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相似文献
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1.
ELISA在猪伪狂犬病诊断中的应用   总被引:7,自引:2,他引:5  
近年来 ,猪伪狂犬病不断传播蔓延 ,给世界养猪业带来了巨大危害 ,因此开发特异性强、敏感性高、简便、快速、能区别疫苗毒和野毒、能检出潜伏感染的诊断方法是防制该病的关键之一。EL ISA方法具有特异、敏感、快速、稳定等特点 ,为广大兽医工作者所关注。目前 ,国内外关于 EL ISA在猪伪狂犬病诊断中的应用方面的研究已有不少 ,已有试剂盒出售。笔者综述了应用于猪伪狂犬病诊断的多种 EL ISA方法 ,如直接 EL ISA、间接 EL ISA、竞争 EL ISA、斑点EL ISA、SPA-EL ISA、双抗体夹心 EL ISA、单抗夹心 L AB-EL ISA、血清学鉴别 EL ISA等。这些方法中 ,有测病毒的 ,有测抗体的 ;有单抗介导的 ,有多抗介导的 ;有的还引入了 SPA和 L AB;有的以分子生物学为基础并能够鉴别疫苗毒和野毒。此外 ,还总结了目前所用 EL ISA诊断方法的优点和缺点 ,并预测了其发展前景  相似文献   

2.
猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的一种猪的高度接触性的肠道传染病,该病以排水样稀粪、呕吐、脱水及哺乳仔猪高死亡率为主要特征,给生猪养殖业带来严重危害。猪流行性腹泻于20世纪80年代在我国暴发并流行至今,该病不仅发生范围广、强度大、致死率高,且常与猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒及德尔塔冠状病毒等传染病混合感染,临床诊断并不能对该病确诊,必须运用一些实验室方法才能准确诊断该病。通过对猪流行性腹泻的酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光法(IF),RT-PCR诊断技术、多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、环介导等温扩增检测技术(LAMP)等几种实验室检测技术进行综述,以期对该病的诊断及确诊提供可靠的实验方法和一定的技术依据。  相似文献   

3.
猪流行性腹泻的实验室诊断方法   总被引:3,自引:1,他引:2  
猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种以呕吐、腹泻和食欲下降为基本特征的高度接触性肠道传染病.其流行病学和临床症状与猪传染性胃肠炎很类似,无法通过临床症状、流行病学和病理变化进行确诊,必须借助于实验室检查方法才能确诊.本文对目前常用的猪流行性腹泻病毒的实验室检查方法、病毒的分离鉴定、微量血清中和试验、免疫电镜、免疫荧光、ELISA、RT-PCR进行了阐述,旨在为该病的诊断及防控提供理论依据.  相似文献   

4.
猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻疫苗研究进展   总被引:3,自引:0,他引:3  
猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻均是由冠状病毒引起,患病仔猪以呕吐、腹泻、脱水为特征。目前,对这两种病的预防和控制以接种疫苗为主。本文就各种疫苗近年来的研究进展进行了综述,并指出了研究中存在的问题以及未来展望,希望能为这两种传染病疫苗的进一步研究提供新的思路。  相似文献   

5.
为分析和探讨猪腹泻性传染病的鉴别诊断与防治方法,笔者在2017年9月-2019年9月,随机选择50头猪作为研究对象,统计饲养过程中猪腹泻性传染病的发病率,并且做出相应的防治对策。结果显示,3头猪发生了细菌性腹泻,2头猪发生了病毒性腹泻,猪腹泻性传染病的发病率为10.00%。结果表明,猪腹泻性传染病的鉴别诊断十分重要,只有做出正确的鉴别诊断,才能采取合适的防治措施。  相似文献   

6.
为了研究出一种快速、敏感、特异的诊断猪传染性胃肠炎和猪流行腹泻的方法,试验参照国内外已发表的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)基因序列及其相关的RT-PCR检测方法,根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白基因和猪流行性腹泻病毒s蛋白基因各设计1套特异性通用引物,扩增目的带分别为426 bp和584 bp.结果表明:建立的猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二联RT-PCR检测方法具有快速、敏感、特异等优点,可为猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒的检测、流行病学调查及疫苗使用等奠定基础.  相似文献   

