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1.
肝素浓度和作用时间对绵羊精子体外获能和体外受精的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
摘 要：通过研究添加不同的肝素浓度(0、5、10、20、50μg/ml)及不同作用时间（0、30、45、60、90、120min）对绵羊精子体外获能、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添加10μg/ml肝素作用45min时,其获能率最高,顶体反应率最低（40.92％和16.59％）（P<0.05）,存活时间18h,能够提高受精卵的囊胚发育;单独使用咖啡因或与10μg/ml肝素联合使用,其获能效果均不如单独使用10μg/ml肝素。说明绵羊精子获能时肝素的适宜浓度是10μg/ml,作用时间是45min,咖啡因无协同肝素促进获能的作用。 相似文献
2.
不同诱导剂对山羊精子体外获能和受精能力的影响 总被引：6，自引：0，他引：6
比较不同获能诱导剂对山羊精子体外获能及受精能力的影响,优化山羊早期胚胎体外生产技术体系。山羊精子分别以不同浓度肝素、IA和EGS处理后,检查精子获能率、活力和体外存活时间,同时与体外成熟的卵母细胞受精,观察不同获能处理对精子受精能力的影响。在培养液中添加5,10,20μg／mL肝素,都能促进精子获能,其中10μg／mL组的获能率达到55．6％,存活时间为18～19h;低于此浓度,获能率显著降低,高于此浓度,获能率升高不显著,但精子存活时间和活力明显下降。0．1,0．4,0．7μmol／LIA都能提高精子获能率,其中0．4和0．7μmol／L处理组精子获能率最高,分别为56．2％和53．6％,但两组中的精子活力和存活时间有明显差异。5％,10％和20％EGS都能提高精子活力,延长体外存活时间,但实验组的获能率最高不到20％。10％EGS获能组的受精率和卵裂率分别为27．9％和18．6％,显著低于10μg／mL肝素和0．4μmol／L IA组,后两者的受精率相似,但IA组的卵裂率明显高于肝素组（52．0％VS40．2％,P〈0．05）。10μg／mL肝素和0．4μmol／L IA都可诱导山羊精子高水平获能,并获得较好的受精能力,但IA表现出更强的促卵裂发生效应。 相似文献
3.
【目的】为了探讨不同冻精处理方法以及添加精子活力激活剂并孵育不同时间获能对体外受精及受精卵发育的影响。【方法】研究对体外受精前的牛冷冻精液分别采用直接离心法、上游法和Percoll法3种方法处理,并对处理后的精液分别用含2.5mM或5.0mM咖啡因的获能液（BO液＋10μg/ml肝素钠）在培养箱内预先孵育10min或30min进行获能,不同处理的精子经体外受精后。【结果】结果表明：（1）3种冻精处理方法（直接离心洗涤法、上游法、Percoll法）对精子处理获能,IVF后受精卵的卵裂率（依次为51.58%、52.83%、53.20%）均无显著差异（P＞0.05）;桑椹胚、囊胚发育率Percoll法处理组（16.66%、10.18%）与上游法处理组（17.85%、16.07%）以及Percoll法处理组与直接离心洗涤法组（8.77%、7.01%）均无统计学差异（P＞0.05）,同时实验结果还表现出上游法处理组比Percoll处理组的桑囊胚率有所提高,且上游法处理组与洗涤法处理组在桑、囊率上出现了显著差异（P＜0.05）。（2）获能液中添加咖啡因组比非添加组(对照组)卵裂率和桑囊胚率有所增加,其中添加5.0mM咖啡因组精子孵育30min的获能效果最佳,卵裂率、桑囊率达到68.59%、28.50%。【结论】以上结果表明上游法处理牛冷冻精液稍优,更有利于以后的受精卵发育;添加咖啡因能提高精子活力,且高浓度的咖啡因维持精子高活力持续时间较长。 相似文献
4.
卵黄和低密度脂蛋白对冷冻保存绵羊精子胆固醇、磷脂含量的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
为了探索绵羊冷冻精液受精率低的原因,在稀释液中用低密度脂蛋白代替卵黄冷冻绵羊精液,研究LDL对冷冻中精子脂类含量的影响。结果表明,以卵黄稀释液冷冻精液,精子胆固醇含量从鲜精的234．54nmol／10^9降低到163．76nmol／10^9精子,胆固醇与磷脂的比值（c／p）从0．54下降到0．36;以9g／100mL LDL代替卵黄,冷冻后胆固醇含量为243．73nmol／10^9精子,c／p值保持在0．50。研究得出在卵黄稀释液中冷冻绵羊精液,精子胆固醇流失,c／p值下降;以LDL代替卵黄,可有效保护精子胆固醇,避免流失,维持了精子c／p值。 相似文献
5.
