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《畜牧兽医科技信息》2020,(4)
为了验证三重荧光RT-PCR方法检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸的可行性,应用建立的方法分别检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒和新城疫病毒抗原,验证该方法的特异性、敏感性和重复性,并用建立的方法检测临床样品。结果为,三重荧光RT-PCR方法能分别特异检出H5、H7和H9亚型禽流感病毒抗原。最低的检出限为H5亚型禽流感抗原(Re-11株)10-7的稀释度,变异系数(CV)为1.25%。检测100份鸡喉拭子,H5、H7亚型禽流感病毒核酸均为阴性,H9亚型禽流感病毒核酸13份阳性,阳性率为13.00%。结果表明,建立的三重荧光RT-PCR方法通过一个反应体系可以检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸、具有快速、灵敏、特异的特点,适合对禽类的大规模监测。 相似文献
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为了解兴文县禽流感病毒在家禽中的免疫效果和感染流行情况,通过采集辖区内12个乡镇家禽规模养殖场、散养户、农贸市场和活禽屠宰点的660份禽血清样本和660份禽拭子样本,在实验室以血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）检测血清中禽流感病毒H5亚型、H7亚型的抗体含量,并以实时荧光定量RT-PCR方法检测拭子中是否存在禽流感病毒H5亚型、H7亚型核酸。结果显示：660份禽血清样品中禽流感H5亚型抗体个体和群体合格率分别为89.24%、82.29%,禽流感H7亚型抗体个体和群体合格率分别为97.73%、87.50%;660份禽拭子样品中检出禽流感病毒H5亚型核酸阳性样品15份,阳性检出率为2.27%,禽流感H6亚型病毒核酸阳性样品6份,阳性检出率为0.95%,所有病毒阳性检出点均来自活禽屠宰点,未检出禽流感H7亚型病毒核酸阳性样品。结果表明：兴文县的禽流感H5和H7免疫抗体水平均符合国家强制免疫水平要求,且规模场抗体合格率优于农村散户,家禽养殖环节无禽流感病毒核酸（H5、H6和H7亚型）检出。活禽市场流通环节中均检测了禽流感病毒H5、H6、H7亚型,主要以禽流感病毒H5亚型居多,尤其是屠宰点的屠宰... 相似文献
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为掌握铜仁市家禽高致病性禽流感病毒的感染情况,及时研判疫情风险,保障养禽业的健康发展,2020年12月至2021年3月在全市10个县(区)随机选择1个规模场(或种禽场)、1个活禽交易市场(或禽屠宰点),采集咽肛双棉拭子样品和环境拭子样品共计890份,通过实时荧光定量PCR方法检测高致病性禽流感病毒(H5、H7亚型)。结果：13个家禽规模场和9个活禽交易市场全部样品的高致病性禽流感病毒(H5、H7亚型)核酸检测均为阴性。结论：2020—2021年冬春季铜仁市养殖家禽无高致病性禽流感病毒(H5、H7亚型)感染,发生高致病性禽流感疫情的风险较低。 相似文献
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《养禽与禽病防治》2018,(6)
为了掌握重组禽流感(H5+H7)二价灭活疫苗在鸡中的免疫效果,分别在东莞选取5个规模养殖场和14个镇(街)散养鸡免疫疫苗21天后,采集血清样品进行H5亚型和H7N9亚型禽流感病毒抗体检测,结果为H5亚型禽流感病毒(Re-8株)抗体阳性率为79.23%(683/862),H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率为64.15%(553/862)。结果表明,该疫苗在鸡群中能够产生比较好的应答,H5亚型禽流感病毒(Re-8株)抗体阳性率均能达到免疫规范要求的70%以上。H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率,在种鸡场和肉鸡场能到70%以上,但散养鸡抗体阳性率较低,有不能抵御野毒侵袭的风险,还需要进行二次免疫。 相似文献
