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1.
植物病原细菌通过不同的分泌途径将毒素及酶类分泌到胞外,每种途径均具有自身的特点及局限性,主要有4种类型的分泌系统。本文着重介绍Ⅱ型分泌系统与植物病原细菌致病性的关系。 相似文献
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细菌Ⅵ型分泌系统（type Ⅵ secretion system,T6SS）是近年发现的一种分布广泛且与细菌致病性密切相关的新型分泌系统,ClpⅤ型ATPase是不同细菌T6SS中均含有的关键保守组分,据推测可能为底物蛋白的分泌提供动力,但对其生化功能尚未进行深入鉴定。在本研究中,我们克隆了根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）C58中的ClpⅤ型ATPase基因atu4344并在大肠杆菌中表达,酶学检测证实了其ATPase活性,定点突变分析发现K232/608和E299/675突变体均丧失ATPase活性,表明Walker A模体和Walker B模体与其活性密切相关。这是首次对植物病原细菌T6SS中的ClpⅤ型ATPase进行生化鉴定和突变分析研究。 相似文献
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许多革兰氏阴性植物病原细菌通过型分泌系统(T3SS),将效应物蛋白分泌并转运进入植物体内,从而引起植物发病或过敏反应。效应物是病原细菌和植物分子互作的关键物质。全基因组筛选鉴定型效应物蛋白并研究其功能,对于解明病原菌的致病机理、寄主范围和进化具有重要意义。利用avrBs1作为报告基因,将其过敏反应诱导结构域(AvrBs159-444)克隆到不含启动子的穿梭质粒pLAFR6上,构建一个用于型效应物转运体外鉴定的报告质粒pLJB,并以已经鉴定为效应物基因的XC-1553的启动子验证该报告质粒,证明pLJB工作正常。该报告质粒为进一步进行全基因组筛选鉴定野油菜黄单胞菌型效应物提供材料。 相似文献
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许多革兰氏阴性植物病原细菌通过Ⅲ型分泌系统(T3SS),将效应物蛋白分泌并转运进入植物体内,从而引起植物发病或过敏反应.效应物是病原细菌和植物分子互作的关键物质.全基因组筛选鉴定Ⅲ型效应物蛋白并研究其功能,对于解明病原菌的致病机理、寄主范围和进化具有重要意义.利用avrBs1作为报告基因,将其过敏反应诱导结构域(AvrBs159-444)克隆到不含启动子的穿梭质粒pLAFR6上,构建一个用于Ⅲ型效应物转运体外鉴定的报告质粒pLJB,并以已经鉴定为效应物基因的XC-1553的启动子验证该报告质粒,证明pLJB工作正常.该报告质粒为进一步进行全基因组筛选鉴定野油菜黄单胞菌Ⅲ型效应物提供材料. 相似文献
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过敏性反应与致病性基因(hrp)所编码的Ⅲ型分泌系统(T3SS)是植物病原细菌的决定性致病因子。在黄单胞菌属中,HrpG是目前已知的hrp基因表达的最高层面的调节蛋白,至今尚未鉴定到野油菜黄单胞菌调控hrpG表达的基因。本研究利用hrpX启动子和蔗糖敏感型sacB基因构建了hrpX表达报告质粒。实验结果表明该报告质粒可用于筛选鉴定正向调控野油菜黄单胞菌hrpX表达的基因。该报告质粒的构建,为研究hrp基因表达调控机制,揭示植物病原细菌的致病机制提供了有效的材料。 相似文献
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植物病原是普通植物病理学的重要内容之一，掌握植物病原生物分类的变化有助于正确认识和鉴定植物病害。本文介绍在普通植物病理学的教学内容中，植物病原菌物分类地位的变迁，植物病原细菌的类群组成变化、分类单元的变迁及部分种类学名的更替，植物病原病毒的分类变化和种名的书写格式．保持课程教学内容紧跟学科发展步伐。 相似文献
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ｈｒｐ基因是一类决定病原细菌对寄主植物的致病性和在非寄主植物上激发过敏性反应的基因。由于它在寄主致病和非寄主抗病中的双重功能，使得ｈｒｐ基因的研究成为植物病原菌和植物互作研究领域中的一个重要内容。ｈｒｐ基因在植物病原细菌中的广泛存在及高度同源性说明不同植物细菌病害中存在着共同的机制。本文就植物病原细菌中ｈｒｐ基因的分布、特征、同源性、ｈｒｐ基因表达调控以及ｈｒｐ基因产物和功能等方面研究进展做一综述 相似文献
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在植物病理学教科书中，植物病原细菌的分类出现了较大的变化。文章综述了不同版本教科书中所用的细菌分类系统，重点列出了2004年最新出版的伯杰氏细菌分类系统中，植物病原细菌的分类地位及其代表菌的名称，指出难养细菌的种类及其所致病害，提出农科本科教学中关于细菌分类的教学思路。 相似文献
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青枯菌Ⅱ型分泌系统编码基因的克隆 总被引：1，自引：0，他引：1
植物青枯菌Ⅱ型分泌系统与致病蛋白的分泌密切相关.编码青枯菌(Ralstonia solanacearum)Ⅱ型分泌系统的gsp基因簇由12个基因组成,通过设计适合高GC%含量基因扩增的PCR反应体系,成功克隆了编码青枯菌Ⅱ型分泌系统的全部12个gsp基因.分别将gsp基因连接到酵母双杂交系统的诱饵及捕获载体上,构建了gsp基因诱饵库和捕获库.经序列测定证明12个gsp基因读框正确,保障了其在酵母系统中的表达. 相似文献