摘要：【研究目的】在温室内种植中油杂2号油菜,当长至2-3片真叶时,使用水杨酸（10mg/mL）、核黄素（1mmol/L）、氯化汞（0.01%）和BTH（0.5mmol/L）四种化学物质,对叶片进行诱导处理,研究其对油菜叶片β-1,3-葡聚糖酶的诱导。【结果】水杨酸、核黄素和氯化汞处理的油菜叶片,β-1,3-葡聚糖酶在短期内活性达到第一个高峰后随之下降,然后又上升。BTH处理的油菜叶片在处理后第五天达到活性高峰。【结论】几种化学物质处理后油菜叶片中β-1,3-葡聚糖酶的活性均有不同程度的提高;其中以BTH的诱导作用最强。对于油菜β-1,3-葡聚糖酶活性诱导的研究有利于深入了解β-1,3-葡聚糖酶在病程反应过程中的作用。 相似文献
6.
针对奶牛胚胎体外生产环节,对体外受精和培养等技术进行了研究,旨在建立奶牛性控胚胎体外生产技术体系。结果表明,卵母细胞外周卵丘细胞至少保持3层以上,在成熟基础液中添加10 ng/ml的EGF,利于核质成熟;在精子获能液中添加咖啡因降低精子的存活时间;牛胚胎前3 d用CR1aa+BSA培养,再用SOFaa+5%FBS培养,获得高的囊胚发育率,并且添加50 ng/ml IGF-I后胚胎的发育得到了很大的改善。利用性控精液进行体外受精,受精率有轻微下降,但对生产的胚胎发育质量无明显（P>0.05）影响,胚胎移植后受胎率为40%左右。 相似文献
7.
提高西门塔尔牛冷冻精液使用效果的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为提高西门塔尔牛冷冻精液的使用效果,从筛选稀释液配方、选择最佳解冻温度与解冻后保存温度三个方面进行了研究。实验结果表明：（1）通过比较三种冷冻精液保存稀释液对冷冻后精子活力的影响,表明稀释液Ⅲ和稀释液Ⅱ的保存效果均极显著优于稀释液Ⅰ的保存效果（P<0.01）,稀释液Ⅲ与稀释液Ⅱ间的保存效果差异不显著（P>0.05）（2）将牛细管冻精在不同温度、不同时间下进行解冻,解冻后精子活率随解冻温度升高（40℃~65℃）而升高,但高温下（80℃）解冻精子活率低于解冻温度为（40℃~65℃）（3）在两个温度范围进行精液解冻后保存试验,结果以（0℃~5℃）范围解冻后保存效果较好。 相似文献
8.
影响绵羊胞质内单精子注射结果相应因素的分析 总被引：1，自引：1，他引：0
本实验探讨了绵羊卵母细胞成熟以及胞质内单精子注射的相应影响因素,以期优化绵羊ICSI的操作技术和体外成熟体系。本研究分别设定三组卵母细胞成熟时间（19~21h,23~25h,
28~30h）,同时比较“6”, “12”点和“7”, “11”点注射位置对胞质内单精子注射后胚发育的影响。结果表明,绵羊卵母细胞在成熟23~25h之间进行单精子注射后,其囊胚率显著高于19~21h和28~30h(6.30±0.59%vs 4.05±0.63%,3.59±0.29),研究注射位置对胚胎发育影响时研究结果显示,在“6”, “12”点注射后其胚胎的卵裂率（54.17±3.24 vs 46.40±3.22%）和囊胚率（5.88±0.30 vs 2.77±0.15）均明显高于“7”, “11”点。因此,实验表明,应尽量使用成熟23~25h的绵羊卵母细胞进行胞质内单精子注射,同时注射时应选择“6”, “12”点的位置,从而利于胚胎的后期发育。 相似文献
9.
研究了离子霉素处理时间、处理浓度和不同胚胎基础培养基对猪无透明带卵孤雌激活的影响。结果表明：(1)10 μM离子霉素处理5 min、7 min、10 min的激活率64.81%、66.67%、68.75%差异不显著（P>0.05）,但显著高于处理3 min的激活率36.17%。（2）分别以10 μM、15 μM离子霉素处理10 min的激活率68.18%、65.11%差异不显著（P>0.05）,但显著高于5 μM的激活率40.54%(P<0.05)。（3）分别以NCSU-23+4%BSA和TCM199+4%BSA作为基础培养基进行培养,其激活率68.51%、62.50%无显著差异（P>0.05）。试验结果表明：10 μM离子霉素处理5 min联合2 mmol/L6-DMAP处理2 h激活, 以NCSU-23+4%BSA为胚胎基础培养基能有效提高猪无透明带卵孤雌激活的激活率。 相似文献
10.
