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1.
为了探究黄藤素的体外细胞毒性,采用不同浓度的黄藤素作用山羊子宫内膜上皮细胞（EECs）后,采用MTT法绘制细胞生长曲线;倒置显微镜下观察细胞生长状态;瑞氏-姬姆萨染色法观察细胞形态学变化并通过测定乳酸脱氢酶（LDH）含量检测细胞膜的完整性。结果显示,当黄藤素的浓度为10~227 μg/mL时,黄藤素对EECs有促增殖的作用;当浓度大于227 μg/mL时出现细胞增殖抑制现象,药物对细胞的半数增殖抑制率（IC50）为360 μg/mL;瑞氏-姬姆萨染色结果显示,100、200 μg/mL的黄藤素作用于EECs时均未对其细胞核、细胞浆的形态产生影响;LDH结果显示,药物浓度≥250 μg/mL时细胞LDH的释放量极显著高于正常细胞组（P<0.01）。综上所述,黄藤素作用于山羊EECs后呈现一定的毒性作用,且呈现显著的剂量依赖效应,作用于EECs的安全剂量范围为≤250 μg/mL。 相似文献
2.
试验旨在确定H9N2亚型猪源性流感病毒（SIV）在小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）中增殖的最佳条件。将PMVEC解冻、复苏、培养,取长成单层的PMVEC,在不同浓度TPCK-胰蛋白酶维持液（0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0 μg/mL）、不同H9N2亚型SIV（A/swine/HeBei/012/2008/（H9N2）接种剂量（1：10、1：100、1：1 000、1：10 000、1：100 000、1：1 000 000和1：10 000 000）及不同病毒吸附时间（0.5、1.0、2.0和3.0 h）条件下观察PMVEC形态变化,并测定细胞上清液中H9N2亚型SIV的HA滴度。在未加病毒的情况下,低于0.6 μg/mL的TPCK-胰蛋白酶对PMVEC的生长未造成任何影响,但随着TPCK-胰蛋白酶浓度的增加,PMVEC开始出现肿胀、变圆,甚至脱落;采用含有0.6 μg/mL TPCK-胰蛋白酶维持液将H9N2亚型SIV稀释为不同的浓度感染PMVEC,在0.3 μg/mL TPCK-胰蛋白酶维持液、10-2病毒稀释倍数感染条件下48和72 h HA滴度分别为4.6log2和6.4log2;病毒吸附时间为2 h且中间震荡20 s的条件下H9N2 HA滴度最佳。结果表明,当TPCK-胰蛋白酶维持液浓度为0.3 μg/mL、病毒接种浓度为10-2、吸附时间为2 h且中间震荡20 s时,H9N2亚型SIV在PMVEC中增殖最佳,达到6.8log2。 相似文献
3.
苜蓿多糖和黄芪多糖对肉仔鸡淋巴细胞增殖的影响 总被引：3，自引：2，他引：1
本试验旨在研究苜蓿多糖(water soluble alfalfa polysaccharide,WSAP)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)2种不同植物来源的多糖对肉仔鸡外周血液和脾脏中淋巴细胞增殖的影响.将4种不同浓度的WSAP和APS分别加入到鸡血液淋巴细胞和脾脏淋巴细胞中,培养48 h后用MTT法测定T、B淋巴细胞增殖的变化.结果表明:WSAP、APS在一定浓度下能显著促进肉仔鸡血液和脾脏中淋巴细胞的增殖,其中WSAP以20 μg/mL,APS以100 μg/mL效果最好.此外,APS对肉仔鸡淋巴细胞增殖的效果要好于WSAP,但APS的有效添加量比WSAP多.由此表明WSAP、APS促进淋巴细胞增殖可能是其发挥免疫作用的机制之一,且不同植物来源的多糖免疫效果不同. 相似文献
4.
