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相似文献
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1.
狗舌草提取物诱导L1210细胞的凋亡   总被引:1,自引:0,他引:1  
以环磷酰胺、槲皮素和单猪屎豆碱为参照,观察狗舌草60%乙醇提取物体外对L1210细胞的凋亡形态变化的影响;利用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双参数法,研究狗舌草60%乙醇提取物对L1210细胞早期凋亡的影响,探讨狗舌草60%乙醇提取物致L1210细胞凋亡的机理。结果发现,狗舌草60%乙醇提取物能使L1210细胞发生典型的细胞凋亡,形成凋亡小体;狗舌草60%乙醇提取物引起的Annexin V-FITC^+/PI^-细胞百分比为86.8%,能诱导L1210细胞发生早期凋亡。  相似文献   

2.
首先将巴马小型猪(BM)、巴马香猪(BMXZ)外周血淋巴细胞分别与G418抗性HEK293细胞(G418^R293)共培养,通过G418加压筛选,除去共培养体系中巴马小型猪、巴马香猪外周血淋巴细胞,然后应用PCR及RT-PCR的方法对所制备的感染细胞模型进行系统鉴定。结果经6周共培养及3周加压筛选后,细胞的形态、生长速度及折光性均未见明显变化;PCR及RT-PCR鉴定表明,筛选后的共培养体系中已没有巴马小型猪、巴马香猪外周血淋巴细胞的存在;PERV特异性检测方法检测显示,该细胞模型的DNA中已有PERV的整合且有PERV特异性mRNA的表达。从而证实了猪外周血淋巴细胞来源的PERV在体外也能够感染人源细胞系,为研究PERV的生物学特性及病原安全性的评价搭建了技术平台。  相似文献   

3.
实验旨在探究生长分化因子9(Growth Differentiation Factor,GDF9)基因对番鸭颗粒细胞的影响,本研究构建了GDF9过表达载体(pEX-2-GDF9)以及干扰GDF9小RNA (siRNA-GDF9-530、siRNAGDF9-978、siRNA-GDF9-1320),分别转染至原代番鸭颗粒细胞内,通过流式细胞术检测GDF9基因对细胞周期和凋亡的影响;荧光定量PCR技术检测转染后颗粒细胞周期和凋亡相关基因的表达量。结果显示,过表达GDF9基因将番鸭颗粒细胞阻滞在G0/G1期,S期细胞极显著减少,且Bax基因和Caspase-3基因表达量极显著(或显著)上调,说明过表达GDF9促进了颗粒细胞凋亡;干扰GDF9基因表达后,G0/G1期细胞极显著减少,S期细胞极显著增加,且CDK-2、Bcl-2、CCND1 mRNA极显著上调,CCNE1 mRNA显著上调。综上可知,GDF9基因表达促进颗粒细胞凋亡、抑制细胞周期进程。该结果可为番鸭的卵泡发育机制研究提供理论基础。  相似文献   

4.
鹅卵泡颗粒细胞凋亡及其与生殖激素间的关系   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用正处于产蛋期的扬州鹅10只,取其卵泡分离颗粒层细胞,用70%乙醇固定后,应用流式细胞术分析颗粒细胞凋亡情况。同时,用连续采血的方法,每3h采血一次,分离血浆,用放射免疫分析法测定血浆促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌激素(Ez)水平,用以分析激素水平与凋亡间的关系。结果表明:(1)无论是健康卵泡还是闭锁卵泡,颗粒细胞90%以上均处于G1期,2%~6%处于G2期,S期比例最小;(2)闭锁卵泡颗粒细胞凋亡率极显著高于健康卵泡(P〈0.01);(3)随着健康卵泡直径的增加,颗粒细胞的凋亡呈降低趋势;(4)健康组鹅的FSH、E2水平要高于闭锁组,而LH水平要低于闭锁组。  相似文献   