【目的】为探索新疆草原兔尾鼠（Lagurus lagurus）卵透明带3（lZP3）在精卵结合中的机理，有效的控制草原兔尾鼠的生育；【方法】将RNA干扰载体pGenesil-ZP31和真核表达质粒p-ACLC一起通过尾静脉大容量快速注射法（Hydrodynamics-based transfection method, HD法）共注射小鼠。【结果】半定量RT-PCR和real-time PCR结果表明，2种质粒共注射时，pGenesil-ZP31的干涉作用至少发生在注射后的8 h到10 d之间；顺序性注射实验中，注射pGenesil-ZP31后间隔8 h和1 d再注射p-ACLC时，pGenesil-ZP31能在一定程度上干涉lZP3 mRNA的表达，间隔3 d以后lZP3 mRNA的表达几乎不受影响，未出现干涉现象。而注射p-ACLC后间隔1 h、2 h、4 h和8 h再注射pGenesil-ZP31，lZP3 mRNA的表达也受到了抑制，间隔24 h时抑制现象则消失；【结论】以载体为基础的体内RNAi过程具有时间依赖性，为在卵母细胞水平进一步研究siRNA对lZP3的干涉机制提供借鉴。 相似文献
11.
采用离心洗涤法去除精浆后,对精液进行冷冻处理。发现:1、除精浆精子冻后的活率、Ⅰ类顶体率和精子畸形率与未除精浆组存在显著差异(P<0．05);2、除精浆使稀释后精液精浆中GOT和LDH活性明显升高(P<0．05)。从平衡后到解冻后各组GOT和LDH活性都呈上升趋势。但除精浆试验组比未除精浆试验组上升缓慢;3、除精浆试验组精子的穿卵率、卵内平均精子数都显著高于未除精浆试验组(P<0．05);4除精浆离心洗涤液用生理盐水和脱脂乳-卵柠液．两者之间无显著差异(P>0．05)。 相似文献
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稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
【摘要】目的：研究在冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因或谷胱甘肽对犬精液冷冻效果的影响,以优化犬精液冷冻方案,提高解冻后精子质量。方法：在犬的常规精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度咖啡因和谷胱甘肽,经细管冷冻,解冻后通过分别评价其精子的活率、形态（包括顶体完整率和畸形率等）等来筛选其最佳添加浓度。结果：经解冻后的精液质量评价如下：（1）向稀释液中添加5mmol/L咖啡因对解冻后精子活率明显改善,为0.33±0.04（P﹤0.01）,显著高于其他组;当添加浓度为12.5mmol/L时,活率仅为0.230±0.04（P﹤0.01）,显著低于对照组;添加浓度为5mmol/L时精子畸形率最低,为0.174±0.036（P﹤0.01）,较其它组差异显著。（2）向稀释液中添加谷胱甘肽5mmol/L,精子活率为0.31±0.054,顶体完整率为0.438±0.022,畸形率仅为0.162±0.025,均优于其他浓度组,差异显著（P﹤0.01）。 结论：在犬的精液冷冻液中分别添加适量浓度的咖啡因或谷胱甘肽均对冷冻效果有显著的促进作用。 相似文献
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陕北绒山羊冷冻精液稀释液添加中草药试验 总被引：1，自引：1，他引：0
本试验旨在探究陕北绒山羊冷冻精液稀释液添加以淫羊藿为主的中草药提取液,对解冻后精子质量的影响。试验分取四种单方和复方提取液按 5%,10%,15%和20%四种体积分数添加到稀释液中,制作细管冻精,比较解冻后精子活率,畸形率,顶体异常率,常温下存活时间,有效存活时间与对照组的差异。结果显示：陕北绒山羊冷冻精液稀释液添加中草药提取液,可以提高冷冻精液解冻后精液的质量。其中以添加淫羊藿、巴戟天、菟丝子、甘草等中草药的复方配方在占冷冻稀释液总量的10%时,解冻后精液质量最好：其平均值为活率0.433,精子畸形率14.28%,顶体异常率16.64%,精子存活时间和有效存活时间分别为8.00h、4.56h。 相似文献