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瓜类细菌性果斑病菌过敏性反应和致病性(hrp)基因簇部分基因的克隆及功能分析 总被引：2，自引：0，他引：2
过敏性反应和致病性(hrp)基因存在于革兰氏阴性植物病原细菌中,决定病原细菌对寄主植物致病性和诱导非寄主及抗病植物过敏性反应(hypersensitive response,HR)。本研究从果斑菌(Acidovorax avenaesub sp.citrulli)的hrp基因簇中克隆了hpaA、hrcT、hrcC和hrpG基因,通过同源重组的方法,分别构建了其突变体。电镜观察发现,hpaA和hrpG基因突变体的鞭毛缺失且细胞形态发生显著变化,而hrcT和hrcC基因突变体的鞭毛和细胞形态未发生明显变化。在烟草(Nicotiana tabacam)和哈密瓜(Hami cantaloupe)叶片上的测定结果显示,hpaA、hrcT和hrcC的突变体均失去在烟草上的HR激发能力和在哈密瓜叶片上的致病性;hrpG在烟草上的HR激发能力和在哈密瓜上的致病性则显著减弱;进一步的生长曲线测定结果表明,hpaA、hrcT、hrcC和hrpG的突变体的定殖能力均显著下降。相应地,功能互补后突变体基本恢复至野生表型。证明瓜类细菌性果斑病菌hrp基因作为Ⅲ型分泌系统关键组份影响病原细菌对寄主植物的致病性和对非寄主及抗病植物的过敏性... 相似文献
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植物病原菌侵染寄主的过程就是病原菌和寄主植物相互作用的过程。在这个相互作用过程中,Ⅲ型分泌系统和Ⅲ效应物与病原菌致病密切相关。大部分革兰氏阴性植物病原菌通过Ⅲ型分泌系统定向的把效应物蛋白传递到宿主细胞,效应物蛋白进入植物体引起致病或过敏反应。本研究将百日咳杆菌的腺苷酸环化酶基因连接至含启动子的pLAFRJ载体上,从而构建出一个新的体外快速鉴定Ⅲ型效应物的报告质粒pJ-JA,并用已鉴定为Ⅲ型效应物基因的十字花科黑腐病菌XC1553的启动子和信号区验证该报告质粒,证明这个系统是可以工作的。该报告质粒为进一步精确筛选鉴定十字花科黑腐病菌Ⅲ型效应物提供了材料。 相似文献
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冯洁 《农业生物技术学报》2008,16(1)
植物青枯菌II型分泌系统与致病蛋白的分泌密切相关。编码青枯菌II型分泌系统的gsp基因簇由12个基因组成,我们通过设计适合高GC%含量基因扩增的PCR反应体系,成功克隆了编码青枯菌II型分泌系统的全部12个gsp基因。分别将gsp基因连接到酵母双杂交系统的诱饵及捕获载体上,构建了gsp基因诱饵库和捕获库。经序列测定证明12个gsp基因读框正确,保障了其在酵母系统中的表达,为GSP蛋白之间的互作研究奠定了基础 相似文献
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以蓄和饭豆为试验材料,从对Al胁迫的响应时间、蛋白质合成抑制剂的影响、体内有机酸含量变化及阴离子通道抑制剂的影响等方面,比较研究了Al诱导根系分泌有机酸的差异,以进一步明确铝(Al)诱导植物根系有机酸分泌的过程。结果表明,萹蓄根系在Al胁迫后30.min内分泌出草酸,而Al胁迫至少4.h后饭豆根系才开始分泌柠檬酸;蛋白质合成抑制剂环己亚酰胺(Cycloheximide,CHM)不影响萹蓄根系草酸的分泌,但抑制了84%Al诱导的饭豆根系柠檬酸的分泌,表明前者不需要新蛋白质的诱导合成,却是后者所必需的。Al处理不改变萹蓄根尖草酸的含量,但明显提高了饭豆根尖柠檬酸的含量;阴离子通道抑制剂苯甲酰甲醛(Phenylglyoxal,PG)和蒽-9-羧酸(Anthrancene-9-carboxylic.acid,A-9-C)分别有效抑制Al诱导萹蓄根系草酸的分泌及饭豆根系柠檬酸的分泌,再次证明两者有机酸的分泌是通过某种被Al所诱导或激活的阴离子通道所实现的。 相似文献
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黑麦品种间耐铝差异性机制研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用室内模拟方法,研究了铝诱导黑麦根系分泌有机酸、根尖磷对铝的固定作用。结果表明,在铝胁迫下冬牧品种（Win）相对根伸长率高于King品种。在铝胁迫下,经磷预处理的根尖铝和磷含量增加,且以Win品种根尖中的Al、P含量较高,说明根尖磷对铝的固定是黑麦耐铝机制之一。另一方面,在铝胁迫下,两品种根系均分泌柠檬酸和苹果酸,且Win的分泌速率较高。有机酸的分泌随着铝处理浓度（10、30、50 mol/L）和时间（0.5、3、6、9、12 h）的增加而增加,但在低温（4C）下柠檬酸分泌量显著减少。Al处理0.5 h后苹果酸已明显分泌,而柠檬酸的分泌在铝处理6 h后才明显增加。在铝处理前,进行缺磷预处理（3 d）不能增加有机酸的分泌,10 mol/L的La3+、Cu2+、Ni3+也不能诱导根系分泌有机酸。说明铝诱导根系专一性分泌有机酸也是黑麦品种间耐铝性差异的机制。 相似文献
