共查询到20条相似文献，搜索用时 31 毫秒
1.
【目的】研究潮霉素、卡那霉素和头孢霉素对尾巨桉愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响,确立抑制农杆菌生长的头孢霉素质量浓度。【方法】以尾巨桉无菌苗茎段为外植体,先后接种于添加不同质量浓度抗生素的愈伤组织诱导培养基、不定芽诱导培养基以及生根培养基上,统计愈伤组织诱导率、不定芽诱导率和不定芽生根率,观察头孢霉素对农杆菌生长的影响。【结果】(1)培养基中的潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,200 mg/L时,尾巨桉外植体的愈伤组织诱导率分别为6.7%,12.1%和26.7%;(2)潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,250 mg/L时,不定芽分化受到明显抑制,不定芽诱导率分别仅有2.6%,10.2%和7.6%;(3)潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,250 mg/L时,不定芽生根困难,生根率分别为10.2%,16.2%和10.1%;当头孢霉素质量浓度≥200 mg/L时,农杆菌生长被完全抑制。【结论】尾巨桉对不同抗生素的敏感性存在差异,在尾巨桉遗传转化过程中,抗性愈伤组织与不定芽诱导的潮霉素适宜质量浓度为10 mg/L,卡那霉素为20 mg/L;生根诱导适宜的潮霉素和卡那霉素的质量浓度分别为15 和25 mg/L;抑制农杆菌生长的头孢霉素较适宜的质量浓度为200 mg/L。 相似文献
2.
为建立尾巨桉高效再生体系,研究基本培养基对尾巨桉再生的影响,以尾巨桉优良无性系无菌苗茎段为外植体,探讨MS、SDM和SPM 3种基本培养对尾巨桉愈伤组织诱导、不定芽分化以及增殖的影响。结果表明,在添加了2 mg/L PBU和0.05 mg/LIAA的MS培养基上,茎段外植体5 d后愈伤组织诱导率达96.3%以上;将愈伤组织接种在添加1 mg/L 6-BA和0.05 mg/L NAA的MS培养基上,诱芽率达91.8%,不同基本培养基对不定芽的增殖及伸长的影响差异达到极显著水平。 相似文献
3.
反义AcInv基因转化马铃薯方法的研究 总被引：11，自引：6，他引：11
马铃薯反义AcInv基因,采用农杆菌介导法,选用生产上推广的9个普通四倍体栽培种,对影响转化的各个因素进行了优化研究。结果表明:在愈伤组织诱导过程中,卡那霉素(Km)的适宜浓度为100 mg/L;生根过程中为50 mg/L。外植体的预培养为:茎段2 d,叶盘3 d效果较好;农杆菌浓度当OD600值为0.5时对茎段和叶盘的转化效果均较佳;茎段和叶盘侵染时间分别达8 min和10 min时转化率较高;外植体与农杆菌共培养时间分别为2 d和3 d时,茎段和叶盘的转化率较高;各个品种的外植体在卡那霉素抗性培养基上均能形成愈伤组织,但只有1号(“大西洋”)最后从愈伤组织上分化成苗,形成正常植株,植株再生率为11.2 %,PCR扩增检测表明大部分转基因植株为阳性。 相似文献
4.
5.
用绿玉菊叶片、不带腋芽茎段、带腋芽茎段和茎尖为外植体进行离体培养研究,分析了影响愈伤组织形成的因素及分化困难的原因.研究结果表明:在愈伤组织诱导时,不带腋芽茎段较嫩叶易产生愈伤组织,是首选外植体;6-BA1. 0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1的激素配比对茎段愈伤组织诱导有利,诱导率高达100%;在MS基本培养基中,pH值为5.4较适宜愈伤组织的分化,且6-BA3.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1对愈伤组织分化不定芽的效果较好,分化不定芽均数达11.10个.茎尖及带腋芽茎段在MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1的培养基上,能直接诱导出大量生长健壮的丛生芽,生根在MS+NAA0.05mg·L-1的培养基上进行,生根率高达100%,根多而壮,植株长势好. 相似文献
6.