5.
鸡免疫器官中半胱天冬酶-3、Bcl-2的表达与细胞凋亡的关系   总被引:11,自引:4,他引:7  
用流式细胞法测定了30日龄AA肉鸡的胸腺、法氏囊和脾脏细胞中半胱天冬酶-3(caspase-3)、Bcl-2蛋白的表达及细胞周期和细胞凋亡率。结果:胸腺、法氏囊、脾脏中G0/G1期细胞比例分别是:96.44%、68.09%、92.97%;G2/M期细胞比例是:0.80%、1.04%、2.36%;S期细胞分别为:2.77%、30.52%、4.67%,表明细胞增殖活性的增殖指数(PI)是:3.56、31.92、7.03。胸腺、法氏囊、脾脏细胞凋亡率分别为:3.99%、0.32%、0.22%;caspase-3表达的阳性细胞率是:14.24%、8.60%、5.49%,与细胞凋亡率呈方向一致的变化;Bcl-2蛋白表达阳性细胞率依次是:20.59%、30.24%、31.32%,与细胞凋亡率呈反向变化。上述结果表明:鸡免疫器官细胞凋亡是依赖caspase-3介导的细胞凋亡,caspase-3和Bcl-2是鸡免疫器官发育的重要调节物。  相似文献   

6.
本文旨在研究DNA甲基转移酶抑制剂S-腺苷高半胱氨酸(SAH)对猪成纤维细胞体外增殖活力、周期、凋亡和DNA甲基化水平的影响,为SAH在猪体细胞核移植上的应用提供理论基础。使用不同浓度的SAH(0、0.01、0.1、0.5、1mmol/L)处理猪成纤维细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,ELISA检测DNA甲基化水平,qRT-PCR检测相关基因表达情况。结果表明:与其余各组相比,0.1mmol/LSAH处理猪成纤维细胞24h对细胞活力和凋亡无明显影响,但可将细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05);与对照组相比,0.1 mmol/L SAH处理24 h可显著降低细胞中DNA甲基化水平及DNA甲基转移酶相关基因DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达,同时,显著提高细胞周期调控基因P21、P27的表达,但对凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达无明显影响。总的来说,0.1 mmol/L SAH处理24 h效果优于其他组,对细胞损伤较小,可通过影响DNA甲基转移酶相关基因表达来参与调控DNA甲基化水平。  相似文献   

7.
蕨麻多糖对小鼠淋巴细胞增殖和一氧化氮分泌的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
为探讨蕨麻多糖(Potentilla anserine polysaccharide,PAP)免疫调节的作用机理,观察了PAP对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌一氧化氮的影响。结果显示,50mg/L PAP配合ConA或LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)能使小鼠脾淋巴细胞在体外显著增殖(P〈0.05);100、200及400mg/L PAP配合ConA或LPS可使小鼠脾淋巴细胞在体外极显著增殖(P〈0.01);与对照组相比,PAP以不同浓度(50~400mg/L)处理小鼠脾淋巴细胞后一氧化氮分泌量均显著升高(P〈0.05)。试验结果表明,蕨麻多糖能明显促进体外培养的小鼠脾淋巴细胞增殖和分泌一氧化氮,与ConA或LPS有协同作用。  相似文献   

8.
供体细胞对猪体细胞克隆胚胎早期发育的影响   总被引:1,自引:1,他引:1  
以中国农业大学实验用小型猪香猪胎儿成纤维细胞、成年耳成纤维细胞和颗粒细胞3种细胞系为供体细胞进行核移植。比较了血清饥饿法和接触抑制法处理胎儿成纤维细胞诱导进入G0/G1期的效率,发现二者差异不显著(P〉0.05),血清饥饿2d和4d差异不明显,同样接触抑制2d和4d差异也不显著(P〉0.05)。系统研究了影响克隆胚胎发育的供体因素:血清饥饿与否、细胞形态、细胞类型及个体差异等,结果表明:血清饥饿处理对克隆胚的早期发育没有明显的促进作用;圆形光滑细胞有利于细胞融合,对早期发育无显著影响(P〉0.05);不同个体、不同类型的供体细胞对克隆胚囊胚发育率有一定的影响。  相似文献   

