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发根农杆菌介导的百脉根的基因转化 总被引：4，自引：0，他引：4
本文报道了豆科植物简单有效的转化再生实验系统。百脉根子叶外植体被含发根性Ｒｉ质粒载体的发根农杆菌感染，该载体带有一个ｕｐｔ－Ⅱ基因和一个甘露碱合成酶基因，在含卡那纱的筛选培养基上，外植体能诱导出毛根，并不断生长，毛根诱导频率为４５．５％。切取毛根根段在筛选培养基上培养，毛根能膨大，并分化再生成苗和植株，其再生率为７６７．９％。抗性植株形态正常，浅层根系发达，ＤＮＡ斑点杂交与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明 相似文献
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百脉根农杆菌快速高效遗传转化体系的建立 总被引：6，自引：2，他引：4
以百脉根品种“里奥”作为受体材料,以GUS基因为报告基因,研究了影响农杆菌介导的百脉根遗传转化的几种因素及表面活性剂(PEG 4000)、真空处理和乙酰丁香酮对提高转化效率的影响,建立了农杆菌介导的百脉根快速高效遗传转化体系,并获得了转基因抗性苗。结果表明,以子叶(带叶柄)为外植体,在OD600为0.5的菌液中,加入150 mg/L的PEG 4000,真空度6×10-2Pa,抽真空12 min,共培养3 d,转入含卡那霉素50 mg/L和羧苄青霉素300 mg/L的分化培养基中,约20 d后,50%的外植体分化不定芽,生根成苗。PCR初步检测表明有83%的植株为GUS阳性,转化率约为42%。 相似文献
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为提高外源抗原蛋白的表达水平,根据已得到的HA-LTB融合基因,通过添加双增强子CaMV35S启动子、增强子Ω序列、内质网滞留信号KDEL序列及加长poly(A)序列等表达调控元件,构建HA-LTB高效融合植物表达载体。利用农杆菌介导方法转化百脉根,获得转基因阳性植株21株,经PCR和RT-PCR检测表明HA-LTB融合基因已整合到百脉根基因组中。利用ELISA检测转基因植株,结果表明LTB免疫佐剂与HA抗原蛋白均具有免疫原性,LTB最高表达量达到0.086 μg/mg(蛋白粗提液),HA最高表达量达到0.25 μg/mg(蛋白粗提液)。通过植物表达载体的设计和构建,使禽流感血凝素在百脉根中的表达量得到了显著提高,为禽流感可饲疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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农杆菌介导白三叶草高效遗传转化和转基因植株再生 总被引：9，自引：4，他引：9
利用子叶下胚轴为外植体,通过农杆菌Ti质粒介导途径,建立了白三叶草高效遗传转化及转基因植株高频率再生体系。PCR检测及Southern印迹鉴定结果表明,外源T-DNA片段已整合到转基因植株的基因组中,且多以1~2个少数拷贝存在。Northern印迹结果和对报告基因GusA编码蛋白的活性检测结果表明,目的基因在部分转基因植株中高水平表达。适宜条件下外植体遗传转化后的植株再生比例达58.23%~62.12%。与对照相比,转基因植株在外部形态上没有发生改变。 相似文献
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百脉根的组织培养与植株再生 总被引：5，自引：1，他引：4
百脉根下胚轴在附加有２，４－Ｄ ０．６￣２．０ｍｇ／Ｌ、ＫＴ ０．３ｍｇ／Ｌ的ＭＳ的培养基上，３￣４周时形成愈伤组织，继代２￣４次后，在附加有ＢＡ ０．５￣２．０ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．１￣２．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上２￣３周有白色根形成。 相似文献
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云南引进帝国百脉根的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
对引进帝国百脉根进行茎叶比、干鲜比、干草产量、营养成分和体外干物质消化率(IVDMD)的测定。结果表明，帝国百脉根含有丰富的营养，分枝期和盛花期粗蛋白含量分别高达28．0%和20．79%，粗纤维含量为13．0%和17．46%，Ca、P 丰富，比例恰当，体外干物质消化率较高而稳定，在分枝期和开花期分别为58．64%和57．25%。因此，帝国百脉根为饲用价值较高的优良豆科牧草，应予以进一步开发利用。 相似文献
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黄酮和皂苷不仅是植物中重要的防御性次生代谢产物,而且具有显著的药理和生理活性,对于植物的抗性研究和工业化应用具有重要意义。对鹰嘴紫云英(Astragalus cicer L.)、红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop)、百脉根(Lotus corniculatus L.)、小冠花(Coronilla varia L.)、黄花草木樨(Melilotus officinalis(L.)Desr.)和苜蓿(Medicago L.)多种豆科牧草中总黄酮和总皂苷的周年积累规律和分布特点进行研究,以期为豆科牧草建立科学的牧刈制度和合理应用提供理论依据。结果表明:总黄酮和总皂苷在不同属间和品种间的动态变化各不相同;在不同组织中的分布也不同,在整个生育时期,均为叶片中的含量多于茎秆中的。前5种豆科牧草的总黄酮含量显著高于苜蓿,是提取总黄酮的优质材料;红豆草、鹰嘴紫云英、黄花草木樨及苜蓿的总皂苷含量均高于小冠花和百脉根,是提取皂苷产品的优质材料。 相似文献
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农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入桑树的研究 总被引：23，自引：5，他引：18
人工合成柞蚕抗菌肽Ｄ基因通过根癌农杆菌Ｔｉ质粒载体转入桑树叶盘，获得基因转化工程苗。柞蚕抗菌肽对桑树青枯病假单孢菌有明显杀菌作用。人工合成柞蚕抗菌肽基因导入农杆菌感染桑树叶盘并诱导成苗。经卡那霉素筛选，胭脂碱电泳检测及抗菌肽基因探针进行印迹点杂交，确认抗菌肽基因转化桑苗成功，为培育抗青枯病品种打下基础。 相似文献
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Lotus corniculatus L., a leguminous plant containing condensed tannins, is now being evaluated in Sweden as a component of mixed pastures. This is because of its high nutritive value, palatability, modest requirement for water, calcium and phosphorous and particularly because it has the ability to survive harsh weather conditions that typify northern Scandinavia. This trial was undertaken to assess the possible parasitological benefits of using L. corniculatus when fed as a minor component in a mixed pasture sward to young sheep. This was compared with similar sheep that were fed pasture with a comparable legume content consisting of Trifolium repens L. Separate groups of lambs, maintained in pens and provided with fresh pasture cuts containing either L. corniculatus or T. repens each day, were trickle-dosed with infective