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相似文献
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1.
试验旨在通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导奶牛子宫内膜上皮细胞构建子宫内膜炎体外感染模型,研究子宫内膜炎对奶牛子宫容受性因子大分子转膜黏蛋白-糖蛋白1(MUC-1)、高度保守的分泌型WNT家族亚型糖蛋白(Wnt-7a)、β受体1(IFNAR1)、IFNAR2、Integrinαvβ3 mRNA及蛋白相对表达量的影响,进而阐明子宫内膜炎引起奶牛屡配不孕和繁殖率低下的机制。采用组织块法分离培养奶牛子宫内膜上皮细胞,免疫荧光方法鉴定细胞纯度,不同浓度LPS刺激子宫内膜上皮细胞,在不同时间点用CCK8测定细胞存活率,ELISA检测炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8的分泌变化,实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测子宫内膜感染模型中子宫容受性因子MUC-1、Wnt-7a、IFNAR1、IFNAR2、Integrinαvβ3 mRNA及蛋白的表达变化。结果显示,通过组织块法纯化获得的奶牛子宫上皮细胞数量较多,经免疫荧光角蛋白染色证实纯度较高。采用CCK8测定细胞存活率发现,与对照组相比,浓度为0、5、10、50μg/mL的LPS作用6、12、24、48 h后,细胞活力无显著变化(P0.05);浓度为100μg/mL的LPS作用24 h时,细胞存活率显著低于对照组(P0.05),细胞培养上清中的IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8含量均显著高于对照组及低浓度组(P0.05),引起细胞的炎症反应。与对照组相比,模型组MUC-1 mRNA及蛋白的相对表达量均极显著增加(P0.01);Wnt-7a mRNA及蛋白的相对表达量均极显著下降(P0.01);Integrinαvβ3、IFNAR1和IFNAR2 mRNA相对表达量均极显著下降(P0.01),蛋白相对表达量均显著下降(P0.05)。结果表明,浓度为100μg/mL的LPS作用24 h可成功构建子宫内膜炎体外感染模型,子宫内膜炎对奶牛子宫容受性因子MUC-1、Wnt-7a、IFNAR1、IFNAR2、Integrinαvβ3 mRNA及蛋白表达的影响可能是引起奶牛屡配不孕和繁殖率低下的重要原因。  相似文献   

2.
本研究旨在通过对血浆和子宫分泌物中NO浓度及奶牛子宫组织超微结构的变化来探讨NO在炎症反应中的作用及在子宫内膜炎惠牛早期诊断中的作用.选用产后健康荷斯坦奶牛5例(N)为对照组,亚临床型子宫内膜炎奶牛(SE)和临床型子宫内膜炎奶牛(CE)各10例,经颈静脉、子宫腔内分别获取血液样本及子宫分泌物;应用子宫内膜取样器获得每组奶牛子宫内膜样本,应用光镜和透射电镜观察子宫组织结构的变化.结果发现,SE组和CE组血浆和子宫分泌物中NO浓度均显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于对照组;光镜和电镜下,SE及CE组奶牛的子宫内膜上皮细胞排列、细胞膜的完整性、细胞结构等均发生相应的变化.说明NO浓度随着炎症的发展而改变,炎症越明显,子宫内膜的变化越明显,NO浓度和牛子宫内膜超微结构的变化可作为诊断子宫内膜炎的一个依据  相似文献   

3.
为了探讨奶牛子宫内膜组织中β-防御素、TNF-α和TLR4mRNA表达与炎症发生的关系。取奶牛子宫内膜组织,根据病理切片结果分成子宫内膜炎组和对照组,用RT-PCR分别测定各组的β-防御素、TNF-α和TLR4的mRNA。结果发现,子宫内膜炎组的LAP、BNBD5的mRNA表达极显著高于对照组(P<0.01),BNBD4的mRNA表达显著高于对照组(P<0.05),奶牛子宫内膜组织不表达TAP;且子宫内膜炎组的TNF-α和TLR4的mRNA表达显著高于对照组(P<0.05)。结果表明,奶牛子宫内膜炎的发生与β-防御素、TNF-α和TLR4都具有密切相关性,其中LAP、BNBD4和BNBD5这3种β-防御素参与奶牛子宫内膜炎的发生;TNF-α和TLR4可以作为炎症发生的信号分子。  相似文献   

