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1.
ELISAA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒   总被引:6,自引:0,他引:6  
用FE细胞增殖犬冠状病毒(CCV)参考株,分别免疫家兔和BALB/c小鼠制备CCV多抗和单抗,建立了夹心ELISA及Dot-ELISA诊断方法。在检测的84例犬腹泻粪样中,多抗、单抗夹心法显示CCV阳性16例,Dot-ELISA阳性13便,后13例包括在前16例中,从84例腹泻犬粪样中随机取3例作CCV、犬细小病毒(CPV)双项检测,CCV阳性16例,CPV阳性6例,CCV、CPV混合感染4例。结  相似文献   

2.
ELISA双抗体夹心法诊断犬冠状病毒肠炎   总被引:1,自引:0,他引:1  
将电镜检查犬冠状病毒阳性的病犬粪便,经PEG沉淀、蔗糖线性梯度超速离心,用提纯的抗原免疫豚鼠制备抗血清,经饱和硫酸铵粗提、QAE-Sephadex-A50层析柱纯化提取IgG。将提纯的IgG与辣根过氧化物酶(HRP)标记,建立了诊断犬冠状病毒的ELISA双抗体夹心法。对收集的45份粪便样品进行检测,并以电镜检查作为旁证,证明该法具有特异、敏感的特点,可在4小时内报告结果。  相似文献   

3.
ELISA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒   总被引:2,自引:0,他引:2  
用FE细胞增殖犬冠状病毒(CCV)参考株,分别免疫家兔和BALB/c小鼠制备CCV多抗和单抗,建立了夹心ELISA及Dot-ELISA诊断方法。在检测的84例犬腹泻粪样中,多抗、单抗夹心法显示CCV阳性16例,Dot-ELISA阳性13例,后13例包括在前16例中。从84例腹泻犬粪样中随机取38例作CCV、犬细小病毒(CPV)双项检测,CCV阳性16例,CPV阳性6例,CCV、CPV混合感染4例。结果显示,在南京地区流行的犬腹泻中,CCV感染比例有超过CPV的趋势。  相似文献   

4.
用ELISA法检测犬细小病毒抗体   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文采用吸附豚鼠犬细小病毒(CPV)多克隆抗体的微量板,进行间接酶免疫测定(ELISA)检测犬血清中的CPV抗体。结果,ELISA抗体效价比血凝抑制抗体(HI)效价高,与HI效价的相关系数r=0.78。  相似文献   

5.
该试验采用过碘酸钠氧化法研制成功了抗鸡传染性法氏囊病病毒酶标抗体。通过进行双抗体夹心法ELISA试验,对不同送检病料中的传染性法氏囊病病毒进行了检测。结果表明:用过碘酸钠氧化法制备酶标抗体方法简便、省时;用双抗体夹心法ELISA试验检测传染性法氏囊病病毒,具有灵敏度高、特异性强等优点。  相似文献   

6.
应用单抗间接ELISA检测兔出血症病毒的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
建立了用于检测脏器组织中兔出血症病毒(RHDV)抗原的单抗间接ELISA法,并与血凝试验(HAT)和多克降双抗体夹心ELISA法进行比较,在被检的789份样品中,种方法检测结果皆为阴性的有551份,皆为阳性者173份;单抗间接ELISA和多克隆双体夹心ELISA均为阳性者31份;公多克隆双抗体夹心ELIS为阳性者31份;仅HAT为阳性者2份;仅单抗间接ELISA为阳性者1份。实验结果证实,单抗间接  相似文献   

7.
利用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)的基本原理,根据蛋清可以直接吸附在硝酸纤维素(NC)膜上的特点,建立了Dot-ELISA检测鸡白血病病毒(ALV)群特异性抗原的方法,并与双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)进行比较,两种方法具有相同的特异性和敏感性。  相似文献   