7.
农杆菌介导的茄子愈伤组织遗传转化研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以茄子愈伤组织为材料,在优化愈伤组织成苗培养基的基础上,采用正交试验,进行农杆菌介导的茄子愈伤组织遗传转化研究.结果显示,在MS+6-BA(1 mg·L-1)+IAA(0.2 mg·L-1)+KT(1.5 mg·L-1)的培养基上茄子的愈伤组织诱导成苗率最高.结果表明,影响茄子愈伤组织转化的主要因素是预培养时间,其次是侵染时间,再次是共培养时间,并且预培养9 d.侵染20 min,共培养1 d时转化率最高.分子检测表明,11株阳性植株中有7株成功扩出bar基因序列,说明这7株为转基因植株,转基因植株占阳性植株的比率为63.6%. 相似文献
8.
以巨尾桉带腋芽的半木质化茎段为最初外植体,通过正交试验优化法,对巨尾桉组培快繁体系建立过程中各项培养基进行了研究,建立起良好的巨尾桉组织培养再生体系,为桉树遗传转化和良种保存提供材料和技术支持,同时对根癌农杆菌介导的叶盘法转化体系进行优化。结果表明:叶片分化芽率提高到26.7%,理论上最佳的转基因巨尾桉叶片直接分化培养基为WPM+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.15 mg/L,生根培养基中筛选转基因芽段的卡那霉素选择压为20 mg/L。 相似文献
9.
史密斯桉愈伤组织的诱导及分化 总被引：2，自引：0，他引：2
通过研究史密斯桉愈伤组织诱导及分化成苗,发现以史密斯桉老茎断面萌发的新枝茎尖第1~7节作外植体,使用0.2%HgCl2消毒2~3min效果较好;2,4-D对史密斯桉愈伤组织的形成是必要的,使用1/2MS 2,4-D1.5mg·L-1 KT1.5mg·L-1或1/2MS 2,4-D1.5mg·L-1 ZET1.5mg·L-1能较好诱导愈伤组织形成;使用1/2MS 6-BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1培养基能较好诱导茎形成的愈伤组织分化成芽,进而成苗,诱导率虽低(仅为20%),但增殖系数较高(高达5~10);叶形成的愈伤组织不能分化成芽;NAA与细胞分裂素配比诱导愈伤组织分化成芽优于IAA、IBA;6-BA诱导史密斯桉愈伤组织成苗效果最好,其最佳质量浓度为1.0~2.0mg·L-1;0.5~2.0mg·L-1的GA对史密斯桉苗的伸长有显著作用;20mg·L-1的Vc或0.5%活性炭能明显减轻史密斯桉愈伤组织的褐化作用。 相似文献
10.
采用农杆菌介导法对紫穗槐茎段诱导的愈伤组织进行遗传转化研究。确定了卡那霉素临界耐受浓度为40mg/L。菌液浓度与侵染时间的正交试验结果表明:侵染菌液OD600为0.8、侵染时间为30min时转化效率最高,达17.95%。GUS染色检测分析表明:含pBI121-GUS质粒DNA农杆菌侵染转化的愈伤组织其抗性不定芽和再生植株根和叶均呈蓝色。转化植株叶PCR检测结果表明外源GUS基因已整合到紫穗槐基因组中。以上结果表明建立了以茎段诱导愈伤组织为转化受体、农杆菌介导的紫穗槐高效遗传转化体系。为了验证其可重复性,又进行了pBI121-GFP基因的转化,T0代再生植株PCR检测整合率达85%,在488nm蓝光源激发下转化株的顶芽产生绿色荧光,说明转入的基因在35S启动子下过量表达。此遗传转化体系可应用于转基因育种。 相似文献
11.
