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用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角体病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
在常规ELISA间接法的基础上,应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。3龄幼虫饲喂表层涂有HaNPV人工饲料后9小时,即可在幼虫抽提液中检出病毒粒子抗原,而典型病虫显症需5~6天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒的方法。利用单克隆抗体结合ELISA试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫,表明在江苏和山东不同棉区均可检测到HaNPV病毒粒子,但地区间棉铃虫核型多角体病毒检出频率有显著差异 相似文献
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几种危险性病毒抗血清的制备及检测方法的建立 总被引:1,自引:2,他引:1
番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒用改进的方法提纯后免疫兔子,制备出高质量的抗血清。琼脂扩散效价为1/320,用SPA-ELISA方法检测病汁液可达10-3~10-4。3种血清之间无交叉反应,与健康寄主和常见的自然寄主蛋白也无反应。应用3种血清分别对23种植物100多个采集的样品和进口种子进行了SPA-ELISA检测,未发现有上述3种病毒存在 相似文献
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利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清,对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明,间接法(I-ELISA)和夹心法(DAS-ELSIA)能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌,但在检测病组织时,夹心EISA的特异性较强,能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌。 相似文献
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浅谈植物病毒ELISA检测试剂盒中阳性对照问题 总被引:1,自引:1,他引:0
在植物病毒的血清学检测技术中,阴性和阳性对照的设立是必需的。由于ELISA试验本身的优点,使得它在血清学检测技术中应用最为广泛,随着技术的发展,现在有多种商品化的试剂盒出现。就ELISA试剂盒而言,毫无疑问需要给用户提供相应的对照,包括阴性和阳性对照... 相似文献
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酶联免疫技术检测植物病原真菌 总被引:4,自引:1,他引:3
70年代初期Clark和Adams将酶联免疫吸附检测(Enzyme-LinkedImmunosor-bentAssay,简称ELISA)用于植物病毒分析[1]。随着进出口贸易发展,迫切需要一种快速检测农产品中植物有害真菌的方法,常规的形态学分类检测方... 相似文献
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用从猪传染性胃炎病毒(TGEV)强毒Miller株(M5C)克隆建立的一株的重组杆状病毒(R2-2)表达的重组TGEV钉状糖蛋白(Spike,S)建立了一种阻断酶联免疫吸附试验(ELISA)来检测猪群中抗TGEV抗体。实验表明,用重组病毒R2-2接种昆虫传代细胞系Spodoptera frugiperda(sf9),所表达的重组蛋白量在接种后第72小明达到最高值;该重组蛋白能与抗TGEV S蛋白A 相似文献
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两种免疫胶体金快速诊断技术简介 总被引:3,自引:2,他引:3
植物病毒的血清学检测 ,以酶联免疫吸附试验 (ELISA)最为普遍和有效 ,它在方法学上比较完善 ,是一种经典的方法。通常ELISA反应是在聚苯乙烯反应板上进行的 ,当固相载体变成硝酸纤维素膜时 ,则出现了免疫酶斑点试验 (ImmunoenzymeSpotAssay ,IESA)。若将此处的标记物由酶标记改为金标记时 ,因不需要酶促反应的底物 ,缩短了整个检测的时间 ,随着技术的不断进步 ,出现了两种免疫胶体金快速诊断技术即 :斑点免疫金渗滤试验和胶体金免疫层析试验。现分别予以介绍。1 斑点免疫金渗滤试验 (DotImmun… 相似文献
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外斑埃尺蠖核型多角体病毒的初步研究吴燕王贵成张梦麒王军伟(中国林业科学研究院森保所,北京100091)(河南内黄县鹤壁矿务局内黄林场,内黄456300)PRELIMINARYSTUDYONTHEVIRUSCAUSINGNUCLEARPOLYHEDRO... 相似文献
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免疫荧光技术和固相酶联免疫吸附法检测稻细条病菌的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
比较免疫荧光技术和固相酶联免疫吸附法对稻细条病菌的检测灵敏度,前者为10^3cfu/ml,后者为10^4cfu/ml。通过与5属9种常见病原细菌和11株来自不同地区的稻细条病菌的反应,二者均未发生交叉反应,表现出较好的特异性。对18份不同带菌材料的检测结果:IFT法检出符合率的66.67%,ELISA法检出符合率为33.33%,相比而言,在定性检测方面IFT是比ELISA操作更简便,更灵敏的快速检 相似文献
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梨中AVERMECTIN B1残留的酶联免疫吸附测定 总被引:2,自引:0,他引:2
本文建立了检测梨中Avermectin B1的间接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)。以结合物4″-O-(单)琥珀酰Avermectin B1-BSA免疫家兔,制备特异性针对Avermectin B1的多克隆抗体。梨样本经甲醇提取后用ELISA检测。在6.0 ̄60mg/kg添加浓度范围内,Avermectin B1的回收率为86% ̄105%,变异系数(CV)为4% ̄8%。样本检测限为0.1mg/ 相似文献
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以莴苣花叶病毒(Letucemosaicvirus)及其单克隆和多克隆抗体为试材,以直接ELISA、生物素抗生物素ELISA和异种动物双抗体夹心ELISA为方法,分别用酶联放大系统进行比较,发现酶联放大系统比常规的方法灵敏度高3~10倍,其中以生物素抗生物素酶联放大系统效果最好,灵敏度达1ng 相似文献
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用特异性抗血清制备的抗血清纸片应用于酶联免疫吸咐实验(ELISA),取得了良好的结果。目前已将抗血清纸片用于南芥菜花叶病毒(ArMV)、番茄环斑病毒(TomRSV)、烟草环斑病毒(TRSV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)等进境植物危险性病毒的检测,取得与使用冻干保存抗血清相同的效果。应用抗血清纸片方便、经济、便于保存和邮寄。 相似文献
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一种新型病毒检测技术 总被引:1,自引:0,他引:1
一种新型病毒检测技术(河北农业技术师范学院河北昌黎066600)刘品贤有关植物病毒的诊断和鉴定方法是很多的,常用的有免疫扩做法、凝聚法、酶联免疫鉴定法(ELISA)、荧光抗体法、直接荧光诊断法(DFD)、免疫吸附电镜法等。应用上述方法对病毒进行检测,... 相似文献
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从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒(applechloroticleafspotvirus,Trichovirus组)的PBM1毒株能引起李品种“Hauszwetshe”的假痘病,将其繁殖在昆诺藜(Chenopodiumquinoa)上。感染PBM1毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每100g叶组织的病毒产量平均为1.68mg。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,病毒外壳蛋白的分子量为21.5kDa。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ELISA法,对感染PBM1的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。 相似文献