4.
试验旨在通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导奶牛子宫内膜上皮细胞构建子宫内膜炎体外感染模型,研究子宫内膜炎对奶牛子宫容受性因子大分子转膜黏蛋白-糖蛋白1(MUC-1)、高度保守的分泌型WNT家族亚型糖蛋白(Wnt-7a)、β受体1(IFNAR1)、IFNAR2、Integrin αvβ3 mRNA及蛋白相对表达量的影响,进而阐明子宫内膜炎引起奶牛屡配不孕和繁殖率低下的机制。采用组织块法分离培养奶牛子宫内膜上皮细胞,免疫荧光方法鉴定细胞纯度,不同浓度LPS刺激子宫内膜上皮细胞,在不同时间点用CCK8测定细胞存活率,ELISA检测炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8的分泌变化,实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测子宫内膜感染模型中子宫容受性因子MUC-1、Wnt-7a、IFNAR1、IFNAR2、Integrin αvβ3 mRNA及蛋白的表达变化。结果显示,通过组织块法纯化获得的奶牛子宫上皮细胞数量较多,经免疫荧光角蛋白染色证实纯度较高。采用CCK8测定细胞存活率发现,与对照组相比,浓度为0、5、10、50μg/mL的LPS作用6、12、24、48 h后,细胞活力无显著变化(P>0.05);浓度为100μg/mL的LPS作用24 h时,细胞存活率显著低于对照组(P<0.05),细胞培养上清中的IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8含量均显著高于对照组及低浓度组(P<0.05),引起细胞的炎症反应。与对照组相比,模型组MUC-1 mRNA及蛋白的相对表达量均极显著增加(P<0.01);Wnt-7a mRNA及蛋白的相对表达量均极显著下降(P<0.01);Integrin αvβ3、IFNAR1和IFNAR2 mRNA相对表达量均极显著下降(P<0.01),蛋白相对表达量均显著下降(P<0.05)。结果表明,浓度为100μg/mL的LPS作用24 h可成功构建子宫内膜炎体外感染模型,子宫内膜炎对奶牛子宫容受性因子MUC-1、Wnt-7a、IFNAR1、IFNAR2、Integrin αvβ3 mRNA及蛋白表达的影响可能是引起奶牛屡配不孕和繁殖率低下的重要原因。  相似文献   

5.
为了探讨奶牛子宫内膜炎发生对于子宫平滑肌收缩的影响,以及炎症对于子宫平滑肌收缩相关调控分子的影响,试验选取健康及子宫内膜炎患病荷斯坦奶牛各10头,分别作为健康组和患病组,对核因子κB(NF-κB)信号通路分子NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、NF-κB p65蛋白(NF-κB p65)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路分子p38、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和应激活化蛋白激酶(JNK)及蛋白磷酸化进行检测,对炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6]分泌情况及平滑肌收缩关键调节分子[RhoA、Rho激酶(ROCK)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、肌球蛋白轻链(MLC)、钙离子]进行检测并分析。结果表明:与健康组奶牛比,患病组奶牛子宫内膜组织IκBα、NF-κB p65、p38、ERK、JNK磷酸化蛋白水平显著升高(P0.05);TNF-α、IL-1β、IL-6促炎因子分泌量显著增加(P0.05);子宫平滑肌组织细胞内钙离子浓度显著下降(P0.05),RhoA,ROCK、MLCK表达量下降,MLC磷酸化水平降低。说明奶牛子宫组织炎症不仅损伤黏膜组织,而且还会对子宫平滑肌造成破坏,显著抑制子宫平滑肌收缩。  相似文献   