为优化农杆菌介导棉花胚性愈伤的遗传转化体系,我们以2个栽培棉花品种新陆中36、新陆中45的胚性愈伤组织作为受体材料,利用农杆菌介导法转化Bt基因,研究愈伤组织状态、菌液处理浓度、侵染时间及共培养条件等因素对转化率的影响。结果表明:(1)预培养15~20天呈颗粒状、生长旺盛、分散性好的胚性愈伤组织适于转化,其中以继代18天的新陆中36愈伤组织转化率最高,为80%,不同基因型间存在差异。(2)菌液浓度0.4~0.5 OD600,农杆菌侵染10~15分钟是这两种胚性愈伤组织的最佳侵染时间。(3)50 mg/L是卡那霉素对抗性胚性愈伤起到有效筛选的最佳浓度。通过本研究实现了对受体材料、农杆菌侵染浓度、侵染时间和共培养条件的进一步摸索,棉花抗性胚性愈伤再生培养体系得到进一步的优化。 相似文献
12.
紫山药愈伤组织的诱导及其分化 总被引：1，自引：0，他引：1
以紫山药无菌苗为试材,研究了植物生长调节剂种类、材料类型、光暗条件等对其愈伤组织诱导及其分化的影响。结果表明:(1)细胞分裂素6-BA和KT对紫山药愈伤组织的诱导效果差异不显著,适合紫山药茎段愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为KT 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1或6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1;(2)同一培养基上不同外植体愈伤诱导效果存在差异,在植物生长调节剂配比6-BA 2.0mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1下,微型块茎、茎段的愈伤组织诱导率比叶片高,分别为91.167%、86.300%、45.167%;(3)添加0.25g·L-1的活性炭能明显减轻紫山药茎段愈伤组织的褐化,愈伤生长良好,且愈伤组织的诱导率较高;(4)光暗条件对紫山药茎段愈伤组织诱导率的影响差异不显著,但暗处有利于愈伤组织的增殖生长;(5)不同植物生长调节剂配比对愈伤组织不定芽分化的影响显著,适合紫山药愈伤组织再分化的最佳植物生长调节剂配比为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.02mg·L-1,诱导率达50%以上,芽苗生长粗壮。 相似文献
13.
为建立一串红高效再生体系,研究了0.1% HgCl2不同灭菌时间对一串红种子和外植体污染率和启动率(发芽率)的影响,以及不同激素组合对一串红外植体茎段、带节茎段和叶片愈伤组织诱导率及其分化率的影响。结果表明：采用0.1% HgCl2处理9 min是一串红外植体较为理想的表面灭菌时间,而一串红种子处理8 min有较低的污染率和较高的发芽率;采用无菌苗的茎段和叶片能诱导出质量较好的愈伤组织,但其进一步分化产生不定芽的能力较差,而采用带节茎段诱导愈伤获得了较多的分化苗,且1.5 mg ·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.2 mg ·L-1 NAA配方适于一串红愈伤组织的诱导,2.0 mg ·L-16-BA+0.1 mg ·L-1 NAA组合是适宜一串红愈伤组织分化的激素配方。此外,含0.5 mg ·L-1 NAA的1/2MS固体培养基能使一串红分化苗生根率在90%以上,且移栽后一串红成活率可达80%以上。 相似文献
14.
雪莲磷脂酰乙醇胺结合蛋白（Phosphatidyl ethanolamine-binding family protein, PBP）基因表达产物与细胞膜的冷稳定性有关，可能在植物抗寒方面起一定作用。本研究将XLPBP基因以农杆菌介导的方法转化新陆早17号、新陆早13号、新陆早1号3个品种陆地棉，通过对不同激素浓度、预培养时间、菌液浓度和浸菌时间等因素对转化培养物的影响以及茎段外植体对卡那霉素（Kan）的敏感性等方面的探讨，确定了新陆早13号外植体材料（茎段）的最佳转化条件，即：在OD600为0．4的农杆菌菌液中侵染10min，在茎段最适培养基（含0．1mg／LKT和0．1mg／L2，4-D，pH5．8）上进行预培养2d，共培养2d，转至不含选择压的培养基（含Cef 500 mg／L）上进行延迟培养7d，再进行选择培养，茎段愈伤分化达25％（诱导出愈伤组织的外植体数占接种的外植体数）以上；茎段转化适宜的选择压力为Kan 50 mg／L；在获得的抗性愈伤中8％左右经检测为GUS阳性。 相似文献
15.