7.
猪Delta冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均是能引起仔猪腹泻的冠状病毒,通过临床症状和剖检很难鉴别诊断,建立同时检测且能够鉴别诊断这3种疾病的快速检测方法对于临床诊断具有重要的意义。参照GenBank中登录的PDCoV,NPEDV M和TGEV N基因的基因序列,利用Primer5.0设计合成3对能扩增特异性目的片段的引物,构建重组质粒,并对RT-PCR反应条件进行优化,建立了检测PDCoV,PEDV和TGEV的多重RT-PCR诊断方法,并对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性分析。利用该方法对河南176份临床样品进行检测,并与普通RT-PCR检测方法对该检测方法进行比较分析。结果表明,所建立的三重RT-PCR方法对PDCoV的最低检测量是3.14×103拷贝/μL;PEDV的最低检测量是3.88×104拷贝/μL和TGEV的最低检测量是3.68×104拷贝/μL。所建立的方法具有较好的特异性,对猪博卡病毒(PboV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟(CSFV)和猪圆环病毒(PCV)等猪常见病毒的扩增结果均为阴性。应用所建立的三重RT-PCR方法对176份临床收集的仔猪腹泻样品进行PEDV,PDCoV和TGEV检测,并将检测结果和单重RT-PCR检测方法比较,结果显示,多重RT-PCR检测结果与常规单一RT-PCR的结果符合率均为100%。综上,本试验建立了能同时检测PDCoV,PEDV和TGEV的三重RT-PCR方法,为临床上这3种疫病的快速检测和流行病学调查奠定了基础。  相似文献   

8.
为建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)病原的方法,根据GenBenk上的猪流行性腹泻病毒N基因序列,设计合成一对引物,建立了检测PEDV的一步法RT-PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行了研究。结果表明:建立的一步法RT-PCR方法具有较好的特异性、灵敏性及重复性,最低可检测出约1pg PEDV的RNA。该方法为PEDV的病原检测及其分子流行病学调查提供了有效的诊断方法,可用于猪流行性腹泻的早期确诊和病毒鉴定。  相似文献   

9.
猪流行性腹泻又称流行性病毒性腹泻,是由猪流行性腹泻病毒引起猪的一种高度接触性急性肠道传染病。介绍了该病的病原、流行特点、临床症状、病理变化、诊断、发病机理、防控措施。  相似文献   

10.
猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征,给养猪业带来严重的经济损失。及时准确地诊断PEDV感染对于预防和控制PED至关重要,目前已经开发了许多用于PEDV、病毒蛋白及核酸的检测方法,包括病毒分离、酶联免疫吸附试验、直接免疫荧光检测、免疫组织化学技术、免疫层析技术等免疫学方法;RT-PCR、实时定量RT-PCR、核酸等温扩增技术、CRISPR-Cas系统检测技术等分子生物学方法。本文针对PEDV的抗原检测技术和方法进行综述,以期为PEDV的临床监测和PED的防控提供参考。  相似文献   

11.
12.
猪流行性腹泻的临床症状主要是腹泻、呕吐,哺乳仔猪患病后死亡率高,对猪群的健康构成了严重的威胁。该病诊断时与传染性胃肠炎较难分辨,实验室诊断技术的准确性和及时性,对于准确、快速地诊断该病发挥了非常重要的作用。目前用于该病的诊断方法主要有病原检测技术、血清中和试验、ELISA(酶联免疫吸附试验)法、荧光定量PCR技术、反转录酶链式反应(RT-PCR)检测法、多重PCR技术、胶体金免疫技术等。  相似文献   

13.
某大型猪场临床仔猪见不明原因腹泻,发病率高,而对妊娠母猪普遍接种TGE和PED疫苗后收到了明显的防病效果。  相似文献   

14.
猪流行性腹泻病毒检测方法研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍了猪流行性腹泻病毒实验室检测方法的研究进展,在细胞生物学方面,主依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等检测方法;在分子生物学方面,主依靠核酸杂交技术、RT—PCR法和实时荧光定量RT—PCR法等检测方法。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者提供参考。  相似文献   

15.
猪传染性胃肠炎诊断技术研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
猪传染性胃肠炎是一种由冠状病毒引起的以仔猪呕吐、腹泻和脱水为特征的传染病,对养猪业造成了巨大的损失。为此,众多学者对该病的诊断与检测方法进行了大量的研究,建立了,临床诊断、病原分离等传统诊断方法,以及大量的免疫学、分子生物学诊断方法等。研究猪传染性胃肠炎的诊断与检测方法对防控该病的暴发和传播有重要意义。  相似文献   