9.
程序性细胞死亡与发育生物学(续)   总被引:1,自引:0,他引:1  
(上接2001年第5期P65)细胞周期(cellcycle)是细胞周而复始的分裂过程。真核细胞的细胞周期包括G1期(合成前期)、S期(合成期)、G2期(合成后期)和M期(有丝分裂期)。每个细胞期都有其特殊功能,各细胞期之间都有转折点。这种细胞周期性的反复进行说明它是受控制的过程。细胞周期的有序运行是细胞增殖过程的主要保证,这种有序运行是受一系细胞分裂周期基因(celldivisioncyc1egene,CDC)顺序表达的调控。各种细胞因子如生长因子、控制因子、分化因子相互协调并影响细胞周期的进行。目前,已发现和证实了许多具有调…  相似文献   

10.
[目的]研究内蒙古典型草地不同时期土壤及植被营养状况的差异及变化特点,为内蒙古典型草地的合理利用、退化草地的恢复治理以及畜牧业的可持续发展提供参考。[方法]从内蒙古不同地区典型草原选取8个监测点,包括G1(鄂温克草原,温性草甸草原,呼伦贝尔市)、G2(乌拉特草原,荒漠草原,巴彦淖尔市)、G3(天然草滩,乌兰察布市)、G4(辉腾锡勒草原,五花草甸草原,乌兰察布市)、G5(科尔沁草原,温性草甸草原,通辽市)、G6(人工牧草种植地,赤峰市)、G7(乌拉特草原,荒漠草原,包头市)、G8(格根塔拉草原,荒漠草原,乌兰察布市);于2020年牧草返青期、旺盛期、枯萎期分别从不同监测点样方中取0~20 cm土层土样及植物样品地上部分,测定土壤和植物中的常规养分含量;利用主成分分析法计算不同监测点不同时期土壤及植被营养水平的综合得分并排序。[结果]返青期、旺盛期、枯萎期土壤全氮含量均为G4监测点(辉腾锡勒草原)最高,极显著(P<0.01)高于其他监测点;旺盛期、枯萎期G7监测点(包头市境内乌拉特草原)最低。3个时期土壤有效磷含量均为G6监测点(人工牧草种植地)最高,显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于其他监测点。3个时期土壤有机质含量均为G4监测点(辉腾锡勒草原)最高,极显著(P<0.01)高于其他监测点,G7监测点(包头市境内乌拉特草原)最低。返青期G6监测点(人工牧草种植地)的植被氮、磷、钾含量均为最高,极显著(P<0.01)高于其他监测点。旺盛期G8监测点(格根塔拉草原)的植被氮、钾含量最高,G6监测点(人工牧草种植地)的植被磷含量最高。枯萎期G3监测点(乌兰察布市境内天然草滩)的植被氮、磷含量最高,G4监测点(辉腾锡勒草原)的植被钾含量最高。3个时期植被粗纤维含量均是G5监测点(科尔沁草原)最高,G4监测点(辉腾锡勒草原)最低。土壤营养状况评分为:G4监测点(辉腾锡勒草原)3个时期评分均较高,G7监测点(包头市境内乌拉特草原)3个时期评分均最低;植被营养状况评分为:G2监测点(巴彦淖尔市境内乌拉特草原)及G6监测点(人工牧草种植地)返青期>旺盛期>枯萎期,其余监测点均是旺盛期>返青期>枯萎期。[结论]内蒙古典型草原的土壤及植被养分含量存在明显的时空差异。总体来看,草甸草原返青期、旺盛期、枯萎期土壤中养分综合评分较高,荒漠草原3个时期评分较低;不同草原类型的植被养分综合评分在旺盛期较高,枯萎期较低。  相似文献   

11.
Humic substances are formed during the decomposition of organic matter in humus that found in many natural environments in which organic materials and microorganisms have been present. In the present study, humus extract exhibited antitumor effect on L1210 tumor development in isogeneic DBA/2 mice with the delay of tumor formation and a significant smaller tumor mass that infer a significant increase of life span of mice. The antitumor effect was not due to direct killing of L1210 or induction of apoptosis in tumor cells by humus extract.  相似文献   