以芍药为研究对象,建立芍药高效的遗传转化再生体系,试验筛选最佳结果为:以茎段为外植体,用HgCl2消毒15min,基本培养基为1/2MS,抗坏血酸(100mg·L-)1,诱导愈伤阶段的植物生长调节剂(PGR)配比为ZT(2.0mg·L-1)+IAA(0.4mg·L-)1,胚状体分化阶段不加植物生长调节剂PGR;生根阶段为IAA(0.4mg·L-)1。抗性筛选时适宜的卡那霉素Km浓度为4mg·L-1,遗传转化受体为胚性愈伤组织。 相似文献
16.
以商洛黄芩的种子、叶片和带节茎段为外植体研究不同浓度TDZ对黄芩不同外植体愈伤诱导再生情况的影响。研究结果表明,叶片在MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 0.75 mg.L-1培养基上再生效果最好,愈伤诱导率为75.99%,带节茎段在MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 1.0 mg.L-1培养基上再生效果最好,愈伤诱导率为80.73%,黄芩种子在MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 1.0 mg.L-1培养基上再生效果最好,愈伤诱导率为76.14%。通过比较三者最高愈伤诱导率,得出商洛黄芩最佳再生外植体为黄芩带节茎段,最佳TDZ浓度培养基配方为MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 1.0 mg.L-1。 相似文献
17.
将供试品种的带茎尖和腋芽的茎段,用70%酒精浸泡30 s,然后用20%的次氯酸钠溶液浸泡30 min,无菌水冲洗4次,消毒处理后剥取0.1~0.3 mm的茎尖,接种于以MS为基本培养基添加6-BA、IAA、NAA等外源激素的培养基中,研究了不同条件对愈伤组织诱导芽形成和芽继代增殖、生根和移栽效果的影响。结果表明,以MS为基本培养基,添加6-BA 1.0 mg·L-1和IAA0.5 mg·L-1为较适宜的外植体诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽的培养基。最佳继代增殖培养基为6-BA2.0 mg·L-1和NAA0.1 mg·L-1。最佳生根培养基为1/2MS添加NAA0.2 mg·L-1和IAA1.0 mg·L-1。25 d后,组培苗移栽成活率达到98%以上。 相似文献
18.
以重瓣长寿花的茎段和叶片为外植体,利用单因子和交叉试验设计,探究了不同激素组合对叶片和茎段愈伤组织的诱导、分化及生根的影响,以及不同栽培基质对移栽成活率的影响。结果表明:适合愈伤组织诱导的外植体是茎段,最佳愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA0.10 mg·L-1+2,4-D1.00 mg·L-1,以茎段为外植体的愈伤组织诱导率为100.000%;最佳的愈伤组织分化培养基是MS+6-BA1.00 mg·L-1,增殖系数达19.920;最佳的生根培养基是1/2MS+IBA0.50 mg·L-1,生根率为100.000%,根长3.87 cm;最佳的栽培基质是V(园土)∶V(蛭石)=2∶1,此时移栽成活率为95.710%。 相似文献
19.
利用正交试验设计,以百子莲胚性愈伤组织为受体材料,通过GUS染色确定遗传转化率,对农杆菌介导的百子莲遗传转化体系进行了优化。结果表明,百子莲遗传转化优化体系为：愈伤组织预培养7 d、菌液浓度（OD600）为0.9、侵染时间为5 min、预培养培养基中乙酰丁香酮（AS）的浓度为50μmol.L-1、侵染菌液中乙酰丁香酮（AS）的浓度为100μmol.L-1。在优化的转化条件下,可提高农杆菌EHA105菌株介导的百子莲愈伤组织遗传转化率。 相似文献