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为了评价重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗的免疫效果,在2016年7月至2017年8月期间,对免疫重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株+Re-8株)的家禽采集了1 999份血清样品,采用血凝与血凝抑制方法进行检测,结果为H5亚型禽流感病毒Re-6株免疫合格率为86.84%,H5亚型禽流感病毒Re-7株免疫合格率71.44%,H5亚型禽流感病毒Re-8株免疫合格率为67.78%。结果表明,免疫重组H5亚型禽流感病毒三价灭活疫苗后,不同毒株的抗体、不同种类的家禽、不同免疫次数的抗体水平均有差异。 相似文献
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目的:了解禽流感病毒H5与H7亚型在不同场所外环境的分布状况,切实做好"两节"期间禽流感防控工作.方法:从养殖场、活禽交易市场、散养户、环境采集样品进行检测.结果:荧光RT-PCR复核,764份样品,H5亚型阳性数19份,阳性率为2.49%,H7亚型阳性数为零.H5亚型阳性分别来自交易市场和禽宰杀点.结论:黔东南州部分交易市场和禽宰杀点存在着H5亚型禽流感病毒,接触禽类内脏及活禽交易市场和家禽屠宰点是感染禽流感的高危因素,应加强环境卫生整治,落实环境消毒,以减少H5亚型禽流感传播至人的风险. 相似文献
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本文建立了一种H7亚型禽流感病毒微滴式逆转录数字PCR方法,为H7亚型禽流感病毒核酸的定量检测和临床低浓度样品的诊断提供一种检测技术。根据H7亚型禽流感病毒的HA基因,设计了1对特异性的引物和探针,建立了H7亚型禽流感病毒的微滴式逆转录数字PCR方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价,并初步应用于临床样品的检测。结果为,该方法的最低检出限为3 copies/μL;与H1亚型、H3亚型、H6亚型禽流感病毒、新城疫病毒、鸡马立克氏病病毒、鸡传染性贫血病毒和鸡传染性法氏囊病病毒无交叉反应;检测12次200倍稀释的H7N9亚型禽流感病毒(Re-2株)的核酸,变异系数为3.38%;检测了30份临床样品,结果均为阴性。结果表明,该方法的敏感性高,特异性和重复性好,适用于H7亚型禽流感病毒的临床检测和标准物质的标定。 相似文献
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暴发高致病禽流感疫区鸟类禽流感的血清学调查 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究应用血凝抑制试验(H I),2004年初H 5亚型禽流感在中国内地发生前后,于湖北、广西二疫区市县的生态系中,自健康的鹰、鸽子、野鸭和鹌鹑中采集了54份血清,对其进行了血清学检测,并将获得的血清学检测数据进行了统计学分析。分析结果显示,在总共采集的54份血清样品中,抗H 6亚型禽流感病毒(H 6)抗体、抗H 9亚型禽流感病毒(H 9)抗体、抗H 5亚型禽流感病毒(H 5)抗体阳性率分别为64.8%、75.9%、29.6%。推断,这一时期,H 6亚型禽流感病毒(H 6)、H 9亚型禽流感病毒(H 9)和H 5亚型禽流感病毒(H 5)共循环于该生态系中,其中H 9、H 6亚型禽流感病毒长期、稳定循环于该生态系中,为该生态系禽流感主要流行血清型。血凝抑制试验检测结果发现,H 5亚型禽流感病毒抗体滴度较低,最高仅为640×,其阳性率为29.6%,推断其可能为新近传入的病毒或新近重组变异出现的新病毒,可能为与该次禽流感暴发相关的新病毒,这一推断还有待于通过对病毒基因序列的分析而做进一步验证。 相似文献
10.
