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《中国兽医杂志》2019,(5)
为研制沙门菌马流产凝集试验阳性血清国家参考品,以提高沙门菌马流产凝集试验抗原国家参考品、抗原及阳性血清国家参考品、阳性血清的半成品和成品检验的可靠性和可重复性,本研究按照沙门菌马流产凝集试验阳性血清制备的现行标准及标准物质研究的相关规定,规范了沙门菌马流产凝集试验阳性血清参考品的制备及检定方法。用沙门菌马流产凝集试验抗原国家参考品测定阳性血清效价,将血清稀释至1∶1 600、1∶3 200、1∶6 400,分别准确定量分装后,按照特定的冻干曲线冻干,分别用抗原国家参考品测定冻干血清的效价,测定3种效价血清的均一性和稳定性,将阳性血清国家参考品应用于生产检验。结果表明,该参考品均一性良好,在有效期内效价稳定,可以作为国家参考用品应用。 相似文献
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按照国家一级标准物质要求和禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程规定的抗原制备方法,研制了一批禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原国家参考品,用于检测禽流感病毒（H5亚型）制品生物效价和血凝抑制操作过程中的校验。该批抗原经过8家单位对其协作标定后对结果进行统计学分析,确定该批禽流感抗原的血凝效价为1：80。另对所研制的禽流感抗原均一性、稳定性、无菌检验、剩余水分测定、真空度测定等各项指标进行检测,结果均符合禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程和国家一级标准物质要求。说明该禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原可以作为国家参考品。 相似文献
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为制备和标定兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品,本试验制备了猪瘟病毒阴性、弱阳性和强阳性血清,通过过滤、分装、冻干、熔封,获得3亚批候选物,并进行了检验、协作标定和定值。结果显示：物理性状、无菌检验、安全检验、支原体检验、真空度测定、均匀性检验和保存有效期试验均合格;剩余水分均小于4％;特异性检验结果均为口蹄疫、伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病、牛病毒性腹泻／粘膜病抗体阴性,并且弱阳性和强阳性血清能中和猪瘟兔化弱毒而阴性血清不能中和;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT—PCR核酸检测结果均为阴性;经协作标定定值,其兔体中和效价分别为：阴性、1：100.928±0.103、1：102.928±0.103,表明该候选物可以作为国家参考品。 相似文献
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为了制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品,对中国兽医微生物菌种保藏管理中心保藏的10株来源背景清晰的鸡白痢沙门氏菌菌株的形态、生化特性、培养特性、血清学特性、抗原性进行了鉴定,并进行了变异检查及沙门氏菌基于inv A基因的PCR检测。结果表明,CVCC79201株及CVCC79207株分别符合鸡白痢沙门氏菌标准型菌株及变异型菌株的特性,CVCC79201株菌制备的抗原与WHO标准实验室提供的AntiS.Pullorum Serum(S)及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集,CVCC79207株菌制备的抗原与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的弱阳性血清发生75%凝集,与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的强阳性血清及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集。用其制备免疫抗原免疫家兔后获得的阳性血清效价较高于鸡白痢沙门氏菌阳性血清国际标准品。结果证明,CVCC79201株及CVCC79207株可分别用于制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品。 相似文献