12.
目的:研究连翘提取物对细胞炎症模型的抗炎作用。方法:将连翘提取物按不同浓度作用于细胞炎症模型,观察细胞的形态变化,利用MTT法测定各孔的光吸收值。结果:连翘苷和连翘黄酮对照组细胞形态镜检观察未见明显变化,OD值略比空白对照组低;黄酮对照组细胞几乎全部破碎;不同浓度的大肠杆菌对照组细胞破裂、聚集成团,作用显著(P<0.05),且随着浓度的升高,对细胞形态的改变愈加显著。结论:连翘提取物对炎性细胞有不同程度保护,与同浓度菌液对照组相比,保护作用显著(P<0.05),在100μL浓度菌液中保护作用尤甚,具有一定的抗炎作用。  相似文献   

13.
为了在体外研究紫花地丁黄酮类提取物抗鸡传染性支气管炎病毒(IBV—M41)的作用,以鸡胚肾细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应(CPE)与空斑减数试验测定紫花地丁黄酮类提取物抗IBV活性,计算其IC50与治疗指数,并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒穿膜的影响3个方面初探紫花地丁黄酮类提取物抗IBV活性的机理。结果:紫花地丁黄酮类提取物能明显抑制IBV的致病变作用,其IC50为16.52mg/L,TI值为15.76。研究显示,紫花地丁黄酮类提取物在体外对IBV直接灭活的效果明显,在高浓度时对抑制IBV吸附与穿入细胞具有一定作用。结果表明:紫花地丁黄酮类提取物在体外有明显的抗IBV感染作用,且主要是通过直接灭活IBV而发挥作用。  相似文献   

14.
Beginning in the fall of 2010, an increasing and alarming number of cases of calves suffering from liver dystrophy were reported in the south of Germany. An epidemiological investigation was carried out by the authors between November 2010 and July 2011, leading to the implication of a commercial dietary supplement as the potential cause for this outbreak. The components of this product were first tested in a cell culture model and two of them (dietary chestnut extract and glycerol monolaurate) showed a cytotoxic effect. The objective of this study was therefore to evaluate the effect of supplemental feeding of both components alone or in combination on liver function in newborn calves on a commercial dairy farm. Ten calves were enrolled in each of the three treatment groups and the control group (group O) following a blocked design. Treatment consisted of supplementation with chestnut extract at 0.02% of birth body mass (BM) (group C), supplementation with glycerol monolaurate at 0.006% of BM (group G) or a combined treatment (group CG) for five consecutive days. The effect of treatments on liver function was evaluated clinically and by measurement of glutamate dehydrogenase (GLDH) and aspartate aminotransferase (AST) activities as well as the determination of the concentrations of glucose, L‐lactate and total bilirubin in serum. There was a significant increase in GLDH and AST activities and a significant decrease in glucose concentration in treatment groups C and CG compared with the control group (p ≤ 0.035), whereas no difference was shown for group G. Survival was significantly decreased in groups C (p = 0.029) and CG (p = 0.001) compared with both group G and the control group. These results suggest that dietary chestnut extract in an amount of 0.02% of BM alone or in combination has a toxic effect on liver function in newborn calves.  相似文献   

15.
The present study describes the isolation, cloning and characterization of adipogenic progenitor cells from rat skeletal muscle. Among the obtained 10 clones, the most highly adipogenic progenitor, 2G11 cells, were further characterized. In addition to their adipogenicity, 2G11 cells retain myogenic potential as revealed by formation of multinucleated myotubes when co‐cultured with myoblasts. 2G11 cells were resistant to an inhibitory effect of basic fibroblast growth factor on adipogenesis, while adipogenesis of widely used preadipogenic cell line, 3T3‐L1 cells, was suppressed almost completely by the same treatment. In vivo transplantation experiments revealed that 2G11 cells are able to possess both adipogenicity and myogenicity in vivo. These results indicate the presence of bipotent progenitor cells in rat skeletal muscle, and suggest that such cells may contribute to ectopic fat formation in skeletal muscle.  相似文献   

16.
本试验采集广东某鸡场疑似禽网状内皮组织增生症患病鸡病料并进行处理,经接种DF1细胞、聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离鉴定出1株禽网状内皮组织增生症病毒(REV),命名为 GD1210。依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示,该分离株基因组序列全长8443 bp。将该分离株的基因序列与国内外各参考株相应序列进行同源性比对分析,与SNV株亲缘关系最近,核苷酸同源性最高。将该分离株感染1日龄SPF鸡以鉴定其致病性,结果显示该分离株使SPF鸡产生严重的免疫抑制作用。  相似文献   

