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【目的】建立梨悬浮细胞体系，并利用悬浮细胞体系获得高质量悬浮细胞，进行遗传转化和原生质体的分离。【方法】以新梨7号花药为试材，诱导获得梨花药愈伤组织，研究了细胞悬浮系建立和影响悬浮细胞增殖的主要因子。【结果】花药在1/2 MS+1.0 mg·L-12,4-D+0.4 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂(pH值为5.8～6.0)培养基上诱导的愈伤组织，经4～5次继代得到了黄白色、颗粒状，状态相对较好的愈伤组织；将愈伤组织接种于液体培养基中，于28℃，200 r·min-1的黑暗条件下悬浮振荡培养，经4～5次悬浮继代培养建立了悬浮细胞系，适宜的启动和增殖培养基为：MS+1.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+30 g·L-1蔗糖，细胞生长曲线呈“S”型，活细胞率达81.98%，近圆细胞率达83.66%，可作为遗传转化的受体，转化率为20.00%。也可直接用于原生质体的分... 相似文献
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多花蔷薇胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株 总被引：1，自引：0，他引：1
利用多花蔷薇‘无刺3号’假珠芽诱导的胚性愈伤细胞悬浮系分离得到原生质体,并培养获得再生植株。酶种类和浓度, 酶解时间及悬浮细胞继代时间对原生质体分离有重要影响,最佳酶液组成是2.0%纤维素酶,0.5%离析酶,5.0 mmol·L-1 MES, 0.5 mol·L-1甘露醇,0.5% CaCl2·2H2O。采用继代3 d的悬浮细胞系,酶解10 h,原生质体产量达到26.67×106g-1,原生质体活力为92.21%。采用液体浅层培养,肌醇比蔗糖更有利于纯化后的原生质体分裂和生长。愈伤组织形成增殖培养基为1/2MS + 2,4-D 1.0 mg·L-1+ EBR 0.2 mg·L-1 + 10 g·L-1 Ficoll + 500 mg·L-1谷氨酰胺 + 20 mg·L-1甘氨酸 + 20 mg·L-1天冬氨酸,分化培养基为1/2MS + 10 mg·L-1 TDZ + 500 mg·L-1谷氨酰胺+ 20 mg·L-1甘氨酸+ 20 mg·L-1天冬氨酸,后转入1/2MS培养基上获得完整植株。 相似文献
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果肉愈伤组织的大量培养可为悬浮细胞体系的建立、原生质体的分离与培养、遗传转化体系的建立及次生代谢产物的研究提供物质基础。以5个发育阶段的枣果肉为试材,共计77个枣品种,选用10种培养基进行枣果肉愈伤组织诱导研究。结果表明,基因型、果实发育阶段、培养基种类及其植物生长调节剂配比对枣果肉愈伤组织诱导效果均具有显著影响。在启动培养阶段,有42个品种分别筛选出1～6种可诱导出愈伤组织的培养基;有8种培养基可以成功诱导出愈伤组织,其中G1(4.41 g·L-1 MS+6 g·L-1琼脂+20 g·L-1蔗糖+0.5 mg·L-1 6-BA+2.5 mg·L-1 2,4-D)和G7(4.41 g·L-1 MS+6 g·L-1琼脂+20 g·L-1蔗糖+0.8 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 2,4-D)培养基的适用性最高,达60%,其次为G5(4.41 g·L 相似文献
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野生茄子原生质体制备及电融合条件研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以野生茄子蒜芥茄（Solanum sisymbriifolium）和水茄（S. torvum）叶片为原生质体融合材料，对原生质体制备中酶解液浓度、酶解时间和电融合参数进行研究。结果显示：在0.3%（m/V）纤维素酶+0.1%（m/V）离析酶浓度条件下镜检观测到的单细胞数量最多；蒜芥茄酶解最适时间为14 h，原生质体产量达最大值15.06×106个 · g-1，水茄酶解最适时间为13 h，原生质体产量达最大值15.92×106个 · g-1；最适电融合参数为交流电场强度80 V · cm-1，作用时间10 s，直流脉冲强度1 250 V ·cm-1，作用时间 45 μs，次数1 次时，显微镜观测到融合效果最佳。 相似文献
