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以致病性哈氏弧菌（Vibrio harveyi）腹腔注射布氏石斑鱼（Epinephelus bleekeri）18h后,取布氏石斑鱼头肾制备头肾粗提物,并对该粗提物的抗菌活性进行研究,结果表明：布氏石斑鱼经哈氏弧菌诱导后,其头肾粗提物不仅对金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）等革兰氏阳性菌有良好抑制作用,而且对大肠杆菌D31（Escherichio coli D31）、哈氏弧菌和溶藻弧菌（V.alginolyticus）等革兰氏阴性菌也有良好抑制效果;利用电泳凝胶琼脂糖弥散法检测发现,头肾粗提物中具有多种对大肠杆菌D31有较强作用效果的蛋白类抗菌物质;切胶回收AU—PAGE凝胶上的抗菌组分,利用SDS—PAGE凝胶检测各抗菌活性组分的分子质量大小依次约为：10．9KD,10．0KD,8．1KD,7．2KD,6．3KD,由于这些抗菌活性成分可被蛋白酶破坏,且分子质量均接近或低于10KD,可初步将其认定为抗菌肽。 相似文献
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麻蝇抗菌物质的提取及诱导 总被引：1，自引：0，他引：1
对麻蝇不同虫态、不同日龄的血淋巴抗菌物质活性进行测定，并着重研究了对麻蝇幼虫进行针刺和大肠杆菌注射两种方法诱导后，其抗菌物质的诱导效果、抗菌物质的活性改变和抗菌谱。结果表明，麻蝇成虫抗菌物质活性有高于幼虫和蛹的趋势；经诱导的麻蝇幼虫抗菌物质活性高于未经诱导；注射大肠杆菌诱导的活性高于针刺诱导。经诱导产生的抗菌物质对大肠杆菌及xca-2、Pm90—2、Psv(AB-8)，3种植物病原细菌有抑制作用，而对黑曲霉、荔枝霜疫霉、玉米大小斑3种真菌亦有一定的抑制作用。 相似文献
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以大蜡螟末龄幼虫为材料,诱导后获得免疫血淋巴为抗菌粗提物,并分为新鲜,冷冻,加热3种不同的处理,进行了对2种常见细菌和16种植物病原真菌的抑菌活性检测,并进行了Sephadex G-50凝胶过滤分离.结果表明,大蜡螟抗菌物质对大肠杆菌没有明显的抑制作用,而对金黄葡萄球菌抑制作用明显,抑菌活性单位在10左右;对10种植物病原真菌均有不同的抑菌活性,其中对苹果树皮腐烂病菌的抑制率达到65%以上;经过凝胶过滤分离,及对分离组分的抑菌活性测定,筛选出较合适的洗脱液为50 mM乙酸铵,各分离组分抑菌活性差异明显,粗提物被分成了两个差异显著的部分. 相似文献
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本文首次以鞘翅目拟步甲科昆虫黄粉虫（Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ）幼虫为实验材料,分别用超声波和饥饿后饲喂大肠杆菌的方式进行诱导,对诱导前后０～４ｄ内获得的抗菌肽进行了平板测活。实验表明抗菌肽含量在诱导后第４ｄ最高,且在４ｄ内随时间的增加而增加。两种诱导方式诱导出的抗菌肽具有相似的抗菌活性,都能较好地抑制大肠杆菌０７９和沙门氏菌５０１１５,且收集的抗菌物质经１００℃处理２０ｍｉｎ后抗菌活性基本不变。本文首次采用了饥饿后饲喂含菌食物的诱导方式,简便易行,适合大量昆虫抗菌肽的诱导、分离及应用。 相似文献
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利用大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ诱导中华蜜蜂血淋巴产生抗菌物质（中蜂抗菌物质）研究表明,中蜂抗菌物质对热稳定,对胰蛋白酶和蛋白酶Ｋ都很敏感,对氯仿部分敏感,且其作用的活性ＰＨ范围较宽广、把大肠杆菌诱导后的中蜂免疫血淋巴沸水浴国热后离心,上清液经ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析后出现一个活性峰,活性峰收集液经Ｕｌｔｒａｆｒｅｅ－Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａ ＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＤｅｖｉｃｅ离心过滤器和ＳＤＳ－Ｐ 相似文献
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黄粉虫幼虫中抗菌肽的诱导及其抗菌活性的初步研究 总被引：10，自引：0，他引：10
本文前次以鞘翅目拟步甲科昆虫黄粉虫幼虫为实验材料，分别用超声波和饥饿后饲喂大肠杆菌的方式进行诱导，对诱导前后０￣４ｄ内获得的抗菌肽进行了平板测活。实验表明抗菌肽含量在诱导后第４ｄ最高，且在４ｄ内随时间的增加而增加。两种诱导方式诱导出的抗菌肽具有相似的抗菌活性，都能较好地抑制大肠杆菌０７９和沙门氏菌５０１５，且收集的抗菌物质经１００℃处理２０ｍｍ后抗菌活性基本不变。本文前次采用了饥饿后饲喂含菌食物的 相似文献
