼠迟发型变态反应的影响。[结果]与模型组相比,四味藏木香软胶囊能明显增加小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数;促进小鼠机体溶血素抗体的生成。试验中迟发型超敏反应的小鼠左右耳重量差异显著,且高于模型组和对照组,差异显著,有统计学意义。[结论]四味藏木香软胶囊能增强环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能。 相似文献
7.
本试验通过筛选抗原性较好的多杀性巴氏杆菌，经禽胚培养增殖细菌，灭活后加入免疫增强剂左旋咪唑和亚硒酸钠维生素Ｅ，制成油乳剂强经苗，试验表明，每头份含抗原量１００亿，左旋咪唑和亚硒酸钠维生素Ｅ合用组免疫效果最佳。注射本苗后，鸡群第４天产生免疫应答，第７天即可产生坚强的免疫力，试管凝集抗体效价达到１：８６，攻毒保护率达８３．３％，第１４天即可达１００％，免疫期６个月。免疫期内攻毒保护率为９７．６％，当试 相似文献
8.
【目的】探讨桔梗皂苷D对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞免疫功能的影响。【方法】无菌分离小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和巨噬细胞悬液。分别培养这2类细胞,并分为空白对照组、阳性对照组(左旋咪唑处理细胞)及25,50,75和100μg/mL桔梗皂苷D组,采用MTT法检测桔梗皂苷D对淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能的影响,采用ELISA法检测桔梗皂苷D对淋巴细胞IL-2、IL-4和巨噬细胞TNF-α、IL-12分泌的影响。【结果】桔梗皂苷D能够促进淋巴细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬功能,并可刺激淋巴细胞IL-2、IL-4和巨噬细胞TNF-α、IL-12的分泌,其中以50μg/mL组效果最佳。【结论】桔梗皂苷D能增强小鼠淋巴细胞和巨噬细胞的免疫调节活性。 相似文献
9.
对鸡传染性喉气管炎疫苗的选择进行免疫分析。将分别含有鸡传染性喉气管炎病毒基因的空载体制例和重组真核表达质粒分别肌注到雏鸡内,与攻毒后对免疫保护的效果进行观察。攻毒后,免疫应答被重组质粒所诱导,免疫保护率为1.25%,此基因疫苗可作为预防鸡传染性喉气管炎的一个方向。在鸡传染性喉气管炎疫苗的免疫分析中,重组质粒在免疫效果上有着良好的作用,值得更加深入的分析和应用。 相似文献
10.
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2020,(1)
【目的】探讨桔梗皂苷D对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞免疫功能的影响。【方法】无菌分离小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和巨噬细胞悬液。分别培养这2类细胞,并分为空白对照组、阳性对照组（左旋咪唑处理细胞）及25,50,75 和100 μg/mL桔梗皂苷D组,采用MTT法检测桔梗皂苷D对淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能的影响,采用ELISA法检测桔梗皂苷D对淋巴细胞IL-2、IL-4和巨噬细胞TNF-α、IL-12分泌的影响。【结果】桔梗皂苷D能够促进淋巴细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬功能,并可刺激淋巴细胞IL-2、IL-4和巨噬细胞TNF-α、IL-12的分泌,其中以50 μg/mL组效果最佳。【结论】桔梗皂苷D能增强小鼠淋巴细胞和巨噬细胞的免疫调节活性。 相似文献
11.
[目的]金黄色葡萄菌5型荚膜多糖(CP5)分别与鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白Flagellin、牛血清白蛋白(BSA)进行了偶联,并在小鼠模型上比较了这2种偶联疫苗所引起的体液免疫和粘膜免疫反应。[方法]以鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白为载体蛋白,与CP5进行化学偶联,并在小鼠乳腺部位免疫,然后通过检测小鼠乳汁中的抗体分析其对小鼠的免疫保护作用。[结果]乳腺局部免疫后flagellin-CP5组在乳腺部位引起了sIgA为代表的粘膜免疫反应和IgG为主的体液免疫反应。CP5和鞭毛蛋白的偶联物能够诱导更高的体液免疫以及粘膜免疫反应。[结论]鞭毛蛋白具有较强的免疫佐剂作用。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病二联核酸疫苗的构建及其免疫效力 总被引：2，自引：0，他引：2
[目的]构建猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病的二联核酸疫苗并研究其免疫效果。[方法]将辽宁某猪场发病猪病料中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的ORF5基因克隆至真核表达载体pIRES-neo的CMV启动子下游,然后用猪2型圆环病毒（PCV-2）的内蒙古分离株的ORF2基因替换pIRES的neo基因,构建真核表达质粒。通过W estern blot和IFA方法检测构建的重组质粒在BHK细胞中的表达情况。将重组质粒免疫Balb/c小鼠,检测免疫后的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群的数量。[结果]成功构建了重组表达质粒pIRES-ORF2-ORF5,W estern blot和IFA试验证实该重组质粒在BHK细胞内成功表达了目的蛋白。与灭活苗相比,pIRES-ORF2-ORF5核酸疫苗免疫小鼠ELISA抗体水平差异不显著;其脾T淋巴细胞亚群数量显著高于灭活疫苗免疫组。[结论]构建的二联核酸疫苗能够诱导小鼠产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应,为更好地防制猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病提供了条件。 相似文献
13.
猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病二联核酸疫苗的构建及其免疫效力 总被引：11，自引：2，他引：11
试验以猪繁殖与呼吸综合征（PRRSV）的ORF5和猪圆环病毒2（PCV-2）的ORF2为目的基因,以pIRES-neo为表达载体,构建了PRRSV—PCV-2二联核酸疫苗,并对其免疫原性进行了初步的研究,为研制安全有效的疫苗防制猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病提供基础。 相似文献
14.
研究通过骨髓瘤细胞SP2／O与经金黄色葡萄球菌（S．aureus）Trap蛋白免疫的小鼠脾细胞融合,并进一步筛选种单克隆化,获得了11株稳定分泌抗TraP蛋白的单克隆抗体（McAb）杂交瘤细胞株,其中8株McAb（2A1、3A6、381、184、2C5、4C7、5C3和2D8）亚类为IgGl,3株McAb（2A7、3A1和1c4）亚类为IgM,轻链均为K链。8株IgGl型McAb的小鼠腹水的抗体效价均达到1：128000,交叉实验结果显示这8株McAb不与S．aureus的ClfA、ClfB、Cna、FnbPA和IsdB蛋白以及链球菌的GapC蛋白反应,具有良好的特异性,Western—blotting结果显示这8株McAb识别的都是TraP的线性表位。 相似文献
15.
【目的】探讨CpGDNA对生长抑素DNA疫苗免疫小鼠免疫效果的影响。【方法】生长抑素质粒pES/2SS分别与CpG-ODN、pE-CpG、细菌DNA、脂质体配合免疫小鼠，疫苗剂量为20μg/只，佐剂等量混合，2周后加强免疫。【结果】雌性小鼠免疫后4、6周，疫苗组平均增重显著高于对照组(P<0.05)。CpGDNA和DNA疫苗联合免疫后SS抗体P/N值、IgG2a/IgG1、脾细胞活性、GH和IGF-I均比单一使用DNA疫苗的高(P<0.05)。免疫后4周，P/N值以pES/2SS + CpGODN组最高，SI值以pES/2SS+ CpG-ODN组最高。CpGDNA佐剂组GH从第2周开始升高，至第6周达高峰，显著高于pES/2SS组（P<0.01），CpG-ODN组GH高水平持续时间最长，至免疫后8周，仍显著高于pES/2SS组（P<0.01）。CpGDNA组IGF-I值显著高于pES/2SS疫苗组（P<0.05）。【结论】生长抑素基因免疫小鼠可以产生SS抗体，而含CpGDNA序列的核酸佐剂及脂质体粗品，可以增强生长抑素基因疫苗的效果。 相似文献
16.