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不同双糖组合对猪精子冷冻保存效果的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为了评价不同的双糖（乳糖、蔗糖和海藻糖）添加于卵黄基础稀释液中对猪精子的冷冻保护作用,实验采用了7个冷冻保护液配方,其中第一个配方为前期实验筛选得到的乳糖卵黄稀释液（LEY）,将蔗糖和海藻糖以不同的比例完全或部分替代第一个配方中的乳糖成分而获得另6个配方。精子冻后质量评价活力、顶体完整率、低渗肿胀率及畸形率等指标。结果表明,当稀释液中只添加乳糖时（LEY液,A组）,猪精子的冻后活力最低;当用蔗糖或海藻糖部分替代或完全替代乳糖时,猪精子冻后各项指标都有所改善。当33.3%的乳糖和66.7%的蔗糖进行组合（F组）时,猪精子冻后活力达37.0%±2.6%,显著优于其他各组（P ＜0.05）,其他各项指标也显著高于单一的乳糖组（A组）。研究结果表明,将不同双糖以不同比例组合添加于猪精液冷冻保护液后,以33.3%的乳糖和66.7%的蔗糖的组合（F组）对猪精液冷冻保护的效果最好。 相似文献
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抗冻剂和冷冻速率对蛋用种公鸡精液冷冻保存效果的影响 总被引：2，自引：1，他引：1
为提高蛋用种公鸡精液冷冻效果,本试验研究了抗冻剂和冷冻速率对海兰褐蛋用种公鸡精液冷冻效果的影响。试验一：采用的冷冻保护剂为二甲基乙酰胺(DMA)与二甲基亚砜(DMSO),浓度分别是6%、10%、15%。结果显示：10%DMSO处理组冷冻解冻后精子总活力达到37.4%,复苏率达到50%,活率达到58.3%;试验二：比较了3组冷冻速率,其中,以速率为7℃/min,从5℃下降至-35℃,再以速率为9℃/min ,从-35℃下降至-120℃处理组,冷冻解冻后精子总活力达到44.3%,总复苏率达到了53%,畸形率为41.9%,顶体完整率为42.9%;试验三：通过人工输精来评价其最终冷冻解冻效果（冻精解冻后的平均受精率为24.9%）。综上所述：在本试验条件下,以10%的DMSO作为冷冻保护剂,以7℃/min,从 5℃下降至-35℃,再以9℃/min,从-35℃下降至-120℃处理过的精子冷冻解冻效果最好。 相似文献
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酉州乌羊精液品质评定及稀释液配方研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了保护和利用酉州乌羊种质资源,作者对酉州乌羊种公羊的精液品质进行了评定,并试验筛选适合酉州乌羊精液的优良稀释液配方。研究结果表明,酉州乌羊射精量为0.85 mL、活力为81.56%、精子畸形率为7.27%、顶体完整率为91.48%、精子密度为23.8亿/mL,均属正常范围,符合GB20557- 2006山羊精液标准;Ⅲ号精液稀释液保存效果显著优于其它稀释液配方（P＜0.05）,其低温环境保存精液效果明显好于常温和高温。结论：保护场内酉州乌羊种公羊的精液品质较好,可以进行正常的配种和使用,稀释液Ⅲ号适用于精液保存。 相似文献
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毛酸浆柠檬蜜酒的研制 总被引：1，自引：0，他引：1
以毛酸浆果、柠檬、蜂蜜为主要原料,通过酵母菌的发酵作用,酿制毛酸浆柠檬蜜酒。正交试验优化出的最佳发酵工艺条件为:发酵温度20℃,发酵时间7d,果酒活性干酵母与葡萄酒活性干酵母之比1∶2.5,酵母添加量0.08%,发酵糖质量分数16%,pH值3.2。酿制的毛酸浆柠檬蜜酒色泽金黄、澄清透明、醇和清新、酸甜爽口,具有谐调的果香和酒香。酒精体积分数为8.1%;总糖质量分数为8.0%;总酸含量为6.26g/L。 相似文献
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Ca2+和茉莉酸对菠菜CBF表达的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为探究钙离子、茉莉酸（Jasmonic acid,JA）对菠菜CBF转录因子表达的影响。以菠菜（Spinacia oleracea L.）为材料,对其进行低温(4℃)或JA处理、或用钙离子载体A23187预处理菠菜幼苗,利用Northern印迹技术检测各处理时CBF的表达情况。结果表明,低温和JA均可诱导菠菜中CBF基因的表达。推测低温可能首先导致细胞中JA含量升高,JA通过一定的机制诱导细胞质基质中游离钙离子浓度（[Ca2+]cyt）升高,然后Ca2＋可能通过CaM (Calmodulin)或CaM相关蛋白传递低温信号,从而诱导CBF的表达。 相似文献