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【目的】建立鸡白细胞中抗菌肽的分离纯化及活性鉴定方法。【方法】通过腹腔注射酪蛋白生理盐水,从鸡人工腹水中得到白细胞;将收集的白细胞,通过超声波反复破碎、体积分数10%乙酸浸提、低温高速离心、旋转蒸发除去乙酸和冷冻干燥等方法,得到抗菌肽粗提物;将得到的粗提物,经CM-Sepharose Fast Flow弱酸性阳离子交换层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化,收集分离的各组分,使用微量琼脂糖弥散法检测各组分的抗菌活性和最小抑菌浓度。【结果】共获得鸡抗菌肽粗提物0.270 g,经RP-HPLC分离纯化,抗菌肽离子交换阳性组分共分离出18个峰,其中6个峰对3种细菌均表现较强的抑菌活性,对鸡大肠杆菌E.coliO78(峰13)、金黄色葡萄球菌S.au-reus1056MRSA(峰15)和白色念珠菌C.albicansATCC10231(峰15)的最小抑菌浓度分别为0.627,0.001和0.035μg/mL。【结论】该法可以在实验室中用于鸡抗菌肽的提取及活性鉴定。 相似文献
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研究了实验性感染大肠杆菌对肉鸡股动脉压、肺动脉压和右心室内压的影响。结果表明:大肠杆菌感染肉鸡的股动脉收缩压、舒张压、平均股动脉压在1~7 d极显著下降(P<0.01),平均下降26.25%、27.72%、27.12%;股动脉收缩和舒张压最大变化速率第1天(41.86%、57.14%)和第2天(50.00%、70.27%)极显著下降(P<0.01);肺动脉收缩压第3天(23.57%)显著升高(P<0.05);肺动脉舒张压第1~3天(14.58%、54.61%和49.66%)显著升高(P<0.05);平均肺动脉压第2、3天(36.04%、36.27%)显著升高(P<0.05);右心室收缩压下降不显著,右心室舒张压第1、2天(80%和79.22%)显著升高(P<0.05);右心室收缩压最大变化速率第1天(44.46%)显著下降(P<0.05)、第2天(54.35%)极显著下降(P<0.01);右心室舒张压最大变化速率第2天(70%)极显著下降(P<0.01)。说明大肠杆菌感染严重影响肉鸡的肺及心血管系统机能,肉鸡呈现股动脉压下降和肺动脉压升高的低血流动力学特征。 相似文献
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不同宿主大肠杆菌对15种抗生素抗药性差异研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用96孔板微量肉汤稀释法,测定SPF鸡、商品肉鸡、鸡场饲养员、医院病人等不同宿主粪样140株大肠杆菌对15种抗生素的抗药性,比较不同用药环境下大肠杆菌的抗药性差异。结果表明：SPF鸡分离菌株的抗药性最低,平均抗药性频率为46．08％,大部分菌株对8～9种抗生素存在低水平抗药性。医院病人大肠杆菌平均抗药性频率达到67．47％,多数菌株对12—13种抗生素产生抗药性。由于商品鸡场大量使用抗生素,鸡场饲养员和肉鸡分离株平均抗药性频率远高于SPF鸡,分别达80．00％和72．27％,并对12—13种抗生素产生抗药性,其中对磺胺二甲嘧啶、利福平的抗药性频率都在90％以上。建议测定区域使用抗药性频率低于50％的抗生素：头孢唑啉、头孢噻呋、硫酸黏菌素、阿米卡星。 相似文献
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灵芝发酵液浸膏多糖对大肠杆菌生长抑制效果的观察 总被引：1，自引：0，他引：1
采用液体培养和固体培养的方法研究了灵芝发酵液浸膏多糖对大肠杆菌体外生长的影响。结果表明:5.0~40.0 g/L的灵芝发酵液浸膏多糖均具有抑制大肠杆菌生长的活性。 相似文献
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三株芽孢杆菌抑菌活性分析及对肉鸡舍空气微生物的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】分析2株解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）和1株苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）的基本特性以及对大肠埃希氏菌（Escherichia.coli,CVCC1570）的抑制活性;分析3株芽孢杆菌复合制剂对肉鸡舍空气大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用,为改善畜舍环境提供基础数据。【方法】对3株芽孢杆菌进行形态学观察、镜检和生长曲线测定,以大肠埃希氏菌（CVCC1570）为指示菌株,采用琼脂扩散法对单一菌株的抑菌特性进行测定,筛选出适宜的抑菌浓度;利用三因子三水平的正交试验设计,筛选出最佳抑菌效果的复合芽孢杆菌组合;鸡舍喷洒试验采用单因子设计,分为3个处理组,每个处理设3个重复,分别为空白对照组,化学消毒剂阳性对照组（苯扎氯铵）,喷洒复合芽孢杆菌菌剂处理组。在肉鸡不同日龄检测鸡舍内大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的变化规律。【结果】3株芽孢杆菌为革兰氏阳性需氧菌。芽孢杆菌SKN01和芽孢杆菌SKN02生长曲线相近,在培养2h开始进入对数生长期。芽孢杆菌SKN03生长较缓慢,进入对数生长期的时间相对较长。单一菌株对大肠埃希氏菌有效抑菌浓度均为108CFU•mL-1。经正交试验测定,3株芽孢杆菌复合菌液最佳抑菌组合为4×108 CFU•mL-1、4×108 CFU•mL-1、6×108 CFU•mL-1。最佳组合复合芽孢杆菌喷洒鸡舍,能够有效抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,在肉鸡生长后期复合制剂的抑菌效果明显。【结论】3株芽孢杆菌能够有效抑制大肠埃希氏菌,同时复合菌液能够有效减少鸡舍有害微生物的数量,起到改善鸡舍环境的作用。 相似文献