试验选用1日龄AA肉仔鸡180只,随机分为3组。Ⅰ组为对照组,添加硫酸锰（MnSO4·H2O）120毫克/千克;Ⅱ组添加蛋氨酸螯合锰60毫克/千克;Ⅲ组分别添加蛋氨酸螯合锰（Met-Mn）30毫克/千克和硫酸锰（MnSO4·H2O）60毫克/千克。研究不同方式添加锰对肉仔鸡生产性能的影响。结果表明,3种不同方式添加锰对肉仔鸡生产性能无显著影响（P〉0.05）,但Ⅲ组的饲料成本有所降低。因此,在肉仔鸡日粮中以第三种方式（30毫克/千克Met-Mn＋60毫克/千克MnSO4·H2O）添加锰效果最佳。 相似文献
5.
为研究镰刀菌毒素玉米赤霉烯酮（ZEA）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）及其联合作用对动物免疫功能的影响,试验以CTLL-2细胞（细胞毒性T淋巴细胞株）为材料,用不同浓度的ZEA （0、5、10、20 μg/mL）、DON （0、0.5、1、2 μg/mL）及联合（空白组、5 μg/mL ZEA、0.5 μg/mL DON、5 μg/mL ZEA＋0.5 μg/mL DON）处理CTLL-2细胞48 h,采用ELISA法检测了细胞内及培养上清液中颗粒酶B （GZMB）、穿孔素（PFP）、干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）等细胞因子的含量。结果显示,ZEA、DON能够降低CTLL-2细胞胞内及培养上清液中PFP、GZMB、IFN-γ的浓度,增加TNF-α浓度,染毒组与对照组相比均有显著或极显著差异（P＜0.05;P＜0.01）,且均呈剂量效应关系;ZEA、DON联合染毒表现为加性效应。结果表明,ZEA、DON及其联合作用可通过影响免疫细胞因子的分泌,降低免疫细胞杀伤活力,间接影响机体体液免疫和细胞免疫的负调节,从而导致动物机体免疫机能下降。 相似文献
6.
共轭亚油酸对环磷酰胺免疫抑制肉仔鸡巨噬细胞溶菌酶含量的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
本研究采用健康肉仔鸡和环磷酰胺免疫抑制肉仔鸡模型,通过体外细胞培养试验来研究2种共轭亚油酸异构体（c9,t11-CLA和t10,c12-CLA）对肉鸡巨噬细胞溶菌酶分泌水平的影响。选取24只1日龄爱拔益加(Arbor Acre )肉仔鸡随机分为免疫抑制处理组和健康肉仔鸡组,分别于14、15和16日龄进行环磷酰胺（cyclophosphamide,CY;80 mg/kg体重）腿肌注射和等体积生理盐水腿肌注射。巨噬细胞体外培养试验采用含不同浓度（0、25、50和100 μmol/L）c9,t11-CLA、t10,c12-CLA或1︰1的混合物（CLA混合物）。结果表明,t10,c12-CLA可减缓CY对巨噬细胞溶菌酶合成和分泌的抑制作用。添加高剂量的t10,c12-CLA效果好于低剂量添加。c9,t11-CLA对巨噬细胞溶菌酶的分泌无明显影响。 相似文献
7.
将体外培养的肉仔鸡胸肌卫星细胞（SC）按地塞米松（DEX）处理浓度（0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/mL）分为7组,分别测定SC的存活率（MTT法）、丙二醛（MDA）、氧自由基（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽硫转酶（GST）含量或活性。筛选DEX处理的最佳时间和浓度以便优化肉仔鸡胸肌SC的氧化应激模型。结果表明,随DEX浓度升高,MDA和ROS产生量升高（P〈0.01）,SOD与GST活性显著降低（P〈0.01）。随着DEX处理时间的延长,SC的存活率及GST和SOD活性均有所下降,MDA和ROS产生量上升。使用0.12 mg/mL的DEX处理SC 24 h后,SC存活率显著降低（P〈0.01）。说明DEX浓度为12 mg/mL处理24 h能使肉仔鸡骨骼肌SC产生适度的氧化应激,可以作为肉仔鸡胸肌卫星细胞的氧化应激模型。 相似文献
8.