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以六妹羊肚菌(Morchella sextelata)GZCC0287菌株为试材,采用单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、响应面法,研究了碳源、氮源、无机盐、CMC-Na对六妹羊肚菌丝生物量及菌丝球浓度的影响,以期为羊肚菌液体菌种生产、栽培种、工业化生产提供参考依据。结果表明:红糖、酵母粉、KH2PO4、MgCl2·6H2O为最佳碳源、氮源和无机盐,最佳培养基配方为红糖50.49g·L-1、酵母粉10g·L-1、KH2PO41g·L-1、MgCl2·6H2O 2.37g·L-1、CMC-Na 10.11g·L-1,菌丝生物量达到(5.21±0.45)g,菌丝球浓度达到(2567±127)个·mL-1,以1000个·mL-1浓度接种栽培种,发菌快,长势好,满袋时间10~15d。 相似文献
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以"魁冠宏丰"番茄为试材,采用珍珠岩/蛭石(V/V 2∶1)栽培方式,在总氮水平15 mmol·L-1下,设置铵态氮+硝态氮0 mmol·L-1+15 mmol·L-1(A0N15,对照)、5 mmol·L-1+10 mmol·L-1(A5N10)、7.5 mmol·L-1+7.5 mmol·L-1(A7.5N7.5)、10 mmol·L-1+5 mmol·L-1(A10N5)、15 mmol·L-1+0 mmol·L-1(A15N0)处理,研究了同一氮水平下,不同铵态氮和硝态氮配比对番茄幼苗生长和铵同化的影响,以期为提高番茄铵同化能力提供参考依据。结果表明:植株的总干质量在A5N10、A7.5N7.5处理较对照增加了27%、20%,A10N5处理与对照差异不显著,A15N0处理则降低了22%;分析发现根系和叶片中总游离氨基酸的含量随着铵态氮配比的增加而增加,增加了40%以上。参与氮代谢的谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)、谷氨酸脱氢酶(GDH)活性在根系中均显著高于对照;同时谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)含量随着铵态氮配比的增加不断增加,但A10N5、A15N0处理Glu含量显著下降,同时可溶性糖、淀粉、叶绿素含量下降。营养液中铵态氮浓度达到10 mmol·L-1及以上水平时,植株生长受到抑制,一方面是叶片叶绿素减少导致碳同化受阻,影响根系的氮同化,另一方面是Glu含量减少导致氮同化受抑制,从而植物生长受到抑制,生物量降低。 相似文献
7.
以"四季小白菜""京新1号""鲁抗快菜"小白菜种子为试材,采用水培法,研究了NaCl和Na_2SeO_3处理对小白菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、相对盐害率、耐盐指数、苗长以及丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响,以探讨不同品种小白菜耐盐性差异并揭示硒元素缓解小白菜盐胁迫的作用效果。结果表明:150mmol·L-1和200mmol·L-1 NaCl处理中"四季小白菜"种子的相对盐害率为3.33%和30.00%,"京新1号"种子的相对盐害率为-8.22%和27.4%,"鲁抗快菜"种子的相对盐害率为25.34%和56.36%,表明"鲁抗快菜"耐盐性最弱。同时,150mmol·L-1 NaCl处理和1mg·L-1 Na_2SeO_3+150mmol·L-1 NaCl处理中小白菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和株高均显著低于对照,但1 mg·L-1Na_2SeO_3+150mmol·L-1 NaCl处理中小白菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和株高较150 mmol·L-1 NaCl处理分别提高17.37%、5.52%、5.36%、159.87%和143.91%,相对盐害率降低为8.28%,耐盐指数增加到77.07%。此外,与150mmol·L-1NaCl处理相比,1mg·L-1 Na_2SeO_3+150mmol·L-1 NaCl处理中小白菜幼苗MDA含量显著降低,POD活性和CAT活性均显著升高,故1mg·L-1 Na_2SeO_3能够缓解盐胁迫对小白菜幼苗的毒害。 相似文献
8.