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肉鸡HSP70的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。 【方法】 利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy 载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫Balb/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。【结果】获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1。 【结论】免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1是一种理想的抗体。 相似文献
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枯草杆菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]探究枯草杆菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质。[方法]研究枯草杆菌诱导的家蝇幼虫提取物的抗菌活性及其对温度、酸碱、离子强度的稳定性。[结果]枯草杆菌诱导的家蝇幼虫提取物对6种病原菌和工程菌大肠杆菌JM109均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑制作用更强,诱导组的抗菌活性优于未诱导组。枯草杆菌诱导家蝇产生抗菌物质的具有很好的温度稳定性,在pH值4~10范围内都有较高的活性,但随着离子强度的升高抗菌活性下降。[结论]该研究为抗菌物质应用于饲料提供理论依据。 相似文献
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36只体质量1.5kg的艾维茵肉公鸡,随机等分9个区组,重复4次强饲粗蛋白(CP)含量为8.0～296.9g·kg-1的9种半合成饲粮,收集48h全部排泄物,测定饲粮及排泄物中粗蛋白和氨基酸含量。回归分析表明,排泄物中粗蛋白,总氨基酸,Asp,Glu,Gly,Ile,Leu,Lys,Phe,Met,Tyr及Val含量与饲粮中粗蛋白含量呈显著的线性或曲线回归关系(P=0.0994～0.0006),排泄物中粗蛋白、总氨基酸、诸氨基酸的排泄量与饲粮中相应养分含量呈显著的线性回归关系(P=0～0.0429),表明可根据饲粮中氨基酸含量估测排泄物中相应氨基酸含量。 相似文献
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本文对腹水症肉鸡的血液学变化、腹水的理化性质及其有无细菌等进行了研究。研究结果表明，腹水症肉鸡的红细胞、血红蛋白、红细胞压容、平均红细胞体积及异嗜性粒细胞均增多，与健康肉鸡相比较，其差异性显著；腹腔内的腹水是漏出液而不是渗出液，细菌学检查呈阴性，这说明该病可能不是细菌感染所引起。 相似文献
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从山东省诸城地区6个集约化养鸡场的大肠杆菌感染鸡群的死鸡、毛蛋的心血中分离到32株细菌,经形态、培养特性及生化反应鉴定为大肠埃希氏杆菌(Escherichia.coli)简称大肠杆菌(E.coli)。对其作动物回归试验结果表明,全部为致病性大肠杆菌。从而证明从死鸡(毛蛋)心血中分离到的大肠杆菌与其致病性密切相关。将分离到的鸡大肠杆菌的14株优势血清型菌株进行了质粒DNA分析,通过碱裂解法小量提取质粒,然后对质粒进行了琼脂糖凝胶电泳分析,用hindⅢ限制性内切酶对质粒进行了酶切分析,结果表明:质粒的得率为100%,来源相同的菌株具有相同或相似的质粒图谱,来源不同的菌株的质粒图谱一般不同。将血清型和质粒图谱比较发现:同一血清型可以有不同的质粒图谱,不同血清型可以有相似的质粒图谱,血清型与质粒图谱没有直接的联系。本试验同一来源菌株的质粒指纹图谱相同、但它们的血清型不一致的现象可作为自然条件下同一质粒在不同血清型大肠杆菌中扩散转化的一个分子生物学依据。 相似文献
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采用RT-PCR方法,利用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)C24V株接种MDBK细胞,提取病毒RNA,扩增出BVDV-E0基因,将所得片段与pET-28a表达载体连接,转化至BL-21大肠杆菌中,筛选阳性克隆,鉴定后证明pET-28a-E0原核表达载体构建成功。经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定,鉴定结果表明,目的蛋白在大肠杆菌中得以表达。 相似文献