16.
Porcine epidemic diarrhea (PED) is one of the important diseases that endanger the healthy development of the pig industry.It has acute and highly infectious characteristics,causing severe economic losses to the pig industry.Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) infection could destroy the animal's digestive system,cause the appetite of sick pigs to decline,vomit,and severe diarrhea.And the piglets cured by drugs will also have a serious impact on production due to factors such as poor growth and development,which will bring huge problems to the farmers.The outbreak of PEDV highly pathogenic mutant strains in China in 2010 led to a significant increase in the incidence and mortality of PED,which severely affected pig production in China.The outbreak of PED has drawn close attention from the pig industry.Scholars in related research fields have conducted more in-depth research on the pathogenic mechanism of PEDV and the new PED vaccine.Five new types of PED vaccines,including subunit vaccine,virus live vector vaccine,bacterial live vector vaccine,transgenic plant vaccine and nucleic acid vaccine,have been developed successively,and new breakthroughs and progress have been made.Compared with the traditional PED inactivated vaccine and PED attenuated vaccine,the new PED genetically engineered vaccine has the advantages of good safety,simple preparation,and good immune effect.This article focuses on the pathogenesis of PEDV and the research progress of five new PED vaccines,so as to deepen our understanding of new PEDV and PED vaccines,in order to provide references for prevention and control measures of PEDV infection.  相似文献   

17.
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是危害养猪业健康发展的重要疾病之一,具有急性、高度传染性的特征,给养猪业造成了严重的经济损失。猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染会破坏动物机体的消化系统,造成患病猪食欲下降、呕吐以及严重腹泻等,且药物治愈后的仔猪也会因为生长发育不良等因素严重影响生产,给养殖户带来巨大的困扰。2010年PEDV高致病变异毒株在中国暴发流行,导致PED的发病率和死亡率大幅升高,严重影响中国养猪生产。此次PED的暴发流行引起了养猪行业的密切关注,相关研究领域的学者对PEDV致病机制和PED新型疫苗进行了更加深入的研究,亚单位疫苗、病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、转基因植物疫苗和核酸疫苗5种PED新型疫苗相继被开发,并取得全新的突破和进展。与传统的PED灭活苗和PED弱毒疫苗相比,PED新型基因工程疫苗具有安全性好、制备简单、免疫效果好等优点。文章着重对PEDV发病机理和5种PED新型疫苗的研究进展展开综述,从而加深对PEDV和PED新型疫苗的了解,以期为PEDV感染的预防和控制措施提供参考。  相似文献   

18.
The infectious haematopoietic necrosis (IHN) is beside the viral haemorrhagic septicemia (VHS) one of the viral fish diseases that have a considerable economic impact on German aquaculture. The measures actually in force are focused on control and spread prevention of the disease within the borders of the European Union (EU). The detection and confirmation of an outbreak is performed according to the pertinent EU legislation which allow the application of methods like the virus neutralisation test (VNT), the immunofluorescence test (IFT) and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Besides the classic virological serology methods, further tests for the identification and confirmation of the fish pathogen like i.e. PCR and DNA probe techniques are recommended by the OIE. To compare diagnostic methods as ELISA, cell cultivation and RT-PCR, rainbow trout of the strain "Isle of Man" were infected with six IHNV strains. Samples were taken on day 7 (viraemia period) and at the day 28 of the trial. The ground organs were inoculated into EPC cells (Epithelioma papulosum Cyprini cells) and examined by ELISA as well as after RNA extraction by RT-PCR. Besides the determination of the isolate as well as the virulence for 20 g trout, significant differences in the demonstration of the viruses were observed. While the RT-PCR demonstrated to be the most sensitive method, antigen ELISA and virus cultivation results showed in dependence of the IHNV isolate that not all viruses were identifiable under the chosen experimental condition in the same manner.  相似文献   

19.
为了建立猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)抗体检测的间接ELISA方法,本研究以纯化的原核表达的PEDV截短N蛋白作为包被抗原,建立了PEDV抗体检测的间接ELISA方法,将该方法命名为rnPED-ELISA。该抗原不与其他常见的7种猪病的阳性血清发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于13%;rnPED-ELISA相对于血清中和试验(SN)试验的敏感性为93.33%,特异性为90.00%;rnPED-ELISA与TSZ全病毒抗体检测试剂盒的符合率达91.67%。采用rnPED-ELISA方法检测200份临床样品,PEDV抗体阳性检出率为69.5%。本试验建立的rnPED-ELISA方法具有良好的敏感性和特异性,可为免疫猪群抗体监测和猪流行性腹泻流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法。  相似文献   

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