为探究外源褪黑素(Melatonine,MT)诱导梨果实抗采后黑斑病的作用,以‘翠冠’梨为材料,测定MT对梨黑斑病菌(Alternaria alternata)的抑菌作用和诱导果实抗黑斑病的效应。结果表明,0.025～0.300 mmol·L-1 MT处理对A. alternata菌丝生长和孢子萌发均无明显抑制作用,但MT处理梨果实可显著降低黑斑病发生,其中0.100 mmol·L-1 MT诱导梨抗黑斑病的效应最高可达45.04%。与对照相比,0.100 mmol·L-1 MT处理显著提高了梨果实过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和多酚氧化酶(PPO)活性和总酚含量,有效降低丙二醛(MDA)积累,暗示MT处理诱导梨果实对黑斑病的抗性可能与其调控活性氧代谢有关。 相似文献
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【目的】以玉露香梨为试验材料，研究不同浓度(0、0.1、0.5、1.0 mmol·L-1)褪黑素(melatonin,MT)处理对梨果实常温贮藏品质和生理特性的影响。【方法】将已达商业成熟的玉露香梨果实进行0.1、0.5、1.0 mmol·L-1不同浓度MT浸泡处理，以蒸馏水浸泡作为对照。分别于(20±1)℃贮藏21 d，每隔7 d货架测定果实质量、果皮颜色(L*、h°)、果实硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量和维生素C含量等果实外观和内在品质指标，统计总腐烂果数，采用气相色谱法检测果实呼吸强度和乙烯释放速率，同时采用果皮冻样测定丙二醛(MDA)含量及过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性等果实生理指标。【结果】与对照相比，不同浓度MT处理均能降低果实失重率和腐烂率，但与对照差异不显著。1.0 mmol·L-1MT有效抑制货架前期0～7 d果实维生素C含量和硬度的下降，0.5 mmol·L-1MT在货架第14天作用效果显著，而0.1mmol·... 相似文献
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以“无刺2号”当年生营养枝为外植体，采用不同浓度的植物生长调节剂进行组培试验，研究了不同消毒方式、激素浓度对外植体消毒效果、初代培养、增殖培养及生根培养的影响，以期建立较为成熟的无刺刺梨组织培养体系。结果表明：外植体经清水冲洗后用75%的酒精消毒15 s,以0.1%的升汞消毒8 min,存活率为85.28%;受污染后的植株在超声洗涤液中洗涤，洗涤液中添加多菌灵60 mg·L-1和青霉素40 mg·L-1,同时配置培养基时添加多菌灵60 mg·L-1和青霉素40 mg·L-1是最佳处理；适合“无刺2号”初代培养的培养基为MS+1 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,萌芽率达92.04%;增殖培养基为MS+0.2 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,增殖系数为3.9;在1/2MS+0.1 mg·L-1 IBA+20 g·L-1蔗糖+0.5... 相似文献
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以东方百合‘西伯利亚’无菌鳞茎超薄切片(0.5～1.0 mm)为试材，通过PIC和2,4-D不同浓度筛选愈伤诱导培养条件，采用超薄鳞片直接分化及愈伤分化2种转化方式，测试对Cef、Kan及Hgy的耐受性，分析不同干燥预处理以及MES、AS对转化效果的影响，并通过EPSP基因的导入，验证基因转化阳性率及转化效果，以期优化百合遗传转化的技术参数，建立高效遗传转化体系并进行EPSP基因的导入。结果表明：PIC对百合愈伤诱导有良好效果，MS+1 mg·L-1 PIC+0.3 mg·L-1 NAA为最佳愈伤诱导培养基；抗生素敏感性测试发现，培养基添加75 mg·L-1 Kan或20 mg·L-1 Hyg结合250 mg·L-1 Cef适宜抗性筛选；超薄鳞片及愈伤在60 min和30 min的干燥预培养下，阳性率均显著提高；MS+10 mmol·L-1 MES+200μmol·L-1 AS为重悬液处理，超薄鳞片获得48.3%的高效转化率，优于愈伤... 相似文献
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报春石斛组培快繁技术体系的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+蔗糖20g·L-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+香蕉泥100g·L-1+蔗糖20g·L-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+KT 0.5mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1+香蕉泥100g·L-1+蔗糖30g·L-1+活性碳1.0g·L-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。 相似文献
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NaCl胁迫对黑果枸杞幼苗生理及生化指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
以黑果枸杞幼苗为试验材料,将幼苗在0、50、100、200 mmol·L-1 NaCl条件下处理10 d后,分析了主根伸长量、叶片花青素、游离脯氨酸、丙二醛、可溶性蛋白质含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性及其同工酶等生理生化指标的变化,探究其适应盐生环境可能的机制,以期为合理开发利用黑果枸杞提供参考依据。结果表明:经0、50、100、200 mmol·L-1NaCl处理后,黑果枸杞幼苗主根生长未受抑制,0～100 mmol·L-1 NaCl处理时,叶片花青素含量变化不显著,200 mmol·L-1 NaCl处理后,花青素含量显著升高;0～100 mmol·L-1 NaCl处理时,幼苗中游离脯氨酸及丙二醛含量变化不显著,200 mmol·L-1 NaCl处理后以上物质均显著升高;经0～200 mmol·L-1 NaCl处理,黑果枸杞幼苗中SOD活性及其同工酶酶谱表达稳定,变化不显著;POD活性先升后降,100 mmol·L-1 NaCl胁迫时活性最强,为1 065.9 U·g-1·min-1,且同工酶POD 1、POD 2与黑果枸杞幼苗响应盐胁迫紧密相关。 相似文献
