阳离子交换法提取蛋清溶菌酶的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

余海芬  马美湖  刘岩 《中国家禽》2008,30(24)

采用静态离子交换法从鸡蛋清中提取溶菌酶,探讨不同条件对溶菌酶收率等的影响,确定了最优操作参数,所用树脂为D152阳离子交换树脂。最佳提取条件为：树脂用量占蛋清体积的30％;吸附时间6h;去离子水洗涤杂蛋白3次;用10％硫酸铵溶液洗脱3次,洗脱时间1h;用洗脱液体积2倍的丙酮沉淀溶菌酶,试验从300mL蛋清中制得溶菌酶0．896g,得率0．295％,比酶活可达9500U／mg左右,纯度为96．3％  相似文献   

柞蚕蛹溶菌酶的诱导与提取     

吕建秋  陈凤珍等 《蚕业科学》1990,16(4):213-218

本文报道热空气、大肠杆菌K_(12)D_(31)诱导柞蚕蛹(Antheraea pernyi)血淋巴溶菌酶活力提高的最适条件以及从柞蚕蛹免疫血淋巴中提取溶菌酶.以Sephadex G-50和CM-Sepharose柱层析法从柞蚕蛹免疫血淋巴中提取溶菌酶,并首次获得柞蚕蛹溶菌酶结晶,溶菌酶制剂比活力达到57353单位/mg蛋白,提高了257倍,总活力回收79.2%.首次应用选择性热变性,等电点沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、包被甲壳素-纤维素亲和层析等分离技术从柞蚕蛹免疫血淋巴中提取溶菌酶.溶菌酸制剂比活力达25 375单位/mg蛋白,提高了140倍,活力回收51%.用15%、pH4.0聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和3.0-100%.pH6.7-8.9SDS-PAGE鉴定了酶制剂的纯度,并测定了柞蚕蛹溶菌酶的部分氨基酸组成.  相似文献   

鸡输卵管表达的重组人溶菌酶的鉴定     

朱秋菊  孙怀昌  赵敏苏  王永娟  李国才 《中国兽医学报》2007,27(2):203-206

为了对鸡输卵管特异表达载体表达的重组人溶菌酶(rhLYZ)的理化及生物学特性进行鉴定,用直接结晶法从重组载体注射鸡蛋清中提取溶菌酶,以兔抗hLYZ血清为一抗,HRP-标记的羊抗免IgG为二抗,进行Western blotting检测,结果表明表达在鸡蛋清中的rhLYZ能被hLYZ特异抗体识别;将纯化的rhLYZ和天然hLYZ在不同温度的水浴中孵育30min,用RBB-R染料标记比色法检测溶菌酶活性的变化,结果显示二者的热稳定性无显著差异;将纯化的rhLYZ和天然hLYZ用不同PH的溶液稀释,40C孵育30min后进行酶的活性测定,结果显示两者在pH3.0～11.0范围内具有活性,最强活性pH为7.0;以12种常见细菌为试验对象,用最小抑菌浓度法测定含rhLYZ蛋清和纯化rhLYZ的溶菌活性,结果显示两者对鲫鱼嗜水气单胞菌、变形杆菌、枯草杆菌、无鞭毛伤寒杆菌、白色念珠菌和柠檬色葡萄球菌具有很强的抑制作用,对痢疾杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有较强的抑制作用,对有鞭毛伤寒杆菌和鳖嗜水气单胞菌无明显的抑制作用.这些试验结果显示,表达在重组载体注射鸡蛋清中的rhLYZ具有与天然hLYZ十分相似的相对分子质量、热稳定性、pH活性范围和溶菌谱.  相似文献   

牛乳中乳源糖巨肽及β-酪蛋白的分离纯化     

潘学春  黄宇  钱成林 《中国乳业》2024,(2):89-93

[目的]通过凝乳酶酶解牛乳得到乳源糖巨肽（CGMP）,利用CGMP对三氯乙酸的耐受差异,实现CGMP的分离与纯化。利用β-酪蛋白在低温低酸条件下容易游离的特性,从凝乳酶酶解后的酪蛋白中分离出β-酪蛋白。[方法]鲜牛乳经过脱脂后,加入适量凝乳酶在35℃条件下充分酶解,酶解后样品离心后得到上清液和沉淀。在上清液中加入三氯乙酸实现CGMP的除杂和沉淀,得到固体CGMP采用高效液相色谱仪测定其纯度;沉淀经过碱性复溶降低温度后,在全程低温条件下调节pH值到3.5,低温离心取上层清液,升温至35℃,再次常温离心后得到β-酪蛋白,并用高效液相色谱仪测定其纯度。[结果]当TCA浓度达到10%时,溶液中CGMP全部析出。收集分离纯化后的CGMP固体,经高效液相色谱法检测,CGMP纯度为80%～90%。在低温低酸性条件下,分离得到纯度较高的β-酪蛋白,纯度为85%～90%。  相似文献   