以H3亚型禽流感病毒(AIV)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)筛选阳性杂交瘤细胞并克隆化。结果获得了4株针对H3亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体,分别命名为1D7、1F9、5A4、5F5。这些单克隆抗体小鼠腹水HI效价为212～214。用H1、H6、H10亚型禽流感病毒各2株,H4、H5、H9和新城疫病毒(NDV)各1株进行特异性试验。结果表明:所有这些单抗仅与H3亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他亚型AIV及NDV反应。用28株H3亚型禽流感病毒进行排谱试验,结果证明:4株单抗均具有广谱性,其中1F9、5A4、5F5与受试的28株H3亚型AIV均反应,而1D7只与其中的26株反应。以上单抗将为控制畜禽及人类的流感提供必需的诊断试剂。 相似文献
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为掌握玉溪市禽流感在养殖场和活禽市场流行情况，2022年采集玉溪市9个县(市、区)32个乡(镇)62个村90个养殖场(户)及21个活禽市场2 280份样品进行监测。采用荧光RT-PCR方法对A型禽流感病毒检测并进行H5/H7/H9亚型禽流感病毒核酸分型。2022年全市共检出A型禽流感病毒核酸阳性240份，样品阳性率为10.53%,其中H9亚型233份、不确定型7份，未检出H5/H7亚型。活禽市场A型禽流感病毒核酸阳性率(31.47%)显著高于养殖场阳性率(0.27%),差异具有统计学意义(P<0.01);秋冬季节样品阳性率较高，差异具有统计学意义(P<0.01)。结果：玉溪市禽流感病毒主要分布于活禽市场，且以H9亚型流行为主，污染面较广，不同季度阳性率差异明显，但季节性差异缩小。结果提示：活禽市场是当前禽流感防控的重点，继续加强活禽市场的监测，同时强化活禽市场的检疫监管，严格执行消毒和休市制度，防止活禽市场禽流感病毒进入养殖环节。 相似文献
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为了研究湘西自治州规模化鸭场的高致病性禽流感的免疫情况和潜在的感染风险,笔者于2008年从湘西自治州各县市采集了规模化鸭场血清标本共480份,采用血凝试验和血凝抑制试验对4个免疫了H5亚型禽流感病毒灭活疫苗的规模化鸭场的不同日龄家鸭进行了H5和H7亚型禽流感病毒抗体的检测。结果表明:4个规模化鸭场H5亚型禽流感病毒抗体合格率分别为65.56%(59/90)、67.78%(61/90)、53.33%(48/90)、47.78%(43/90),说明规模化鸭场的H5亚型免疫抗体水平还有待提高,以对家鸭提供确实的保护;H7亚型禽流感病毒抗体阳性率为0,规模化鸭场没有H7亚型禽流感病毒感染。 相似文献
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为了解湖南省永州市活禽市场禽流感病毒污染状况,2017年4—12月,永州市动物疫病预防控制中心在冷水滩区采集571份家禽和环境样品,进行了H5、H7亚型禽流感病毒核酸实时荧光定量RT-PCR 检测。结果显示：571份样品中,检出H5亚型禽流感病毒核酸阳性样品44份,阳性检出率为7.7%,未检出H7亚型禽流感病毒阳性样品;除5月份外,每月都能监测到阳性样品,且冬季阳性检出率明显偏高;活禽在摊位中停留时间越长,禽流感病毒阳性率越高;鸭源样品和污水样品中的禽流感病毒检出率最高,城乡农贸市场的病毒阳性检出率高于城区活禽交易市场。调查结果表明,活禽市场中的H5亚型禽流感病毒污染率较高,尤其是水禽和污水以及卫生条件较差的市场。因此,要严把市场休市清洗消毒关,提升市场环境卫生水平,严格活禽调运检疫和监管,禁止陆禽和水禽混合销售。 相似文献
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《畜牧兽医学报》2020,(6)
旨在提高对禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)检测效率,及时发现疫病。本研究通过分析M基因以及H5、H7和H9亚型的HA基因序列保守区域,设计并合成了相关探针和引物,建立了禽流感病毒(AIV)四重荧光RT-PCR检测方法,该方法可在检测禽流感病毒(AIV)的同时,确定病原是否为H5、H7和H9亚型。结果显示,该检测方法耗时短、特异性好、检测下限达到10~(-5) ng·μL~(-1)。采用该方法检测临床采集的13个活禽交易市场的384份禽咽喉和泄殖腔双拭子样品,经检测,其中有60份样品为流感病毒阳性,且全部是H9亚型,该结果与行业标准方法(NY/T 772—2013)检测结果一致,κ值为1 (P0.001)。本方法能实现对禽流感病毒及H5、H7和H9亚型的高通量快速检测,将在AIV快速检测中发挥重要作用。 相似文献