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为进一步完善中国大肠杆菌菌体微量凝集试验定型血清库，改良微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清的制备工艺，本试验选取大肠杆菌O50、O60、O117、O131血清型进行定型血清制备方法的探究。首先用大肠杆菌不同血清型的参考菌株制备灭活抗原，而后多次免疫家兔以采血获得粗血清，用微量凝集试验的方法确定不同粗血清的交叉凝集素及凝集效价，再通过交叉凝集素吸收法结合血清稀释法消除非特异性凝集，最终研制出特异性良好的微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清。本研究确定了大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型粗血清的主要交叉凝集素，最终成功研制出特异性良好的微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型血清共4种，凝集效价在1：256至1：2 048之间，其中微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60定型血清无交叉凝集素，为单因子定型血清，微量凝集试验用大肠杆菌O117、O131定型血清存在1~2种非特异性的交叉凝集素O14和O107。本研究作为大肠杆菌O抗原定型血清制备工艺摸索过程中的重要部分，为完善中国大肠杆菌菌体微量凝集试验定型血清库，进一步改良微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清的制备方法提供了重要理论依据。 相似文献
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《中国畜牧兽医》2020,(8)
为进一步完善中国大肠杆菌菌体微量凝集试验定型血清库,改良微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清的制备工艺,本试验选取大肠杆菌O50、O60、O117、O131血清型进行定型血清制备方法的探究。首先用大肠杆菌不同血清型的参考菌株制备灭活抗原,而后多次免疫家兔以采血获得粗血清,用微量凝集试验的方法确定不同粗血清的交叉凝集素及凝集效价,再通过交叉凝集素吸收法结合血清稀释法消除非特异性凝集,最终研制出特异性良好的微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清。本研究确定了大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型粗血清的主要交叉凝集素,最终成功研制出特异性良好的微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型血清共4种,凝集效价在1∶256至1∶2 048之间,其中微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60定型血清无交叉凝集素,为单因子定型血清,微量凝集试验用大肠杆菌O117、O131定型血清存在1～2种非特异性的交叉凝集素O14和O107。本研究作为大肠杆菌O抗原定型血清制备工艺摸索过程中的重要部分,为完善中国大肠杆菌菌体微量凝集试验定型血清库,进一步改良微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清的制备方法提供了重要理论依据。 相似文献
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为了解伊犁州马属动物马流产沙门氏菌的流行现状,采集伊犁州昭苏县、尼勒克县、察布查尔锡伯自治县的母马、流产马、驴血清和全血样品共982份,分别用ELISA、荧光PCR方法对马流产沙门氏菌病进行血清抗体和病原学检测。荧光PCR检测结果显示：察布查尔锡伯自治县驴马沙门氏菌病阳性率为29.7%;马流产沙门氏菌病阳性率为2.5%,其中,昭苏县马流产沙门氏菌病阳性率为1%、尼勒克县马流产沙门氏菌病阳性率为4.1%、察布查尔锡伯自治县马流产沙门氏菌病4%;流产马、驴马流产沙门氏菌马流产沙门氏菌病阳性率为92.5%;结果表明：马流产沙门氏菌病在这些养殖场点得到了很好的预防,但是马流产沙门氏菌引起的马流产依然较为普遍,特别是驴的马流产沙门氏菌病感染率较高,需要定期对马流产沙门氏菌病进行监测并加强防控。本调查为伊犁州马属动物马流产沙门氏菌病的防控提供了数据支持。 相似文献
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为研发禽沙门氏菌抗体检测方法,采用大肠杆菌系统表达沙门氏菌属保守的菌毛fimY基因,纯化的目的蛋白经Western blot分析,能与免疫鸡血清和感染鸡血清产生特异性反应条带,证明该重组蛋白既有反应原性也有免疫原性。以此纯化蛋白为抗原建立了间接ELISA(fimY-ELISA)。通过检验已知沙门氏菌鸡源血清、相关非沙门氏菌鸡源血清对fimY-ELISA进行评价,发现其在敏感性方面高于快速平板凝集试验(RPA)和自制的脂多糖抗原ELISA(LPS-ELISA)、肠炎沙门氏菌抗原ELISA(SE-ELISA),但在特异性方面不如LPS抗原ELISA;在与RPA的符合率方面与LPS-ELISA、SE-ELISA基本一致。 相似文献
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用微量血清凝集反应检测马副伤寒性流产病颜思通（广州动植物检疫局，５１００１０）马副伤寒性流产病，是国家公布的进境动物应检疫的疫病之一，常规采用试管凝集试验进行检验。作者在对该病按《动物检疫操作规程》进行检疫的同时，尝试在９６孔微量板上进行微量凝集试验... 相似文献