larvae of mixed parasite species. For each pasture type, groups of 6 lambs had either established worm burdens only, received incoming infections only, or had the combination of both adult and incoming infections. Worm burdens were monitored by serial faecal egg counts and at the termination of the study, all animals were slaughtered for worm recovery, identification and enumeration. The results showed that there were no differential effects between L. corniculatus and T. repens on the different stages of development for a range of nematode parasite species recovered from these lambs. Several reasons may account for this: such as the low level of condensed tannins in the L. corniculatus variety tested, the minor proportion of this plant in the diet and/or the variety of L. corniculatus used in this trial which do not provide any benefits to controlling parasites of sheep. 相似文献
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百脉根ISSR-PCR反应体系的建立与优化 总被引：1，自引：0，他引：1
运用L16(45)正交设计对百脉根ISSR反应的5个因素,即DNA模板浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶浓度在4个水平上进行优化实验,通过不同反应体系扩增效果比较,最终确定在20uL体系中各反应物的最适含量为:40ng模板DNA、2μL 10×PCR Buffer、0.15mmol/LdNTPs、0.75μmol/L ISSR引物、1.5mmol/L MgCl2、1UTaqDNA聚合酶。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行百脉根属种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。 相似文献
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The use of natural plant anthelmintics was suggested as a possible alternative control of gastrointestinal nematodes (GIN) in ruminants. Direct anthelmintic effects of tannin-containing plants have already been shown in sheep and goat GIN. These anthelmintic properties are mainly associated with condensed tannins. In the present study, we evaluated possible in vitro effects of three tannin-containing plants against bovine GIN. Effects of Onobrychis viciifolia, Lotus pedunculatus and Lotus corniculatus condensed tannin (CT) extracts on Cooperia oncophora and Ostertagia ostertagi were determined by a larval feeding inhibition assay (LFIA) and a larval exsheathment assay (LEA). In the LFIA, all three plant extracts significantly inhibited larval feeding behaviour of both C. oncophora and O. ostertagi first stage larvae in a dose-dependent manner. The L. pedunculatus extract, based on EC(50) (effective concentration for 50% inhibition), was the most effective against both nematodes, followed by O. viciifolia and L. corniculatus. The effect of CT extracts upon larval feeding behaviour correlates with CT content and procyanidin/prodelphidin ratio. Larval exsheathment of C. oncophora and O. ostertagi L3 larvae (third stage larvae) was also affected by CT extracts from all three plants. In both in vitro assays, extracts with added polyvinylpolypyrrolidone, an inhibitor of tannins, generated almost the same values as the negative control; this confirms the role of CT in the anthelmintic effect of these plant extracts. Our results, therefore, indicated that tannin-containing plants could act against cattle nematodes. 相似文献
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在漫长的进化过程中,高等真核生物从原核生物中获取了大量基因,对这些基因进行鉴定分析,可为研究高等植物系统演化及基因组水平比较分析提供理论依据。为了进一步解析大豆和百脉根古老原核基因在其基因组中所起的作用及进化关系,本研究利用生物信息学技术对大豆和百脉根基因组古老原核基因进行全基因组鉴定,并对其特征及功能进行了比较分析。研究结果表明,大豆(40.6%)古老原核基因的占比高于百脉根(33.9%),且多分布于内共生细胞器线粒体、叶绿体中。此外,古老原核蛋白质的结构域在大豆和百脉根基因组中的分布相似,表明其在大豆和百脉根进化过程中具有较高的共线性和保守性。通过GO注释发现大豆与百脉根中古老原核蛋白主要分布在膜系统、细胞、细胞组分中。在分子功能上,大豆古老原核蛋白更多地参与代谢和发育过程,这可能与其接受了更多的人为选育有关。在生物过程中,古老原核蛋白更多参与催化反应和结合反应,主要以酶的形式在发挥作用。通过比较分析,本研究揭示了古老原核蛋白在大豆和百脉根中进化的独特模式,可为其他豆科植物基因组分析提供一定理论基础。 相似文献
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放牧条件下不同牧草品种混播组合的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
１９９２年１０月至１９９４年１１月，在放牧条件下，对不同牧草混播组合进行了试验研究。试验结果表明，适宜的混播组合为白三叶分别与高狐茅，黑麦草，鸭茅混播，百脉根与黑麦草，鸭茅的组合中，百脉根不能持久存在。在放牧条件下，每年应向人工草地追施适量尿素。 相似文献