日粮中添加植物提取物对肉仔鸡免疫机能的影响 总被引：2，自引：2，他引：0
选用250只健康AA肉雏随机分成5个处理组,分别饲喂基础日粮、基础日粮＋金霉素、基础日粮＋植物提取物（300 g/t）、基础日粮＋植物提取物（500 g/t）和基础日粮＋植物提取物（800 g/t）5种日粮,以研究不同浓度植物提取物对46日龄肉仔鸡脾脏指数、法氏囊指数、胸腺指数、T淋巴细胞百分比、淋巴细胞转化率、白细胞吞噬印度墨汁率等指标的影响。研究结果表明,提取物有提高肉仔鸡日增重、成活率及饲料报酬率的趋势,且不影响肉仔鸡的正常生长。日粮中添加不同浓度植物提取物能够增加免疫器官指数,具有促进巨噬细胞的吞噬功能,淋巴细胞（增殖）转化率显著增高,延长抗体水平持续时间,对肉鸡的体液免疫和细胞免疫均有明显促进作用。而在日粮中添加500 g/t的提取物比添加金霉素对仔鸡免疫力有更好的作用。 相似文献
9.
猪口蹄疫免疫防御是控制猪口蹄疫疫情的重要手段,免疫水平指标通常用免疫抗体水平判定。对于其细胞免疫水平检测尚缺乏成熟可靠的技术,本试验利用市售ELISpot试剂盒建立猪口蹄疫特异γ干扰素检测方法,刺激物分别采用疫苗全病毒颗粒（O/Mya98/XJ/2010）、口蹄疫病毒T细胞表位多肽池,以植物血凝素（PHA）为阳性对照,对细胞浓度、刺激物浓度、孵育时间等进行优化。优化条件为：外周血PBMC新鲜提取或冻存细胞成活率90%以上,最佳细胞数为2×105个/孔,最佳反应时间是16 h,病毒粒子146 S含量为100 ng/mL,多肽最佳浓度10 μg/mL,PHA的最佳浓度是20 μg/mL。ELISpot技术检测口蹄疫病毒感染猪γ干扰素方法的建立,为口蹄疫免疫力评价及口蹄疫疫苗免疫效果评估及进一步研究其与疫苗保护力（PD50）的相关性奠定基础。 相似文献
10.
水溶性苜蓿多糖对肉仔鸡T、B淋巴细胞体外增殖的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为探讨水溶性苜蓿多糖(WSAP)对体外培养的肉仔鸡淋巴细胞增殖的影响。本研究将不同浓度的WSAP分别加入到体外培养的用伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激的肉仔鸡外周血、胸腺、脾脏淋巴细胞中和用细菌脂多糖(LPS)刺激的肉仔鸡外周血、脾脏、法氏囊淋巴细胞中,培养48h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定淋巴细胞增殖的变化。结果显示:(1)在本试验中,当WSAP在一定浓度范围(4～20μg·mL-1)内时,T、B淋巴细胞的OD值比对照组高,且随着多糖浓度的增加,数值先增高(1～20μg·mL-1)后降低(100～200μg·mL-1);(2)同浓度WSAP对肉仔鸡外周血及不同的免疫器官的刺激强度不同,相同日龄时,肉仔鸡外周血和脾脏T、B淋巴细胞的OD值分别小于胸腺和法氏囊的OD值;(3)WSAP对相同日龄的肉仔鸡外周血及不同的免疫器官的最佳刺激浓度不同,对外周血的最佳刺激浓度为20μg·mL-1,脾脏为8μg·mL-1,法氏囊和胸腺为15μg·mL-1。本试验中WSAP对肉仔鸡体外淋巴细胞增殖的刺激浓度在8、15、20μg·mL-1时效果较好,这些结果表明一定浓度的WSAP可以促进肉仔鸡淋巴细胞的增殖,且存在一定的量效、时效关系和组织特异性。 相似文献
11.