8.
以抗鸡新城疫病毒(NDV)单抗夹心ELISA试验为基础,在6000,建立了PEG-ELISA法,使用此法检测临诊样品,与单抗夹心ELISA相比,时间缩短70分钟且提高了OD490值,易于识别。结果表明,PEG-ELISAI法具有实际应用价值。PEG能加强抗原-抗体反应的速率和强度,这种效应在固相夹心ELISA第二步表现尤其明显。PEG的这种非特异性效应对于检测其它抗原或抗体的ELISA试验可能具有  相似文献   

9.
为了建立一种快速、敏感、特异的检测犬冠状病毒(CCV)的方法,利用感染CCV的犬肾传代细胞包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)作为第2抗体,建立了检测CCV抗体的间接ELISA方法。抗原的包被量为每孔3×104个染毒细胞,酶标抗体的工作浓度为1∶40。试验发现,包被的病毒抗原经甲醇固定30min后可以提高试验的敏感性,减少病毒抗原的使用量。与中和试验比较证实,2种抗体检测方法的测定结果呈正相关  相似文献   

10.
采用四种方法:即①单克隆抗体检抗原的酶联免疫吸附试验(Ag-ELISA)②检测抗体的在酶联免疫吸附试验(Ab-ELISA)③表膜检查(BCE)④小白鼠接种(MI),检查了肯尼亚183头骆驼锥虫的循环抗原,BCE查出尼亚183头骆驼锥早的循环抗原,BCE查出37头阳性20%),MI60头阳性(33%),Ag-ELISA63头阳性(49%),Ab-ELISA检出出的24头中,Ag-ELISA检出18头  相似文献   

11.
用酶标记抗传染性法氏囊病毒(IBDV)单克隆抗体,建立夹心阻断ELISA,检测IBDV鸡血清抗体。用D78细胞毒免疫24日龄的雏鸡,每周采血一次,共4次,用夹心阻断ELISA、微量细胞中和试验(VN)、琼脂扩散试验(NGP)检测鸡血清抗体,结果表明:夹心阻断ELISA同VN之间具有较高的相关性(r=0.8126),与AGP的相关性较低(r=0X.7575)。  相似文献   

12.
应用鸡病毒性关节炎病毒U.ConnS1133株,建立了检测鸡病毒性关节炎病毒抗原的双抗体夹心ELISA法。用该法检测三组接毒鸡的关节液,接毒后3天即可检出阳性,阳性率为58.3%;发病严重的4~11天阳性检出率达957%,14天阳性率为50%;17天阳性率为31.3%;20天以后则全部为阴性。用该法对大肠杆菌(E.CoLi)、葡萄球菌(Staphylococcus)、败血支原体(MG)、滑膜支原体(MS)、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性脑脊髓炎病毒(AEV)进行检测,结果均为阴性。试验表明,我们建立的双抗体夹心ELISA法,能早期、特异、敏感地检出鸡病毒性关节炎病毒抗原,从而解决了对该病早期诊断及类症鉴别带来的困难。  相似文献   

13.
分别用血清中和(SN)试验和单克隆抗体(TGEmAb和TGE/PRCVmAb)阻断酶联免疫吸附试验(B-ELISA)对81头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎(TGE)抗体检测。SN试验检出7份阳性血清,检出率为8.64%;B-ELISA试验检出7份PRCV抗体阳性血清,检出率为8.64%,无TGE阳性。SN试验检出7份TGE抗体阳性血清与B-ELISA试验检出的7份PRCV抗体阳性血清完全重合。结果证明,应用单克隆抗体进行的B-ELISA可鉴别诊断TGE与PRCV感染,优于SN试验  相似文献   

14.
采用四种方法:即①单克隆抗体检测抗原的酶联免疫吸附试验(Ag-ELISA)②检测抗体的酶联免疫吸附试验(Ab-EUSA)③表膜检查(BCE)④小白鼠接种(MI),检查了肯尼亚183头骆驼锥虫的循环抗原,BCE查出37头阳性20%),MI60头阳性(33%),Ag-ELISA63头阳性(34%),Ab-ELISA检出90头阳性(49%)。其中BCE未能检出的24头中,Ag-ELISA检出18头(75%)。所有阳性头数中,Ag-ELISA检出93%,Ab-ELISA95%。根据55头的结果,阳性与阴性之间Ag-ELISAOD值差异极显著(P<0.0001),Ab-ELISAOD值差异不显著。因此,用Ag-ELISA或结合BCE诊断伊氏锥虫感染比用AB-ELISA更理想。  相似文献   