牛初乳中乳铁蛋白粗提工艺的优化研究     

罗芳  刘成国  徐钦  成亮 《乳业科学与技术》2010,33(1):11-14

利用盐析和有机溶剂沉淀相结合的方法对牛初乳中的乳铁蛋白进行初步的分离,采用单因素试验和正交试验的方法对影响分离效果的因素进行了试验研究,研究结果表明:用pH值8.5、80%的硫酸铵溶液进行盐析,然后用60%的乙醇浓度进行沉淀,分离的效果较好。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,乳铁蛋白的纯度大约为48%,分子量大约为78000Da。  相似文献   

杨树花提取工艺研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨海涵  房春林  李超  周小平  周联 《中国动物保健》2011,13(4):21-23

通过正交试验设计得出杨树花的最佳水提工艺为:用pH值8.0的水,提取2次,每次提取1h,过滤,合并滤液,浓缩至适量,再加入乙醇浓度至75%的沉淀,挥发乙醇至无味,调pH值即得。这样提得的杨树花溶液澄明,杂质较少,有利于提取液的稳定。  相似文献   

白三叶叶蛋白提取及纯化工艺   总被引：3，自引：0，他引：3  

吕宗友  赵国琦  苏衍菁  邬彩霞  陆银  王小山 《草业科学》2011,28(11):2052-2056

以白三叶（Trifolium repens）为材料探讨了叶蛋白的提取工艺和纯化方法。对白三叶叶蛋白提取中加热时间、温度、pH值、料液比、酸的种类等单因素以及纯化试剂甲醇、乙醇、丙酮、四氯化碳、水等进行了研究。结果表明,各单因素最佳参数为加热时间9 min,温度90 ℃,pH值 4.0,料液比1∶2,沉淀的酸为硝酸。对加热时间、加热温度、pH值和料液比进行4因素3水平正交试验,发现影响叶蛋白提取因素为pH值>温度>时间>料液比,最佳提取工艺为加热时间9 min,温度80 ℃,pH值4.0,料液比1∶2。对叶蛋白纯化结果表明,纯化剂对叶蛋白纯度的影响依次为甲醇>乙醇>丙酮>四氯化碳>水,但各种纯化剂之间差异不显著（P>0.05）。  相似文献   

不同处理条件对苜蓿叶蛋白凝聚效果的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

柳斌  席亚丽  穆峰海  王涛  曹致中 《草业科学》2010,27(1):114-118

以现蕾期新鲜苜蓿Medicago sativa为材料,采用温度、pH值单因素处理及温度、加热时间、pH值和NaCl质量分数多因素处理,探讨不同方法对苜蓿叶蛋白凝聚效果的影响。结果表明,在单因素条件下,温度以75℃为宜,pH值4.0对苜蓿叶蛋白产量、叶蛋白纯度和粗蛋白提取率有显著影响。而在多因素条件下,叶蛋白的最适凝聚组合条件为温度85℃,时间2min,pH值4.0,以及NaCl质量分数0.4%。  相似文献   

溶菌酶的制备     

何湘蓉  黄浩  刘湘新  刘自逵 《中兽医医药杂志》2007,26(5):44-45

溶菌酶(1ysozyme)又称胞壁质酶(nuramidase,E.C3.2.1.17),是由129个氨基酸组成的碱性球蛋白,等电点在pH值10.5-11.0,可溶于水和酸性溶液,而且耐热(100℃不失活)、耐干燥,在室温条件下可以长期存放,性质稳定。溶菌酶广泛存在于家禽和鸟类的蛋清、蛋壳,哺乳动物的唾液、眼泪、尿液、血浆及某些植物如萝卜、卷心菜中,其中在蛋清中含量最丰富。在食用鸡蛋时,蛋壳一般都弃作废物,其实蛋壳中也含有溶菌酶[1],因此可以利用蛋壳来制备溶菌酶。1材料与方法1.1材料1.1.1原料鸡蛋清、鸡蛋壳(新鲜、冰冻的蛋壳)。1.1.2试剂724树脂、聚丙烯酸、醋酸、氯…  相似文献   

实验室制备牛奶酪蛋白的技术研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩珍琼  方建华 《畜牧与饲料科学》2010,31(8)

对影响酪蛋白提取收得率和制品纯度的各种因素进行试验研究.确定了实验室条件下从牛奶中提取酪蛋白的技术路线和工艺参数.离心转速为5 000 r/min,离心时间为30 min,进行离心脱脂;在预热温度55℃、pH值为4.6的条件下进行酪蛋白凝聚;离心排除乳清,转速为3 000 r/min,时间为15min,经水洗涤后50℃条件下烘干3.5h,用石油醚作为有机溶剂进行抽提,最终得到纯度为95%左右的酪蛋白制品.  相似文献