6.
通过检测基质金属蛋白酶(MMPs)在正常及患病奶牛子宫内膜组织中的表达变化,探讨奶牛子宫内膜炎的发病机理。采集正常及患子宫内膜炎奶牛的子宫内膜组织,半定量PCR法检测其中MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的酶活性。结果显示,患病组织中明胶酶的mRNA表达量显著上升,酶活性显著提高,说明在炎症发生时,明胶酶增多以降解被破坏的细胞外基质,从而修复子宫内膜。  相似文献   

7.
《中国兽医学报》2020,(1):147-152
产后奶牛子宫内膜炎高发并导致严重的繁殖机能障碍使该病防治成为当前研究重点。胆碱能抗炎症通路为新药开发提供新的靶点,主要通过烟碱乙酰胆碱受体(α7-nAChR)发挥抗炎作用,但α7-nAChR能否成为治疗奶牛子宫内膜炎的潜在药物靶点尚无数据报道。本研究的目的是调查奶牛子宫内膜组织α7-nAChR是否参与抗炎效应。结果表明,LPS刺激子宫内膜组织8和12 h il-6 mRNA表达量最高,因此选择8和12 h作为本研究炎症模型最佳LPS作用时间;α7-nAChR特异性激动剂PNU-282987在5,10和15mmol/L浓度下可显著下调促炎细胞因子il-1β、il-6、tnf-α及炎症趋化因子il-8 mRNA表达,同时环氧合酶-2(cox-2)和微粒体前列腺素E合成酶-1(mpges-1)表达水平明显下降,这种效应可被α7-nAChR特异性拮抗剂甲基牛扁碱(MLA)逆转。上述结果初步表明激动子宫内膜α7-nAChR具有抑制炎症效应。  相似文献   

8.
产后奶牛子宫内膜炎是我国奶牛养殖业高发病之一,因此开发防治子宫内膜炎的药物及筛选药物靶点是当前研究热点。前期研究表明,脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)可明显促进奶牛子宫组织前列腺素E_2(PGE_2)合成, PGE_2是炎症反应中疼痛和发热的重要介质,抑制PGE_2合成可有效控制炎症损伤。在多种组织中激动α-7烟碱乙酰胆碱受体(α-7 nicotinic acetylcholine receptor,α-7 nAChR)具有抗炎效应,但是否通过PGE_2合成途径发挥抗炎作用尚有争议。本研究目的在于调查在LPS刺激奶牛子宫内膜组织中,α-7nAChR能否调控PGE_2合成。结果表明,LPS刺激子宫内膜组织12 h IL-6 mRNA表达量最高,因此作本研究炎症模型最佳LPS作用时间;α-7nAChR特异性激动剂PNU-282987 5,10和15μmol/L浓度下可显著抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)和微粒体前列腺素E合成酶-1(Microsomal prostaglandin E synthase-1,m PGES-1)mRNA和蛋白表达及PGE_2分泌,该抑制效应可被α-7nAChR特异性抑制剂甲基牛扁碱(MLA)逆转。上述结果表明奶牛子宫内膜组织α-7nAChR可抑制LPS上调PGE_2合成效应,是防治奶牛子宫内膜炎潜在的药物靶点。  相似文献   

9.
子宫内膜炎是奶牛产后细菌感染子宫而引起的产科疾病,严重影响奶牛业的健康发展。革兰阴性细菌中的大肠埃希菌是引起奶牛子宫内膜炎的主要致病菌,细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性细菌细胞壁的重要组成成分,也是近年研究奶牛子宫内膜炎发病机制的重要诱导物。论文综述了LPS、Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)及炎性因子,初步剖析了LPS诱导的炎症反应信号传导通路TLR4信号通路,为奶牛子宫内膜炎的研究提供参考。  相似文献   

10.
奶牛子宫内膜炎是奶牛产后普遍发生的子宫内膜炎症,子宫内膜炎使奶牛产犊间期延长、产奶量减少、淘汰率升高、治疗费用增加和抗生素治疗期间牛奶废弃,造成很大的经济损失。研究表明,子宫内微生态的改变与奶牛子宫的健康状态有关,文章对奶牛产后子宫内微生物的组成和有关致病菌的致病机理进行综述,旨在为今后奶牛子宫内膜炎的诊治提供相关依据。  相似文献   