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铝胁迫下黑麦根尖分泌有机酸和钾离子的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用药理学研究方法,研究了几种抑制剂和脱落酸对铝诱导黑麦根尖分泌有机酸和钾离子的影响。结果表明,在铝(100、200、300μmol/L AlCl3)胁迫下,根尖分泌柠檬酸、苹果酸和钾离子,且随着铝处理浓度的增加其分泌量显著增加。阴离子通道抑制剂苯甲酰甲醛(0.1、0.2 mmol/L)抑制根尖在铝(200μmol/L AlCl3)胁迫下分泌有机酸的同时,也抑制根尖分泌钾离子;钾离子通道抑制剂四乙基铵(20、40 mmol/L)和铯(10、20 mmol/L CsCl)在抑制根尖分泌钾离子的同时,也抑制铝诱导的有机酸分泌。25、50μmol/L的ABA处理后,铝诱导的有机酸分泌和钾离子的分泌均显著增加。但是,铝诱导的有机酸分泌在受到阴离子通道抑制剂尼氟灭酸(0.4、0.8 mmol/L)处理抑制后,钾离子的分泌并不减少;铝胁迫下根尖分泌的钾离子在ATP酶抑制剂钒酸钠(0.25、0.50、2.00 mmol/L)处理后受阻的同时,有机酸的分泌却显著增加。这些结果说明,钾离子是铝诱导黑麦根尖分泌有机酸的陪伴离子,而并非有机酸分泌的调控因子。 相似文献
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Wine may cause stomach irritation due to its stimulatory effect on gastric acid secretion, although the mechanisms by which wine or components thereof activate pathways of gastric acid secretion are poorly understood. Gastric pH was measured with a noninvasive intragastric probe, demonstrating that administration of 125 mL of white or red wine to healthy volunteers stimulated gastric acid secretion more potently than the administration of equivalent amounts of ethanol. Between both beverages, red wine showed a clear trend for being more active in stimulating gastric acid secretion than white wine (p = 0.054). Quantification of the intracellular proton concentration in human gastric tumor cells (HGT-1), a well-established indicator of proton secretion and, in turn, stomach acid formation in vivo, confirmed the stronger effect of red wine as compared to white wine. RT-qPCR experiments on cells exposed to red wine also revealed a more pronounced effect than white wine on the fold change expression of genes associated with gastric acid secretion. Of the quantitatively abundant organic acids in wine, malic acid and succinic acid most actively stimulated proton secretion in vitro. However, addition of ethanol to individual organic acids attenuated the secretory effect of tartaric acid, but not that of the other organic acids. It was concluded that malic acid for white wine and succinic acid for red wine are key organic acids that contribute to gastric acid stimulation. 相似文献
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Huang CF Chen YW Yang CY Lin HY Way TD Chiang W Liu SH 《Journal of agricultural and food chemistry》2011,59(4):1087-1094
The effect of lotus leaf ( Nelumbo nucifera Gaertn.) on diabetes is unclear. We hypothesized that lotus leaf can regulate insulin secretion and blood glucose levels. The in vitro and in vivo effects of lotus leaf methanolic extract (NNE) on insulin secretion and hyperglycemia were investigated. NNE increased insulin secretion from β cells (HIT-T15) and human islets. NNE enhanced the intracellular