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为了解渭南市H5亚型和H7亚型高致病性禽流感(HPAI)免疫情况,2020—2022年,随机抽取规模养鸡场和散养户采集血清样品,采用血凝和血凝抑制试验进行禽流感病毒免疫抗体检测,并对检测数据进行统计分析。结果显示:H5亚型HPAI免疫抗体合格率为96.28%,H7亚型HPAI为92.24%;2020年H5亚型HPAI抗体合格率极显著高于H7亚型(P<0.001),2022年H5亚型HPAI抗体合格率显著高于H7亚型(P<0.05);12个区域的H5亚型HPAI抗体合格率为85.00%～100%,H7亚型HPAI抗体合格率为70.48%～98.80%;规模养鸡场、散养户的H5亚型、H7亚型HPAI平均抗体合格率均存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,渭南市H5亚型和H7亚型HPAI抗体水平较高,免疫效果较好。建议规模化养鸡场持续做好免疫效果评估,散养户加强免疫主体责任意识,以进一步提升禽流感整体防控水平。 相似文献
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《养禽与禽病防治》2017,(8)
为了验证荧光免疫层析法检测H7亚型禽流感病毒的可行性,采用荧光免疫层析法分别对标准抗原和临床样品进行检测,评价该方法的特异性、敏感性、稳定性和方法的适用性。结果为H7亚型流感病毒荧光免疫层析试纸条能够检出H7N9、H7N2亚型禽流感抗原阳性,对其他抗原检测结果为阴性;能检出H7N9、H7N2亚型禽流感病毒抗原(血凝效价1:512)1 000倍的稀释度;检测10次H7N9亚型禽流感抗原的变异系数为1.12%,差异不显著;检测临床100份样品结果均为阴性。结果表明,应用荧光免疫层析法检测H7亚型禽流感病毒操作简便、试验时间短、不受人为因素干扰,适合市场、养殖场大规模的监测或检疫。 相似文献
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正一、我国禽流感流行病学调查简况国家禽流感参考实验室从2008年开始每年进行大量的禽流感流行病学调查工作,主要是在活禽交易市场、屠宰场和养殖场等采集鸡、鸭和鹅等各种禽类喉头与泄殖腔棉拭子以及血清样品。2013年从24个省份采集了30 109份病原学检测样品和12 877份血清学检测样品。监测结果表明,我国存在的禽流感病毒亚型较多,分到的禽流感病毒有H5、H9、H7、H6、H3、H4、H10、H11、H1、H2、H8等多种亚型。其中,几乎所有的H5亚型和H7亚型禽流感病毒均分自活禽交易市场或屠宰场;从 相似文献
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对崇左市2017年10月至2018年9月家禽实施免疫重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1亚型Re-8株+H7N9 H7-Re1株)的免疫效果进行了评估,旨在为崇左市家禽禽流感防控决策提供参考。结果表明,H5亚型禽流感免疫抗体合格率为90.35%,H7亚型禽流感免疫抗体合格率为84.94%,禽流感病毒核酸均为阴性。H5+H7免疫抗体水平较高,抗体合格的血清中,H5平均效价为8.33log2,H7平均效价为7.41log2,疫苗安全稳定,可有效抵抗当前禽流感流行毒株的侵袭。 相似文献
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快速检测和鉴定禽流感病毒(AIV)亚型对该病的防控具有重要意义。参考文献报道设计合成引物,采用二步RT-PCR方法,从H5/H7亚型AIV血凝抑制抗原和H9鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,建立禽流感病毒通用、H5/H7/H9亚型和N1-N9亚型鉴定方法。结果表明:针对AIV基质蛋白基因(M)和核蛋白基因(NP)的通用检测方法能有效扩增出目的条带;鉴别H5/H7/H9亚型的复合PCR扩增结果与预期目标一致;鉴别N1-N9亚型PCR方法扩增出N1/N2/N6/N9亚型目的条带;与其他4种常见病原无交叉反应。初步应用该方法检测样品,证明该方法对禽流感快速诊断和亚型鉴定具有潜在的应用价值。 相似文献