11.
宫安清治疗奶牛子宫内膜炎的效果观察   总被引:4,自引:0,他引:4  
1药物宫安清中药提取物,栓剂,由烟台金海动物保健品责任公司提供。供试牛选择肇东市境内尚家镇,黎明镇,德昌乡3个配种站点经临床诊断患有子宫内膜炎的163例奶牛。2治疗方法根据临床症状将检出的患子宫内膜炎的奶牛按其炎症类型分为卡他性子宫内膜炎、慢性子宫内膜炎和脓性子宫内膜炎。对患卡他性子宫内膜炎和慢性子宫内膜炎的奶牛采用的治疗方法是在母牛发情期(子宫颈口开张时)直接将1枚宫安清送至子宫内。取1枚宫安清置于50mL温热灭菌水中溶解,放置2h备用,然后用注射器吸入通过输精枪注入子宫体内即可。对患脓性子宫内膜炎的奶牛,首先用40…  相似文献   

12.
为了比较分析与肉牛子宫内膜炎相关基因的表达,试验分别提取正常和患子宫内膜炎水牛、奶牛及肉牛子宫内膜组织总RNA,并以水牛及奶牛为对照,采用RT-PCR方法检测肉牛Collagen、PGR及BLT2基因在正常和病理状态下的表达水平。结果表明:患子宫内膜炎肉牛子宫内膜组织中PGR基因表达丰度明显高于正常肉牛,也明显高于对照组奶牛、水牛;BLT2基因在正常奶牛和患子宫内膜炎肉牛子宫内膜组织中高表达;Collagen基因在正常奶牛子宫内膜组织中表达丰度高,而正常水牛子宫内膜组织中Collagen基因表达丰度较低。说明患子宫内膜炎肉牛、水牛及奶牛Collagen、BLT2、PGR基因表达存在明显差异。  相似文献   

13.
为揭示奶牛阴道菌群结构与子宫内膜炎发生关系,本实验选择健康奶牛和患有子宫内膜炎奶牛各5头,采集其阴道粘液样品,提取样品总DNA,利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法对这两类奶牛阴道菌群结构的差异进行了检测.检测结果显示,健康奶牛阴道内乳杆菌属(p<0.05)、芽孢杆菌属(p<0.05)和魏斯氏菌属(p<0.01)的细菌数量显著或极显著高于子宫内膜炎奶牛,而子宫内膜炎奶牛阴道内大肠杆菌数量显著高于健康奶牛(p<0.05).研究结果表明,阴道菌群结构失衡可能是奶牛子宫内膜炎发生的原因.  相似文献   

14.
本研究旨在探讨子宫内膜肥大细胞(MC)颗粒状态和组胺浓度在奶牛子宫内膜炎中的作用。选用产后6~10 d健康及患急性化脓性子宫内膜炎的中国荷斯坦奶牛各10头,分别为对照组和试验组,通过ELISA法检测子宫内膜组胺浓度和透射电镜观察子宫内膜MC颗粒状态。结果表明:试验组子宫内膜组织中组胺含量为(80.305±4.002)ng.mL-1,对照组为(39.204±4.278)ng.mL-1,二者差异极显著(P0.01);对照组子宫内膜固有层MC胞质中可见大小不等,圆形或椭圆形颗粒,均匀分布;而试验组子宫内膜固有层MC呈脱颗粒状态,表现为颗粒数量减少、分布和浓度不均、周腔增大、有空泡形成。结果提示,产后发生急性子宫内膜炎时子宫内膜MC脱颗粒,释放组胺,使子宫内膜组胺含量显著升高,这与子宫内膜的急性炎症有关,组胺可调节子宫免疫机能,可能对子宫内膜炎的发生发展具有重要作用。  相似文献   