15.
双抗夹心—ELISA诊断牛隐孢子虫病   总被引:14,自引:1,他引:14  
为了建立双抗体夹心—ELISA检测牛粪便中隐孢子虫卵囊抗原的方法。采用抗小球隐孢子虫(C.parvum)卵囊壁单克隆抗体,经对60头份牛粪便样本分别进行抗酸染色和双抗夹心—ELISA检测,结果抗酸染色法检出12头份有隐孢子虫卵囊,而ELISA除对抗酸染色阳性的12份粪样判为阳性外,还对抗酸染色阴性的4份粪样判为阳性,且不与牛球虫、牛结肠小袋纤毛虫发生类属反应。此外,本试验在稀释液中加入EDTA,并增加了反应温度,使得试验在抗体包被板并封闭后30min结束整个检测过程。结果表明,双抗体夹心—ELISA是敏感性高、特异性强的诊断牛隐孢子虫病的方法。  相似文献   

16.
用ELISA检测蛋和雏鸡中的肠炎沙门氏菌   总被引:1,自引:0,他引:1  
将以前用的快速检测环境样品中肠炎沙门氏菌(SE)的ELISA法,经改进后用于食物样品的检测。本实验选择夹心ELISA法,捕食阶段用亲和提纯的兔多克隆抗体,检测阶段用高特异单克隆抗体。除SE以外的39种细菌,其中包括32株沙门氏菌,均用ELISA法做了交叉试验,结果除SE外无反应性。将SE加于食物样品匀浆(雏鸡皮肤、肉和蛋)中测试ELISA法的敏感性,用ELISA法检测SE,在浓度为10%(重量/体  相似文献   

17.
作者建立了一种抗原捕获酶联免疫吸附试验(C-ELISA)。用对各血清型S1糖蛋白有特异性的单克隆抗体(MAb),对阿肯色(ArK)、康涅狄格(Conn)、马萨诸塞(Mass)等血清型的传染性支气管炎病毒(IBV)进行了检测和鉴定。当S1特异性单克隆抗体、抗原、鸡血清的血清型相同时,试验(采用双抗体夹心法)结果最为理想。而用群特异性(M糖蛋白特异性)MAb捕获抗原。抗原和异源鸡血清之间有不同程度的交  相似文献   

18.
目前检测牛种布鲁氏菌(Brucelaabortus)抗体常用的血清学方法有缓冲平板抗原试验(BPAT)、补体结合试验(CFT)、间接酶联免疫试验(I-ELISA)和竞争酶联免疫试验(C-ELISA)。本文介绍的荧光极化法(fluorescencepo...  相似文献   

19.
用从当地分离鉴定的山羊B组轮状病毒KB-63毒株,在剥夺初乳的山羊羔体内传代繁殖病毒,制备抗原,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)、斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)及生物素-亲和素系统酶联免疫吸附试验(BAB-ELISA)。这三种方法经阻断试验、重复性试验以及交叉试验表明,其特异性、重复性好。以双盲法将此三种方法与对流免疫电泳法(CIE)和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)作了对比研究,  相似文献   

20.
现代诊断技术在兽医学上的应用及其进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
1 免疫酶技术 (EIA)EIA是根据抗原 -抗体结合的特异性 ,以酶作标记物 ,酶对底物具高效催化作用的原理而设计 ,既可用于抗原的检查 ,也常用于血清抗体的检测。1 .1 酶联免疫吸附试验 (ELISA)ELISA是应用最广泛的免疫酶技术 ,包括间接法、夹心法、竞争法等。自VOLLER和BIDWELL(1 975 )首先报道了应用间接ELISA方法检测病毒特异性抗体以来 ,ELISA方法已普遍应用于传染病的流行病学普查、抗体水平的评价以及疫苗质量的监控和标化等 ,迄今为止大多数动物病原体均已发展或报道了ELISA方法的研究与…  相似文献   

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