[目的]探索鸡白细胞介素-18（IL-18）在H9禽流感（AI）灭活油乳苗免疫中的免疫佐剂作用.[方法]从鸡脾淋巴细胞中克隆鸡IL-18基因,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1（＋）中,构建真核表达质粒pIL-18.将重组真核表达质粒pIL-18、H9亚型AI灭活油乳苗及其二者联合分别免疫14日龄SPF鸡,检测其细胞免疫和体液免疫水平,评价鸡IL-18在H9亚型禽流感灭活油乳苗中的免疫增强作用.[结果]成功克隆了鸡IL-18全基因,大小为597 bp.质粒pIL-18和H9亚型AI灭活油乳苗联合免疫的SPF鸡所产生的HI抗体效价在接种第4周后明显高于H9亚型AI灭活油乳苗免疫组;其T淋巴细胞的增殖反应也强于H9亚型AI灭活油乳苗免疫组.[结论]质粒pIL-18能提高H9亚型禽流感灭活油乳苗诱发的免疫应答,为研究防制禽流感的新型疫苗提供了新思路. 相似文献
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哈维氏弧菌灭活疫苗在养殖大黄鱼中的应用与评价 总被引：1，自引：0，他引：1
将分离自大黄鱼Pseudosciaena crocea的病原菌GYC1108-1,在体积分数为0.5%的福尔马林溶液中灭活24 h,制成灭活全菌苗（细菌含量为6×109cfu/mL）;用该灭活菌苗分别免疫小白鼠和大黄鱼,并检测小白鼠和大黄鱼血清中抗体效价及疫苗对鱼体的免疫保护力。结果表明：小白鼠经注射疫苗后28 d,血清中抗体效价最高达1∶4 000,大黄鱼经注射和浸泡免疫后,血清中最高抗体效价分别为1∶1 280和1∶320,免疫保护率分别为75%和65%;抗GYC1108-1的抗体与不同种属细菌间存在着交叉反应,其分类地位越近,交叉反应也越大;用研制的疫苗开展大黄鱼生产性免疫预防试验,受免疫组鱼存活率有较大提高,分别为85%和86%,而未免疫组鱼存活率仅有70%,表明疫苗可有效防治养殖大黄鱼细菌性病害。 相似文献
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【目的】白介素-7是动物体一种重要的多功能细胞因子,在促进B细胞、T细胞的形成和发育,在协同其它细胞因子提高机体免疫能力等方面发挥重要作用。本试验利用犬细小病毒VP2 DNA疫苗,在小鼠体内分析了犬白介素-7（cIL-7）基因的免疫增强作用。【方法】采用RT-PCR方法从犬脾淋巴细胞中扩增cIL-7基因,然后将cIL-7基因插入到真核表达载体pcDNA3.1A中,分别构建成与Myc/His标签融合和非融合的cIL-7真核分泌型表达载体pcDNA-cIL7/MH和pcDNA-cIL7。由磷酸钙介导将pcDNA-cIL7/MH质粒转染HEK 293T细胞使其进行瞬时表达,以Western-blot检测构建的表达载体能否介导cIL-7基因在真核细胞中进行分泌表达。用已构建的VP2表达载体pcDNA-CD5-VP2与pcDNA-cIL7载体共免疫小鼠,并设pcDNA-CD5-VP2单免疫小鼠和pcDNA-cIL7单免疫小鼠作为对照。免疫后通过ELISA方法检测抗体水平,并通过淋巴细胞增殖实验和ELISA方法分别检测免疫后35 d小鼠脾脏淋巴细胞刺激指数和γ-干扰素的表达水平。【结果】本试验扩增的cIL-7基因序列与GenBank中犬的序列完全一致。构建的表达载体能够介导cIL-7基因在HEK293T细胞中进行分泌表达。动物免疫试验结果显示,cIL-7与VP2共免疫组小鼠血清的抗体滴度和中和抗体效价分别极显著和显著高于VP2单免疫组（P＜0.01和P＜0.05）;共免疫组小鼠淋巴细胞刺激指数和γ-干扰素表达水平也显著高于VP2单免疫组（P＜0.05）。【结论】cIL-7基因可增强小鼠对VP2 DNA疫苗的免疫应答反应。 相似文献
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XUE Chun-lin MAO Da-gan YANG Li-guo CHENG Bao 《中国农业科学(英文版)》2007,6(7):882-889
To study the immune effect of CpGDNA on somatostatin （SS） DNA vaccine, the 20-day-old experimental mice were immunized with 20 lag SS eukaryotic expression plasmid pES/2SS with different adjuvants in equal dose, such as the synthetic CpG-ODN, the pE-CpG plasmid, E. coli DNA and the crude liposome. A booster was given two weeks later. The results showed that the body weight gain of female mice in the SS immunized group was higher than that of the control （P 〈0.05）. The levels of antibodies against SS, IgG2a/IgG1, spleen lymphocyte proliferation activity and the concentrations of GH and IGF-Ⅰ in the DNA vaccine groups combined with CpGDNA were significantly increased compared to that of the group immunized with DNA vaccine alone. All these suggested the recombinant SS expression plasmid can stimulate animals to produce antibodies against SS, and CpGDNA adjuvant can enhance the immune effect of DNA vaccine against SS and influence the concentration of GH and IGF-Ⅰ . 相似文献