17.
旨在评估连翘体外抗H5N1和H9N2禽流感病毒(avian influenza viruses,AIVs)增殖及其介导炎症的效果,本试验制备了连翘水提液,首先采用CCK-8法测定了连翘水提液对DF-1细胞的安全浓度,并通过3种处理方法(药液预处理病毒后感染细胞、先感染病毒后给药、先给药后感染病毒)来筛选连翘水提液的最佳给药方式;在最佳给药方式下,使用TCID50法检测禽流感病毒H5N1和H9N2的增殖情况,并采用qRT-PCR检测了炎症相关趋化因子和细胞因子的表达变化。结果显示,连翘水提液对DF-1细胞的最高安全浓度为4 mg·mL-1;先感染病毒后给药是最佳的给药方式;在最佳给药方式下,连翘水提液能显著降低H5N1和H9N2 AIVs在各个时间点的病毒滴度,并呈剂量依赖性关系;与对照组相比,H5N1 AIV给药组中CX3CL1、IL8L1、CCL5、SCYA4、IL1β、IL-6和TNF-α的表达显著降低,H9N2 AIV给药组中CX3CL1、IL8L1、CCL5、IFN-β、IL-6和TNF-α的表达也有类似的下降趋势。这表明连翘能够抑制H5N1和H9N2 AIVs在DF-1细胞中的增殖,降低炎症相关细胞因子的表达,有良好的抗炎和抗病毒活性。  相似文献   

18.
The experiment was done to investigate the antibacterial effect of aqueous extract from Chrysanthemum indicum L. combined with antibiotics on extended spectrum β-lactamases (ESBLs)-producing E. coli,and aimed to offer theoretical basis for its further development.The ESBLs-producing E.coli was induced to passage by combining Chinese herbal medicine with antibacterial drugs.Then the minimal inhibitory concentration (MIC) of medicines were determined with double microdilution method.The results showed that the MIC of Chrysanthemum indicum L.aqueous extract was 250 mg/mL.And the MIC of ceftriaxone,ceftiofur sodium,cefotaxime,florfenicol,mequindox,amikacin and lincomycin decreased significantly after combining with 1/2 MIC of Chrysanthemum indicum L.aqueous extract.This research showed that aqueous extract Chrysanthemum indicum L.could increase the antibiotic sensitivity of the ESBLs-producing E.coli.  相似文献   

19.
试验旨在探讨野菊花提取物与抗菌药联合作用对产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠杆菌的体外抑制效果,为野菊花的进一步开发利用提供理论依据。采用2倍微量稀释法和中西药联合诱导传代法测定野菊花提取物、抗菌药及联合作用后的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)。结果显示,野菊花水提物对该耐药大肠杆菌的MIC值为250 mg/mL,且在野菊花水提物亚抑菌浓度(1/2 MIC)作用下进行中西药联合传代,其与头孢曲松钠、头孢噻呋钠、头孢噻肟钠、氟苯尼考、痢菌净、阿米卡星、林可霉素7种抗菌药联合作用后,抗菌药的MIC值明显降低。表明野菊花水提物能够显著降低产ESBLs大肠杆菌对部分抗菌药的敏感性。  相似文献   

20.
[目的]探讨G蛋白偶联受体30(G Protein-Coupled Receptor 30,GPR30)在17β-雌二醇(E2)上调绵羊输卵管上皮细胞中SBD-2基因表达过程中的作用。[方法]将GPR30激动剂G1(10^-7mol/L)和17β-雌二醇(10^-6 mol/L)加入到第2代的绵羊输卵管上皮细胞中,培养6、12和24 h,运用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)技术测定不同时间点绵羊β-防御素-2(sheepβ-defensin-2,SBD-2)基因的表达量变化。[结果]与对照组相比较,G1和雌激素共同作用6 h后,绵羊输卵管上皮细胞中SBD-2基因的表达量极显著升高(P〈0.01),同时还具有明显的时间效应。[结论]雌激素上调绵羊输卵管上皮细胞内SBD-2基因表达的膜受体途径是由GPR30介导的。  相似文献   

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