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以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L-1+NAA 0.20 mg·L-1+土豆80.00 g·L-1+蔗糖30.00 g·L-1+卡拉粉7.00 g·L-1+AC 0.30 g·L-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L-1+NAA 0.20 mg·L-1+蔗糖20.00 g·L-1+卡拉粉7.00 g·L-1+AC 0.02 g·L-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L-1+NAA 0.50 mg·L-1+蔗糖20.00 g·L-1+卡拉粉7.00 g·L-1+AC 0.50 g·L-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。 相似文献
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以藤本月季“大游行”为试材,采用土壤喷施0、200 mmol·L-1盐溶液的处理方法,探究不同浓度外源Ca2+(0、5、10、20 mmol·L-1)对藤本月季光合以及氮代谢相关酶活性的影响,以期为外源Ca2+缓解盐胁迫对藤本月季的伤害提供参考依据。结果表明：一定浓度外源Ca2+能够增加藤本月季株高生长量、叶面积和地上生物量,促进光合作用,提高叶片中光合色素含量以及氮代谢相关酶活性来增强植物抗性。在200 mmol·L-1盐处理下,与0 mmol·L-1Ca2+处理浓度相比,添加10 mmol·L-1Ca2+浓度处理下藤本月季的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素(a+b)以及叶黄素含量分别增加了143.9%、152.5%、151.9%和90.6%;光合参数中水分利用效率(WUE)、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)和气孔导度(G... 相似文献
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以1株鸡腿菇菌株Cc-900为试材,采用平板培养和液体发酵培养的方法,研究不同浓度的外源硒对鸡腿菇菌株Cc-900的生长、富硒效果和菌丝合成蛋白质和多糖的影响,以期为富硒鸡腿菇的栽培和产品的开发提供参考依据。结果表明：鸡腿菇菌丝可耐受10 mg·kg-1硒浓度的固体培养基和最大硒浓度为3 mg·L-1的液体培养基,高浓度硒对菌丝活性损伤较大;当液体培养基中硒浓度为3 mg·L-1时,菌丝干质量可达1.97 g·L-1,菌丝干粉的硒含量为38.24 mg·kg-1,其硒富集系数可达12.75,菌丝中粗蛋白和多糖含量分别为2.58%和3 081.82μg·g-1,发酵液中可溶性蛋白质和多糖含量分别为50.98μg·mL-1和266.38μg·mL-1。液体发酵培养中硒浓度在3 mg·L-1以下可促进鸡腿菇菌丝的生长和硒的富集,同时促进菌丝中蛋白质的合成和释放,但会抑制菌丝中多糖的合成。 相似文献
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为缓解高温胁迫对设施黄瓜幼苗的伤害，以津春4号为试材，将腐胺(Put)、褪黑素(MT)、脯氨酸(Pro)和黄腐酸钾(MFA)以不同的浓度进行复配，研究不同浓度组合对黄瓜幼苗高温抗性、光合作用和抗氧化酶活性等的影响，筛选出缓解高温胁迫伤害最优的配方。结果表明：8 mmol·L-1 Put配合施用0.3 g·L-1 MFA、1.5 mmol·L-1 Pro及50μmol·L-1 MT能够有效缓解高温胁迫对黄瓜幼苗的伤害，采用隶属函数法综合评价效果最佳，与对照相比净光合速率增加了160.71%,H2O2含量降低了40.64%，可溶性蛋白含量增加了126.92%,SOD、POD、CAT活性分别提高了29.32%、31.66%、52.16%。 相似文献
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以西藏猫乳茎枝为试材，采用超声波-酶协同法提取其中的总黄酮，通过单因素试验与响应面设计法对提取工艺进行优化，得到最佳工艺参数。在该基础上，将超声波-酶协同法与超声波法、酶解法进行比较，考察其抗氧化活性，以期为西藏猫乳的进一步开发利用提供参考依据。结果表明：超声波-酶协同提取西藏猫乳总黄酮最优条件为纤维素酶浓度0.31 mg·mL-1、乙醇浓度53%、酶解pH 5.0、酶解时间2 h、酶解温度50℃、超声温度50℃、液料比40∶1 mL·g-1、超声时间30 min,在该条件下，总黄酮提取量为17.01 mg·g-1,提取工艺稳定可靠。与超声波法和酶解法比较，超声波-酶协同提取总黄酮含量较高，且具有更好的DPPH·和ABTS+·清除能力。 相似文献
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以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L-1+IBA 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V炉渣∶V原土∶V腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。 相似文献
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以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 IBA+40 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂,平均生根数量为14.33,是其他... 相似文献