YAN Bao-qi DONG Shu-wei WANG Dong-sheng NA Li-dong SANG Meng-qi YANG Hong-zao ZHANG Shi-dong YAN Zuo-ting 《中国畜牧兽医》2016,43(12):3239-3244
To explore the cytotoxicity of palmatine in vitro,goat endometrial epithelial cells (EECs) were stimulated by different concentrations of palmatine,then the growth curve of cell was drew by MTT assay which could detect the cell proliferation. The cell growth state was observed by inverted microscope,and Wright-Giemsa staining was used to observe morphological changes of the cells while LDH test was used to check the membrane permeability of EECs. The results showed that when the concentration was 10 to 227 μg/mL,palmatine had a role in promoting proliferation of the EECs,while when the concentration was more than 227 μg/mL,cell proliferation was inhibited,and 50% inhibitory rate of proliferation (IC50) of this drug on EECs was 360 μg/mL.Wright-Giemsa staining results showed that themorphology of the nucleus and cytolymph were not significantly changed when 100 and 200 μg/mL palmatine effected EECs. LDH results showed that when the palmatine concentration was more than 250 μg/mL,LDH content was extremely significantly higher than that of normal cell group(P<0.01).In conclusion,palmatine presented certain toxic effect on EECs with a significant dose-response effect,and the safe dose range of palmatine was less than 250 μg/mL. 相似文献
12.
In order to detect viable Enterobacter sakazakii in pasteurized milk，a new method was established by combination of propidium monoazide （PMA） and polymerase chain reaction （PCR）.PMA concentration and exposure time were optimized to find optimal conditions for distinguishing between dead and viable E.sakazakii. The results showed that to kill the viable E.sakazakii must be exposed to 100 ℃ for 20 min in water bath. The optimum light exposure time to intercalate the DNA of dead E.sakazakii and to photolyze the free PMA in solution was 15 min. The minimum concentration of PMA to completely inhibit the PCR amplication of dead bacterium was 5 μg/mL. The maximum concentration of PMA did not inhibit the PCR amplification of viable bacterium was 15 μg/mL. After PMA treatment，viable E.sakazakii in a mixture containing different proportions of dead and viable bacterium could be selectively detected by PCR，and the determination limit was 40 CFU/mL. In the pasteurized milk，the determination limit was 100 CFU/mL. This study laid a foundation for use of PMA-PCR to detect the E.sakazakii in the food. 相似文献
13.
为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2（IL-2）和免疫球蛋白G （IgG）抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E （28.55%）,低于维生素C （97.05%）;对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E （69.70%）,低于维生素C （98.69%）;对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C （98.98%）、略低于维生素E （32.57%）。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200 μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组（P<0.01）,50和100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异（P>0.05）;各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组（P<0.01）,其中,50 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）,100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。 相似文献
14.
（目的）对三七中的多糖进行分离、提取及三七多糖对小鼠免疫能力提升的最适用量研究。（方法）对三七的多糖成分进行粗提,脱蛋白,细提。然后用不同浓度不同成分的多糖提取物对小白鼠进行灌胃处理,连续15天,对小白鼠的免疫器官的重量,巨噬细胞的功能,T淋巴细胞的增殖情况进行检测,分析数据。（结果）在三七多糖PNPS-Ⅱb成分的220 mg/kg/d浓度下,小白鼠的胸腺指数,吞噬指数和T细胞的增殖效果最佳,因此此时的免疫效果最好。（结论）在三七多糖PNPS-Ⅱb成分的220 mg/kg/d浓度下,小白鼠有最好的免疫效果。 相似文献
15.
HPLC法测定复方替米考星颗粒中有效成份含量 总被引：1，自引：1，他引：0
采用HPLC法同时测定了复方替米考星颗粒中替米考星、磺胺二甲氧嘧啶及甲氧苄啶的含量。色谱柱为Eclipse XCB-C18(250 mm×4.6 mm,粒径5μm),流动相为磷酸二丁胺缓冲液-乙腈-四氢呋喃-水(25∶115∶55∶805),检测波长280 nm,流速1.0 mL/min。出峰顺序为甲氧苄啶、磺胺二甲氧嘧啶、替米考星反式结构、替米考星顺式结构,理论塔板数分别为7963、15714、3282、8701。两峰之间的分离度分别为24.29、3.92、2.91;拖尾因子分别为0.92、0.90、0.97、0.94。替米考星、磺胺二甲氧嘧啶、甲氧苄啶的浓度线性范围分别是6.25～125μg/mL(R2=0.996),3.125～62.5μg/mL(R2=0.996),0.625～12.5μg/mL(R2=0.999);平均回收率分别为99.17%、99.06%和99.39%;RSD分别为0.8%、0.9%和0.9%。该法快速、灵敏、准确,适用于同时测定复方替米考星颗粒中三种成份的含量。 相似文献
16.