15.
奶牛产后子宫内膜炎,是奶牛子宫内膜急性炎症,常发生于分娩后的数天之内,如不及时治疗,炎症易于扩散,引起子宫输卵管炎、卵巢炎、腹膜炎等,常转为慢性炎症,最终导致长期不孕[1]。国内奶牛子宫内膜炎造成的不孕症占成年母牛不孕症的17%以上[2],给养牛业造成巨大的损失。新疆金牛生物技术股份有限公司第八分场拥有各年龄段牛约1100头,成年牛占560头,这些牛均为全年舍饲。2004年奶牛子宫内膜炎发病率高达60%以上。笔者运用比较成熟的四组处方做对比试验,试验证明,奶牛子宫内膜炎所造成的繁殖疾病用氟哌酸和甲硝哒唑联合用药进行子宫内灌注可取得良好的效果,现报告如下:  相似文献   

16.
奶牛子宫内膜炎是奶牛常见的生殖系统疾病,因影响繁殖率而引起巨大经济损失。奶牛子宫内膜炎主要是由局部非特异感染引起,而β-防御素、TLR4、TNF-α和NO是决定局部非特异感染的重要炎性因子。探讨奶牛子宫内膜组织中先天性免疫分子与炎症发生的关系,为应用免疫学技术和基因手段来防治奶牛子宫内膜炎提供更多的理论基础,对该病的防治具有重要意义。  相似文献   

17.
胡元亮 《兽医导刊》2011,(11):44-46
一、奶牛子宫内膜炎的发病原因奶牛子宫内膜炎的防治具有重要的临床意义,要提高防治效果,必须了解其发病机理,才能做到有的放矢。奶牛子宫内膜炎的发病机理,主要有以下几点:1.免疫力低下。子宫内膜炎是子宫局部的炎症,虽然许多因素都能诱导发病,但是致病因素如何影  相似文献   

18.
《中国兽医学报》2019,(6):1208-1213
基于奶牛子宫内膜组织体外培养方法,分别采用浓度为1×10~5,1×10~6 CFU/mL的致病性大肠杆菌处理体外培养的子宫内膜组织12,24 h后用HE染色方法评价组织损伤情况,ELISA法检测组织培养液上清中IL-1β,IL-6和PGE_2的分泌变化,RT-qPCR法检测IL-1β和IL-6基因表达变化。结果显示:与对照组相比,大肠杆菌分别处理12,24 h后奶牛子宫内膜组织中子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞脱落、坏死、崩解,并且显著提高奶牛子宫内膜组织IL-1β,IL-6和PGE_2的分泌及IL-1β和IL-6的mRNA的表达量。结果表明:成功建立了体外大肠杆菌型奶牛子宫内膜炎模型,且IL-1β,IL-6和PGE_2在大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织炎症反应中发挥着重要的调控作用。  相似文献   

19.
奶牛子宫内膜炎是奶牛普遍发生的子宫内膜的炎症,是奶牛生殖系统的常见病,发病率高达20%~40%,包括急性子宫内膜炎、慢性子宫内膜炎、隐性子宫内膜炎、子宫积水和子宫积脓;急性期治疗不及时,或治疗不彻底而转为慢性,多为子宫黏膜的慢性炎症。临床上按炎症的性质可将慢性子宫内膜炎分为粘液性、粘液脓性、脓性、脓性假膜性和坏死性子宫内膜炎。该病对繁殖的影响依据炎症的程度、子宫内膜损伤恢复需要的时间、子宫内膜腺体的损伤、输卵管环境的改变不同而不同,子宫内膜炎使产犊间隔延长、产奶量减少、  相似文献   

20.
子宫内膜炎,严重影响奶牛受胎率。1987年,我们应用西德产“露它净”(Iot-agen)治疗奶牛子宫内膜炎,疗效显著,现已在我区推广应用。前言子宫内膜炎是经产奶牛常见病,据我区新狮乡调查,1060头产奶牛中,有640头患有子宫内膜炎,发病率达60%以上。炎症分泌物污染子宫环境,影响精子活力,使受精  相似文献   

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