calcium levels in β cells. NNE could also enhance phosphorylation of extracellular signal-regulated protein kinases (ERK)1/2 and protein kinase C (PKC), which could be reversed by a PKC inhibitor. The in vivo studies showed that NNE possesses the ability to regulate blood glucose levels in fasted normal mice and high-fat-diet-induced diabetic mice. Furthermore, the in vitro and in vivo effects of the active constituents of NNE, quercetin, and catechin, on glucose-induced insulin secretion and blood glucose regulation were evaluated. Quercetin did not affect insulin secretion, but catechin significantly and dose-dependently enhanced insulin secretion. Orally administered catechin significantly reversed the glucose intolerance in high-fat-diet-induced diabetic mice. These findings suggest that NNE and its active constituent catechin are useful in the control of hyperglycemia in non-insulin-dependent diabetes mellitus through their action as insulin secretagogues. 相似文献
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Metabolic profiling of root exudates of Arabidopsis thaliana 总被引：5，自引：0，他引：5
Walker TS Bais HP Halligan KM Stermitz FR Vivanco JM 《Journal of agricultural and food chemistry》2003,51(9):2548-2554
In addition to accumulating biologically active chemicals, plant roots continuously produce and secrete compounds into their immediate rhizosphere. However, the mechanisms that drive and regulate root secretion of secondary metabolites are not fully understood. To enlighten two neglected areas of root biology, root secretion and secondary metabolism, an in vitro system implementing root-specific elicitation over a 48-day time course was developed. After roots of Arabidopsis thaliana had been elicited with salicylic acid, jasmonic acid, chitosan, and two fungal cell wall elicitors, the secondary metabolites subsequently secreted were profiled. High-performance liquid chromatography was used to metabolically profile compounds in the root exudates, and 289 possible secondary metabolites were quantified. The chemical structures of 10 compounds were further characterized by (1)H and (13)C NMR: butanoic acid, trans-cinnamic acid, o-coumaric acid, p-coumaric acid, ferulic acid, p-hydroxybenzamide, methyl p-hydroxybenzoate, 3-indolepropanoic acid, syringic acid, and vanillic acid. Several of these compounds exhibited a wide range of antimicrobial activity against both soil-borne bacteria and fungi at the concentration detected in the root exudates. 相似文献