为研究紫玉米花色苷(purple corn anthocynins,PCA)的抗病毒效果,本试验先通过观察细胞病变效应测定了PCA对牛肾细胞传代系MDBK细胞的毒性作用,以此确定PCA的安全浓度范围;然后以3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测了安全浓度范围内的PCA对牛传染性鼻气管炎病毒在MDBK细胞中复制的影响。PCA毒性试验结果显示,PCA对MDBK细胞的最大安全浓度为262.14 μg/mL;而最小浓度为7.8125 μg/mL的PCA就能对牛传染性鼻气管炎病毒在MDBK细胞中的复制有明显抑制作用。MTT试验结果显示,PCA对MDBK细胞的半数抑制浓度（TC50）为262.14 μg/mL,对病毒的半数抑制浓度（IC50）为11.38 μg/mL,以此计算出治疗指数（TI）为23.04。由此证明PCA具有良好的抗牛传染性鼻气管炎病毒的作用,提示紫玉米可作为防制奶牛传染性鼻气管炎的饲料原料。 相似文献
17.
CHEN Xiao-lan YANG Hai-feng QU Jing-wen LI Ran JIANG Chun-mao LU Guang-fu BO Ruo-nan 《中国畜牧兽医》2017,44(12):3598-3604
This experiment was aimed to compare the effects of different mulberry leaf extract on spleen lymphocyte proliferation in mice. Mulberry leaf polysaccharides (MLP-1, MLP-2, MLP-3, MLP-4 and MLP-5) were prepared with mulberry leaf aqueous extract (MLAE) by different concentration of alcohol deposit, polysaccharides concentration of all extracts were determined by phenol sulfuric acid method. Five different MLPs and MLAE were as the experimental drug, when polysaccharide concentration was 15.625, 31.25, 62.5, 125 and 250 μg/mL, the changes of spleen B and T lymphocytes proliferation in mice which were stimulated by MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation of drugs with LPS and PHA were determined by MTT method. The results showed that when polysaccharide concentration was in the range of 15.625 to 250 μg/mL, MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation with LPS and PHA could stimulate the spleen B and T lymphocytes proliferation, MLP-1 at low concentration could stimulate significantly spleen B lymphocyte proliferation remarkably (P<0.05), and MLP-3 and MLP-5 at low concentrations showed strong stimulation ability of T lymphocyte proliferation. When MLAE was in synergistical stimulation with LPS at most concentrations points, the spleen B lymphocytes proliferation in mice were significantly higher than those of the cell control and LPS control groups, which revealed that MLAE could significantly improve the humoral immune function (P<0.05). 相似文献
18.
试验旨在比较不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用的影响。用不同浓度乙醇醇沉桑叶水提物,制备桑叶粗多糖MLP-1、MLP-2、MLP-3、MLP-4、MLP-5,采用苯酚硫酸法测定各提取物多糖含量。以5种桑叶粗多糖和桑叶水提物（MLAE）为试验药物,采用MTT法比较多糖含量分别在15.625、31.25、62.5、125、250 μg/mL浓度时各提取物单独刺激及协同LPS、PHA共同刺激小鼠脾脏B、T淋巴细增殖的变化。结果显示,多糖浓度在15.625~250 μg/mL范围内,各提取物无论单独还是协同LPS和PHA时均能促进小鼠脾脏B、T淋巴细胞的增殖,其中,MLP-1多糖含量在低浓度时能显著刺激脾脏B淋巴细胞增殖（P<0.05）;MLP-3和MLP-5在低浓度时表现出较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;MLAE协同LPS在大部分浓度点的脾脏B淋巴细胞的增殖能力均显著高于细胞对照组和LPS对照组,可显著提升体液免疫功能（P<0.05）。 相似文献